不同形态N-氨甲酰谷氨酸对滩羊生长性能、血清生化指标和脂肪分配的影响

试验旨在比较N-氨甲酰谷氨酸（NCG）和瘤胃保护型NCG（RP-NCG）对滩羊生长性能、血清生化指标和脂肪分配的影响。选取日龄相近、体重为（20.14±0.31）kg公滩羔羊60只,随机分为3组：对照组、0.1% NCG处理组和0.1% RP-NCG处理组,每组5个重复,每个重复4只羔羊。对照组不添加NCG,0.1% NCG组添加0.1% NCG,0.1% RP-NCG组添加0.1% RP-NCG。试验期80 d。结果显示：①与对照组相比,日粮中添加NCG和RP-NCG能够显著提高滩羊平均日增重并降低料重比（P<0.05）,但两试验组之间差异不显著（P>0.05）;②日粮中添加NCG和RP-NCG,显著降低了血清尿素氮含量（P<0.05）,但对血清总蛋白、肌酐和肌酸激酶的活性影响不显著（P>0.05）;③与对照组相比,添加NCG和RP-NCG使滩羊净肉重/胴体重显著提高（P<0.05）,皮下脂肪和GR值显著下降（P<0.05）,两试验组间差异不显著（P>0.05）;试验组肌内脂肪（IMF）含量显著升高（P<0.05）。综上所述,日粮添加0.1% NCG或0.1% RP-NCG可提高舍饲滩羊生长性能,并能改善滩羊脂肪分配。与RP-NCG相比,NCG对滩羊生长性能、血清生化指标及脂肪分配无显著影响。     

嗜热真菌Neosartorya fischeri P1脂肪酶基因的克隆、表达及酶学性质分析

从云南酸矿废水中获得了一株脂肪酶活性较高的嗜热真菌,经显微形态及转录间隔区（ITS）序列分析鉴定为新萨托菌,命名为Neosartorya fischeri P1。通过同源克隆,从该真菌中获得了脂肪酶基因Lip024,并在Escherichia coli BL21 (DE3) 和Pichia pastoris GS115 中进行表达,表达量分别为0.09 U/mL、0.26 U/mL。重组酵母菌株在3.7L发酵罐进行高密度发酵后,重组酶酶活达5.22 U/mL。重组蛋白经超滤浓缩和阴离子交换柱纯化后达到电泳纯。重组酶酶学性质分析表明：该酶的最适pH为7.0,在pH 3.0~7.0的范围内非常稳定,酶活力均保持在95%以上;最适温度为50℃,并具有一定的热稳定性。此外,Ca2+和Mg2+能够显著提高Lip024重组脂肪酶的酶活。     

猪血清中脂联素和胰岛素的发育性变化研究

采用ELISA方法检测了不同体重梯度的川藏黑猪配套系和DLY猪血清中脂联素和胰岛素的含量变化,并分析了其与肌内脂肪含量的关系.结果表明,川藏黑猪在90、110和130 kg体重时血清中的脂联素含量分别为82.49、79.15和82.49 μg/L,胰岛素含量分别为37.44、39.77和37.53 mIU/L;DLY猪血清中的脂联素含量则分别为62.59、62.86和61.81 μg/L,胰岛素分别为48.48、46.45和48.29 mIU/L,相同猪种不同体重间差异均不显著(P >0.05),而相同体重不同猪种间达极显著差异(P <0.01).相关性分析结果显示,脂联素含量与肌内脂肪含量呈极显著正相关(P <0.01),胰岛素含量与肌内脂肪含量呈极显著负相关(P <0.01),提示脂联素和胰岛素可能是通过血液来实现对猪肌内脂肪的整体调控.     

预乳化液超声处理对低脂法兰克福香肠品质的影响

【目的】采用超声法制备酪蛋白酸钠-大豆油预乳化液,将其作为猪背脂替代品加工低脂法兰克福香肠。【方法】研究不同超声预乳化液替代比例(25%、50%、75%和100%)下,法兰克福香肠的化学组成、色泽（亮度、红度、黄度）、质构特性（硬度、咀嚼性、弹性、内聚性、回复性）、保水保油性（蒸煮损失、加压损失）、水分子分布状态和微观结构。【结果】随着超声预乳化液替代比例的增加,水分含量增加,脂肪含量和能量减少（P＜0.05）,各组之间的灰分含量差异不显著（P＞0.05）,蛋白质含量变化不大;L*值显著增大,a*值显著减小（P＜0.05）;弹性、内聚性和回复性随着替代比例的增加而增大,替代比例达到50%以上时,弹性值与对照组差异不显著（P＞0.05）,替代比例达到25%以上时,内聚性显著高于对照组（P＜0.05）,替代比例高于50%时,回复性显著高于对照组（P＜0.05）,硬度和咀嚼性随着替代比例的增加而减小,但均高于对照组,质构特性提高;蒸煮损失和加压损失增加,但均低于对照组（P＜0.05）,保水保油性改善。随着替代比例的增加,T23从57.22 ms增至64.57 ms,pT23减小而pT24增加,但与对照组比,各处理组的可移动水含量高,自由水含量低。扫描电镜结果表明,100%超声替代组香肠中的乳化球体积小,填充均匀。【结论】超声处理可以减小预乳化液滴的体积并提高蛋白质分子对水油的吸附和保持能力,从而有效改善低脂香肠的食用品质。     

橘小实蝇羧酸酯酶基因BdCAREB1的克隆及其表达模式解析

【目的】在克隆获得橘小实蝇（Bactrocera dorsalis）1条羧酸酯酶基因全长序列的基础上,解析该基因在橘小实蝇不同发育阶段和组织以及经高效氯氰菊酯饲喂后的表达模式。同时结合之前完成的有关橘小实蝇羧酸酯酶生化特性以及增效剂处理研究结果,综合分析橘小实蝇羧酸酯酶对高效氯氰菊酯作用的应激反应,为明确羧酸酯酶对菊酯类杀虫剂的解毒代谢机制奠定基础。【方法】通过同源序列比对的方法,从橘小实蝇转录组数据中筛选出1条羧酸酯酶基因序列片段,利用cDNA末端快速扩增技术（RACE）扩增得到该基因的全长cDNA序列;应用生物信息学分析软件对该基因的开放阅读框、编码的氨基酸序列、分子量等信息进行预测,并基于最大似然法构建该基因与其他昆虫相关基因序列的系统发育树,阐明其分子生物学特征。此外,分别提取橘小实蝇不同发育阶段以及3龄幼虫的中肠、脂肪体、马氏管和气管等组织的RNA,在内参基因稳定性评估筛选的基础上,运用qPCR的方法解析该基因在不同发育阶段和组织间以及药剂处理后的表达模式。【结果】从橘小实蝇转录组数据库中筛选出1条长度为1 028 bp的羧酸酯酶基因片段,通过对5′端和3′端进行RACE扩增分别得到长度为1 073和625 bp的目的片段,经序列拼接和验证后,确定该基因全长为1 872 bp,完整开放阅读框1 710 bp,编码569个氨基酸,推测其蛋白质分子量为63.3 kD,理论等电点6.38。该基因经序列比对命名为BdCAREB1,GenBank登录号为KF539980。基于最大似然法构建的系统发育树显示,该基因编码的蛋白质与双翅目昆虫的羧酸酯酶具有高度的同源性。分析其在不同发育阶段的表达模式发现,BdCAREB1在3龄幼虫期的表达量最高,其次为成虫期,而在卵期的表达量最低。在橘小实蝇3龄幼虫不同组织间的定量分析结果表明,BdCAREB1在脂肪体中表达水平最高,其次在中肠和马氏管的表达水平较低且接近,而在气管的表达量最低。经饲喂0.33 μg?g-1（药剂/饲料）的高效氯氰菊酯后检测BdCAREB1在整虫及组织间的表达情况发现,该基因在幼虫以及脂肪体中的表达量显著上调。【结论】橘小实蝇BdCAREB1的表达具有发育阶段和组织特异性,在幼虫期和脂肪体的表达量最高,并对高效氯氰菊酯处理表现出明显的应激反应,具有可诱导性。结合此前完成的橘小实蝇羧酸酯酶活性测定及增效剂研究结果,分析该基因很可能参与橘小实蝇对高效氯氰菊酯的解毒代谢。     

Reduction of early sexual maturation in male S0 Atlantic salmon (Salmo salar L.) by dietary supplementation of tetradecylthioacetic acid (TTA)

Effects of dietary tetradecylthioacetic fatty acid (TTA) on muscle fat, development of gonads and early sexual maturation in S0 Atlantic salmon during the first year in sea were investigated. TTA (0.5% w/w) was added to the feeds for 8 weeks in the spring. In May, at the end of the TTA‐feeding period, the fish in the TTA group had significantly (P < 0.05) less fat (10.1%) stored in muscle compared with the control group (10.8%). In September, mean male gonadosomatic index (GSI) in maturing fish in the TTA group was found to be lower compared with the maturing fish in the control group (P = 0.05). On the basis of GSI values, male sexual maturation in September was 10.0% vs. 14.4% for the TTA and the control group respectively. Thus, relative to the control group, the incidence of male sexual maturation in the TTA group was reduced by about 1/3 (P = 0.002). Production data was not affected by dietary supplementation of TTA. This study reveals that TTA significantly reduces the incidence of male sexual maturation in S0 Atlantic salmon. A significant elimination model of TTA in fish muscle that takes into account, the growth rate of the fish was further developed in this study.     

持续高温对育肥猪不同部位脂肪代谢的影响

【目的】研究持续高温对育肥猪脂肪代谢的影响并初步探讨影响的机制。【方法】选用16头（79.6±1.2）kg的健康杜长大阉公猪,随机分为2个处理组,分别饲养于（30±0.5）℃（高温组）和（22±0.5）℃（常温组）的环控舱内,单笼饲养,自由采食和饮水。环控舱内温度在21 d试验期内保持不变,湿度控制在(55±5)%, 每天光照14 h,舱内持续均匀通风。试验期满屠宰,宰前12 h禁食,自由饮水。【结果】和常温组相比,高温组育肥猪胴体重和皮下脂肪厚有所降低,但并不显著（P＞0.10）;与常温组相比,高温组育肥猪背部皮下脂肪占胴体的比例无显著变化（P＞0.10）,肾周脂肪占胴体的比例有提高趋势（+22.06%;P=0.07）,背最长肌（LM）脂质含量有降低趋势（-22.39%;P=0.08）,表明持续高温对猪不同部位脂肪沉积的影响存在差异。持续高温显著降低育肥猪背部皮下脂肪和肾周脂肪中苹果酸酶（ME）活性（P＜0.05）和脂肪酸合成酶（FAS）活性（P＜0.05）,显著降低LM中乙酰辅酶A羧化酶（ACC）（P＜0.01）和FAS（P＜0.05）的含量,显著降低肝脏中FAS活性（P＜0.01）,FAS、ME和ACC为脂肪酸从头合成过程中的关键酶,上述结果表明,持续高温抑制育肥猪不同组织脂肪酸的从头合成。持续高温对三个不同部位脂肪中激素敏感脂酶（HSL）的含量无显著影响（P＞0.10）。持续高温对育肥猪皮下脂肪中脂蛋白酯酶（LPL）含量无显著影响（P＞0.10）,显著升高肾周脂肪中LPL含量（P=0.05）,显著降低LM中LPL含量（P=0.05）,持续高温对上述三个部位脂肪组织中LPL含量的影响规律与这3个部位脂肪沉积的影响规律相一致,表明持续高温可能通过调控LPL的含量,影响育肥猪不同部位脂肪的沉积。持续高温降低LM前部（P＜0.05）和后部（P＜0.01）的L（+）-β-羟脂酰CoA脱氢酶（HAD）的活性,HAD是脂肪酸β-氧化过程中的关键酶,上述结果表明,持续高温抑制育肥猪骨骼肌中脂肪酸的氧化供能。持续高温极显著升高LM中cAMP含量（P＜0.01）,对肾周脂肪和背部皮下脂肪中cAMP含量无显著影响（P＞0.10）。持续高温显著升高血浆中非酯化脂肪酸（NEFA）的浓度（P＜0.05）,有升高极低密度脂蛋白（VLDL）浓度的趋势（P=0.07）,对总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度无显著影响(P＞0.10)。【结论】持续高温对育肥猪不同部位脂肪沉积的影响存在差异。环境高温可能通过影响LPL的含量,调控脂肪酸的摄入,影响育肥猪不同部位脂肪的沉积。环境高温抑制皮下脂肪、肾周脂肪、LM和肝脏组织中脂肪酸的从头合成,但同时也抑制骨骼肌组织中脂肪酸的β-氧化,这可能导致血浆中NEFA浓度升高,并在肝脏重新酯化、组装为VLDL,被脂肪组织重新摄入,但血浆中NEFA和VLDL升高的机制尚需进一步研究。     

油脂来源及使用量对小鼠生长、健康、血脂和肝脏胆固醇代谢指标的影响

【目的】观察饲料中添加不同种类和不同剂量的油脂对小鼠生长性能、健康状态、血脂指标和肝脏胆固醇代谢关键基因相对表达量的影响,探讨日粮中不同油脂来源及使用量对肝脏胆固醇代谢的作用机制,为哺乳动物筛选较为适宜的油脂类型及其添加量提供理论参考。【方法】试验选取3周龄体重16-19 g的健康昆明种小鼠48只,随机分为4组,每组4个重复,每个重复3只。4组分别饲喂正常小鼠饲料（对照组）和添加4%豆油（B组）、4%乳化椰子粉（L组）以及8%乳化椰子粉（H组）的饲料14 d。试验期间,记录每天的饲喂次数、每次饲喂量、饲料剩余量,所有试验动物均自由采食和饮水。分析试验期间小鼠的体重变化和平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）以及料重比（F/G）等生长性能指标,分析小鼠的血液分布和健康指数等健康状态指标,测定小鼠的肝脏重以及甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）等血清脂质指标,运用实时荧光定量PCR技术检测小鼠肝脏组织中胆固醇7-α羟化酶（CYP7A1）、低密度脂蛋白受体（LDLR）和3-羟-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（HMGCR）这3个基因的mRNA表达水平。【结果】①生长性能方面,添加4%豆油组的小鼠体重变化、平均日采食量和肝脏脏器指数与对照组差异显著（P＜0.05）,而平均日增重、料重比和肝脏重与对照组差异不显著（P＞0.05）;添加4%乳化椰子粉组的小鼠各生长性能指标与对照组差异不显著（P＞0.05）;8%乳化椰子粉显著提高小鼠的平均日采食量（P＜0.05）,其他指标差异不显著（P＞0.05）。②健康状态方面,各试验组小鼠的血液分布和健康指数与对照组相比均无显著性差异（P＞0.05）。③血脂指标方面,与对照组相比,添加4%豆油显著降低了小鼠血清中TC和HDL-C含量（P＜0.05）,对TG和LDL-C的影响差异不显著（P＞0.05）,添加4%乳化椰子粉对小鼠的各项血脂指标均无显著性影响（P＞0.05）,添加8%乳化椰子粉能显著降低血清TC含量（P＜0.05）,但对TG、HDL-C和LDL-C无显著性影响（P＞0.05）;④肝脏胆固醇相关基因方面,添加8%乳化椰子粉组肝脏中CYP7A1基因mRNA表达量显著高于对照组（P＜0.05）,而4%豆油组和4%乳化椰子粉组与对照组相比无显著差异（P＞0.05）。肝脏HMGCR基因和LDLR基因mRNA表达水平与对照组差异不显著（P＞0.05）。【结论】日粮中添加豆油增加了小鼠日采食量和体重等指标,降低了血清总胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇;高剂量乳化椰子粉的添加提高了小鼠日采食量,降低了血清总胆固醇,并增加了肝脏CYP7A1基因mRNA的表达。相比于添加高剂量乳化椰子粉,低剂量乳化椰子粉在改善小鼠脂代谢方面应用效果并不好。添加油脂可能是通过调控肝脏中胆固醇代谢相关酶的基因表达量来影响小鼠肝脏胆固醇的代谢,从而维持体内的胆固醇代谢的稳态。     

晕清降压方对代谢性高血压部分代谢组分的影响

目的 观察晕清降压方对代谢性高血压部分组分的影响,并探讨其降压的作用机制。方法 将90例代谢性高血压患者随机分为观察组60例、对照组30例。对照组：西医基础治疗;观察组：晕清降压方治疗。于4周后统计分析两组患者治疗前后血脂、血尿酸、血压的变化。结果 观察组在改善代谢紊乱优于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,观察组在降压上与对照组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 晕清降压方在降低血压的同时,可有效改善代谢性高血压部分代谢组分,其降低血压的机制可能与改善其代谢异常组分,减轻代谢异常成分对血管造成的损害,恢复血管顺应性,降低血管阻力有关。     

胡麻粗脂肪含量的主基因+多基因遗传分析

【目的】了解胡麻粗脂肪含量的遗传方式。【方法】以用DYM×STS构建的包含233个家系的重组自交系群体(F6∶7)和2个亲本为材料,在甘肃定西、宁夏固原和河北张家口3个环境下种植,采用索氏抽提仪测定粗脂肪含量,运用数量性状主基因+多基因混合遗传模型分析方法,进行胡麻粗脂肪含量的遗传模型分析。【结果】甘肃定西、宁夏固原和河北张家口3个环境条件下家系间胡麻粗脂肪含量均存在广泛变异,表现超亲遗传现象,近似正态分布;粗脂肪含量的遗传模型均为4MG-AI,表现为4对具有加性上位性效应的主基因遗传模型,不存在多基因效应。主基因遗传率分别为92.80%,99.02%和80.71%,环境引起的变异分别为7.20%,0.98%和19.29%。【结论】胡麻粗脂肪含量受主基因控制,且存在加性上位性效应。在胡麻高油育种中,提高粗脂肪含量不仅要注重主基因的利用,也要考虑基因间的互作效应。