生长调节物质对楸树花粉萌发及花粉管生长的影响

采用离体花粉液体培养法研究4种植物生长调节物质对不同来源楸树花粉萌发及花粉管生长的影响。结果表明：较低浓度的赤霉素促进花粉萌发及花粉管生长,高浓度则表现为明显的抑制作用,最适浓度为300 mg/L;吲哚乙酸和2,4-D对花粉的作用效果与楸树的种源有关,总体上均呈低浓度促进,高浓度抑制的规律;花粉萌发率均在吲哚乙酸为15 mg/L时达到最大值,只有2个种源与对照间差异极显著,花粉萌发率在2,4-D为200 mg/L时均达到最大值,超过最适浓度后,吲哚乙酸和2,4-D均对花粉萌发及花粉管生长表现为抑制作用;各个浓度的萘乙酸均抑制花粉萌发及花粉管生长,且抑制程度随浓度增加而加强。     

沙田柚花柱蛋白对其花粉萌发及生长的影响

以沙田柚花粉为试材,研究比较了自交和异交花柱提取蛋白对花粉萌发和花粉管生长的影响。结果表明:添加沙田柚自交、异交花柱蛋白后,花粉的萌发未受影响。但花粉管的生长情况在二者之间有明显差异,添加异交花柱蛋白对花粉管的生长没有影响,而添加自交花柱蛋白的花粉管的生长受到明显抑制。PAGE电泳显示自交花柱蛋白处理的花粉管出现了1条特异蛋白带(Rf值=0.81);SDS-PAGE电泳检测到自交花柱蛋白处理的花粉管出现了相对分子量为35.0kD和37.5kD的2条特异蛋白带;IEF-PAGE电泳的结果表明,在自交花柱蛋白处理的花粉管蛋白中出现了等电点为5.85和6.20的2条的特异蛋白谱带。     

常见的植物转基因技术及方法研究进展

该研究总结了目前最常见的几种植物转基因方法:基因枪法、农杆菌介导法、花粉管通道法、聚乙二醇介导法、病毒介导法的遗传转化原理,及其适用范围、应用实例和发展过程,并对每一种方法的优缺点进行了归纳和总结。     

杏李杂交种‘风味玫瑰’花柱类型与花粉管的生长观察

为了探索杏李品种‘风味玫瑰’产量不高不稳的原因,对其花柱退化程度、不同花型花粉活力及花粉管生长动态进行研究。结果表明:(1)‘风味玫瑰’品种异花授粉亲和性大于自花授粉,其完成双受精的时间比自花授粉提前约24 h,且花粉管生长异常现象少;(2)不同类型枝条的花柱退化花比例存在差异,一年生枝条大于多年生枝条,不同的立地因素对花型比例存在较大的影响;(3)‘风味玫瑰’和‘恐龙蛋’品种花柱萎缩花的花粉活力分别为30.97%和32.02%,均大于长花柱花的花粉活力。研究认为,由于‘风味玫瑰’品种的花柱退化比例高,阻碍了其结实率的提高。虽然把‘恐龙蛋’品种作为授粉树在一定程度上能提高‘风味玫瑰’品种的结实率,但由于其花粉活力不是太高,不能作为理想的授粉树,需要寻找另外更为合适的授粉树。     

花粉管通道法转化外源DNA的转基因技术

介绍了花粉管通道法的产生、分类及影响因素,阐述了花粉管通道法转基因技术的分子验证过程,列举了花粉管通道法在各作物育种上的应用,提出花粉管通道法应选择最佳导入方法与时期,从而提高外源DNA导人效率和遗传信息转化率,提高性状的变异频率,获得广泛的变异,提供丰富的变异材料。     

水曲柳DNA浓度及滴加时间对杨树花粉管通道法结实率的影响

[目的]对适宜的水曲柳DNA浓度及滴加时间进行初步探索,获得具有水曲柳优势性状的杨树植株。[方法]通过花粉管通道法,将携带水曲柳基因组的DNA导入杨树。人工授粉后一定时间在花柱基部进行横切,把不同浓度DNA溶液滴加到子房切口端,10 d后统计结实率。[结果]在同一时间点,随着水曲柳DNA浓度的增加,结实率呈现逐渐降低趋势;随着授粉与滴加DNA时间的延长,同一浓度下呈现出结实率先降低后升高趋势。当水曲柳DNA溶液滴加时间控制在人工授粉后6 h左右,DNA浓度为50μg/ml时是在杨树上运用花粉管通道法转化水曲柳基因最适宜的条件,结实率可达17%。[结论]滴加时间与外源DNA不同梯度水平对转化结实率有很大影响。     

刺梨花粉管萌发的荧光显微观察

花粉管作为连接柱头与胚囊的唯一结构,是外源DNA导入的通道。因此,必须首先形成花粉管通道,才能进行外源DNA的导入。本研究利用醋酸洋红染色对刺梨雌蕊、雄蕊进行显微观察,并在人工授粉后的0．5h、1h、3h、6h、10h、12h、14h、16h、18h、20h、24h和30h不同时期取其雌蕊,用苯胺蓝染色后进行荧光显微观察。研究结果初步探明了刺梨人工授粉的最佳时期在花蕾露红期;其花粉管通道从人工授粉后10h左右开始萌发,到18h左右完成萌发,花粉管萌发完成后的2～9h是利用花粉管通道法介导刺梨遗传转化的最佳时期。本研究结果将为花粉管通道法介导刺梨遗传转化技术体系的建立提供基础资料。     

克服甘薯种间五倍体杂种生殖障碍的研究

甘薯与源于甘薯近缘野生种三浅裂野牵牛（I.trifida,4x）的种间五倍体杂种杂交，结实率通常很低，严重影响种间五倍体杂种在甘薯育种中的应用。为获得上述杂交的大量后代而进行的研究表明，在甘薯种间五倍体杂种的正交组合（甘薯为母本）中，采用蒙导授粉可以克服受精前障碍而显著提高结实率；植物生长调节剂对促进花粉管生长及克服胚败育的作用较小，故改善结实性的效果不理想，但可以延长子房寿命，与蒙导授粉结合使用，能进一步提高蒙导授粉的结实率；蒙导授粉后15d的胚珠离体培养，     

利用花粉管通道技术将抗虫基因导入大豆的研究

利用花粉管通道技术，将Bt基因导入大豆品种。对132株D1代植株进行PCR检测，得到5株阳性转化植株。再将获得的5株D1代阳性转化植株的种子放在温箱中发芽，提取DNA进行检测，结果得到2株D2代稳定遗传的阳性转化植株。用X－Glue溶液对转Bt基因132株D1代植株进行检测，结果没有发现阳性反应。另外，本实验还采用荧光制片方法从植物组织结构的角度证明利用花粉管通道方法导入外源基因的可行性，并提出花粉管通道方法操作的最佳时间为授粉后6－20h。