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41.
根癌农杆菌介导的叶用莴苣基因转化系统的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
以叶用莴苣微茎尖为试材,在含有BA和NAA的MS液体培养基上旋转培养,诱导出大量愈伤组织;进一步分化培养,获得大量不定芽并生根;将愈伤组织碎块与根癌农杆菌共培养,对经卡那霉素筛选后所得到的再生植株进行X-Gluc染色,蓝色反应阳性率为80%,表明建立了叶用莴苣愈伤组织基因转化系统。 相似文献
42.
黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因转化番茄的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
通过根癌农杆菌介导,采用叶盘转化法,探讨了黄瓜花叶病毒外壳蛋白(CMV-CP)基因导入番茄栽培品种‘红宝石’的适宜条件。结果表明:适宜的卡那霉素(Km)浓度,根癌农杆菌浓度,根癌农杆菌感染时间以及共培养时间分别为35mg/L,D600约0.5,10-15min和2-3d;将诱导形成的抗性愈伤组织转接到含有35mg/L Km的分化培养基和生根培养基中使其分化不定芽和生根,获得了抗Km的番茄再生植株。对再生植株进行再欠离体培养抗Km鉴定和PCR分子检测,补CMV-C基因已导入番茄再生植株的基因组中。 相似文献
43.
44.
细菌Ⅵ型分泌系统(type Ⅵ secretion system,T6SS)是近年发现的一种分布广泛且与细菌致病性密切相关的新型分泌系统,ClpⅤ型ATPase是不同细菌T6SS中均含有的关键保守组分,据推测可能为底物蛋白的分泌提供动力,但对其生化功能尚未进行深入鉴定。在本研究中,我们克隆了根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)C58中的ClpⅤ型ATPase基因atu4344并在大肠杆菌中表达,酶学检测证实了其ATPase活性,定点突变分析发现K232/608和E299/675突变体均丧失ATPase活性,表明Walker A模体和Walker B模体与其活性密切相关。这是首次对植物病原细菌T6SS中的ClpⅤ型ATPase进行生化鉴定和突变分析研究。 相似文献
45.
46.
陕甘山桃对根癌病的抗性评价 总被引:1,自引:0,他引:1
为评价陕甘山桃(Prunus davidiana var.potaninii Rehd)对根癌病的抗性,以实生钵苗为试材,采用人工接种的方法研究了其对根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens Conn)和发根土壤杆菌(A.rhizogenes Conn)的抗性。结果表明:接种后60d,接种根癌土壤杆菌的陕甘山桃的株最大瘤径范围为0~10.1mm,平均瘤径2.7mm,接种发根土壤杆菌的株最大瘤径范围为0~11.6mm,平均瘤径3.0mm,根据抗性评价标准判定陕甘山桃群体高抗根癌土壤杆菌和高抗发根土壤杆菌。但陕甘山桃对根癌土壤杆菌和发根土壤杆菌的抗性存在广泛的的株间分离现象,均分离为免疫、高抗、中抗、低抗、感病和易感病6种类型,对根癌土壤杆菌免疫、高抗、中抗、低抗、感病和易感病型植株分别占群体总数的28%、33%、19%、13%、6%和1%,对发根土壤杆菌免疫、高抗、中抗、低抗、感病和易感病型植株分别占群体总数的16%、46%、15%、13%、8%和2%。陕甘山桃是优异的抗根癌病种质资源。 相似文献
47.
影响根癌农杆菌介导香蕉胚性悬浮细胞遗传转化的因素 总被引:1,自引:0,他引:1
用含质粒载体pCAMBIA1301的根癌农杆菌EHA105转化贡蕉(Musa A A Pisang Mas cv. Mas)品种的胚性悬浮细胞,通过测定GUS基因瞬时表达率,对转化初期的主要影响因素进行了研究。结果表明,取处于对数期的胚性悬浮细胞和D600nm为0.2的菌液混合,在室温、8000r/min离心5min,然后在110r/min的旋转摇床上摇5min,在体细胞胚诱导培养基上共培养8d,瞬时表达率达到最高值25.30%。 相似文献
48.
49.
Inheritance and expression of transgenes in T2 and T3 generations of Lotus corniculatus transformed using Agrobacterium tumefaciens 总被引:2,自引:0,他引:2
K. Judith Webb Mervyn O. Humphreys Leif Skøt Margaret Gibbs John Gatehouse 《Euphytica》1999,108(3):169-179
The inheritance and expression of the reporter gene uidA, encoding β-glucuronidase (GUS), was previously analysed in the T1 generation of 25 independent transformed lines of Lotus corniculatus cv. Leo. In the work reported here, GUS activity in various tissues of seven of these lines was tested in the T2 generation. Four representative lines were chosen for more detailed study in the T3 generation. Lines 25 and 38 had multiple, independently segregating transgene inserts; lines 24 and 39 appeared to transmit one segregating transgene insert to their T1 progeny, although transgene expression was low and was detected in fewer seedlings than expected in line 39. The uidA gene was inherited and expressed in seedlings of T1, T2 and T3 generations of all four lines. In all lines, transgene expression varied between tissues, with more embryos than seedlings
having detectable GUS activity. Studies in the T2 generation showed that use of transgenic plants as female or male parents altered the frequency of expression of the transgene
in progeny. By contrast, in the T3 generation the use of transgenic plants as female or male parents did not effect either frequency of transmission, or expression
of the transgene, in any of the four lines. Transgene inheritance was also similar among individual pods within flower heads
and between individual flower heads.
This revised version was published online in July 2006 with corrections to the Cover Date. 相似文献
50.
豇豆胰蛋白酶抑制剂转基因棉花的获得 总被引:32,自引:10,他引:22
利用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导法将豇豆胰蛋白酶抑制剂(Cow-peaTrypsinInhibitor,CpTI)基因转移进入棉花(GosypiumhirsutumL.)。棉花幼苗的下胚轴与携带有CpTI基因和Npt-Ⅱ基因的根癌农杆菌共培养,在选择培养基上诱导出了卡那霉素抗性(Kmr)愈伤组织。选择Npt-Ⅱ阳性的胚性愈伤组织在胚状体诱导培养基上进行胚状体诱导,继而在分化培养基上进行植株分化,最终获得了再生棉花植株。经Npt-Ⅱ分析、PCR及Southern检测证明,外源CpTI基因和标记基因(Npt-Ⅱ基因)存在于转化棉株及其后代中。抗棉铃虫(Heliothisarmigera)生物活性检测表明转基因植株后代具有明显的抗棉铃虫能力。 相似文献