雷公藤角斑病菌产毒条件研究

对雷公藤角斑病菌福木假尾孢(Pseudocercospora elaeodendri)毒素的生物活性进行测定。结果表明,该菌所产生的毒素对雷公藤叶片具有毒性。生物活性测定方法选择离体叶片针刺法。对雷公藤角斑病菌产毒条件研究表明,该菌产毒的最佳培养液为查彼+培养液,最适pH值为7.0,适宜温度为29℃,并在全黑暗条件下充分震荡(120 r.min-1)培养25 d。     

雷公藤hmgr基因克隆、序列分析及诱导表达

【目的】克隆雷公藤萜类生物合成途径限速酶HMGR的编码基因,并分析雷公藤叶悬浮细胞中该基因在不同质量浓度壳寡糖诱导下的表达水平,为雷公藤萜类生物碱的生物合成提供理论依据。【方法】根据GenBank中报道的限速酶HMGR的编码基因序列合成简并引物,采用RT-PCR、5′-RACE和3′-RACE方法从雷公藤叶片中获得hmgr基因的cDNA全长序列;用生物信息学方法对限速酶HMGR进行蛋白结构及功能分析;用半定量RT-PCR方法比较hmgr基因在不同质量浓度壳寡糖诱导下的表达差异;用HPLC分析不同质量浓度壳寡糖诱导下雷公藤叶悬浮细胞中3种萜类次生代谢物(内酯醇、吉碱和次碱)的含量。【结果】获得了雷公藤中编码限速酶HMGR的基因全长cDNA序列,该序列开放阅读框长为1 860bp,编码579个氨基酸。生物信息学分析表明,雷公藤hmgr基因编码的蛋白分子质量为61.678ku,等电点为6.98,蛋白质稳定性参数为41.33,为不稳定蛋白质,氨基酸序列包含2个与NADPH结合的位点(DAMGMNM和VGTVGGGT)及2个与HMG-CoA结合的位点(EMPVGYVQIP和TTEG-CLVA)。半定量RT-PCR结果表明,经50mg/L壳寡糖诱导12h的雷公藤叶悬浮细胞中hmgr基因表达最强,且在该诱导条件下细胞中的内酯醇、吉碱和次碱的含量也有不同程度的提高。【结论】雷公藤HMGR蛋白可能为甲羟戊酸(MVA)途径中的限速酶,编码该蛋白的hmgr基因可促进雷公藤萜类物质的合成。     

Four new neolignans from the leaves of Tripterygium wilfordii

Four new neolignans, wilfordiols A-D (1-4), together with five known compounds (5-9), were isolated from an aqueous extract of the dried leaves of Tripterygium wilfordii. Their structures were determined by spectroscopic methods, including 1D and 2D NMR, HRESIMS, and CD experiments. The anti-inflammation activities of compounds 1-9 were evaluated by the inhibitory effect on NO production, in vitro.     

施肥对雷公藤叶内酯醇含量的影响

通过二次通用旋转组合设计建立雷公藤叶内酯醇含量与氮磷钾施肥量的3因子回归方程。结果表明：影响雷公藤叶内酯醇含量的顺序为：N〉P〉K，N肥对于提高雷公藤叶内酯醇含量的作用较大；应用计算机模拟试验，雷公藤叶内酯醇含量大于88．71mg／kg的优化组合为，尿素66．3～86．4kg／hm2，过磷酸钙93．9～119．1kg／hm2，硫酸钾124．0—164．1kg／hm2，可得叶内酯醇含量为90．462～110．541mg／kg，是对照内酯醇含量的4．2～5．1倍。     

雷公藤叶面积的测算方法

叶面积是树冠特征的重要标志,是估算植物特征的重要参数.通过对雷公藤叶面积、叶长、叶宽、叶长宽乘积的测量和计算,拟合了叶面积与叶长宽乘积方程,检验了叶面积测算经验公式,测算了叶相关系数,为生产实践中雷公藤叶面积的测算找到了简便、快捷、适用的方法.     

雷公藤总生物碱对二化螟的生物活性

研究了雷公藤总生物碱对二化螟的生物活性。结果表明，雷公藤总生物碱对二化螟幼虫有较强的拒食作用、生长发育抑制作用和毒杀作用。在选择性和非选择性的条件下，雷公藤总生物碱对二化螟三龄幼虫拒食中浓度（AFC50）分别是217．2和46．1mg／L；对初孵幼虫的拒食中浓度（AFC50）分别是188．3和22．5mg／L。浓度为25mg／L时，雷公藤总生物碱对二化螟幼虫生长发育抑制率为26．72％；100mg／L时为88．79％。雷公藤总生物碱对二化螟幼虫的毒杀作用也比较明显，但作用缓慢，处理24h和48h后的LC50分别为676．4和326．5mg／L。     

雷公藤粗提物对卫矛尺蠖生物活性的影响

以4龄卫矛尺蠖为试虫,以取食量、虫体质量增长率、拒食率及死亡率为指标,用非选择性取食法及小叶碟添加法,测定乙醇、稀氨水两种溶剂浸提的雷公藤根皮粉浸提物的杀虫活性.结果表明:不同浓度的两种溶剂其粗提物对试虫均有拒食、毒杀及抑制生长发育的作用,且这种作用随其体积质量的增大而明显;但乙醇粗提物对试虫的作用比稀氨水浸提液的显著,乙醇粗提物的拒食中浓度AFC50为277.33 mg·L-1,毒杀中浓度LC50为116.41 mg·L-1,而稀氨水浸提液的拒食中浓度AFC50为383.97 mg·L-1,毒杀中浓度LC50为314.96 mg·L-1.     

雷公藤水浸提液不同光照下对萝卜种子发芽的化感效应

利用水浸提的方式对人工栽培雷公藤的生化物质进行提取,并在3种光强照射下处理萝卜种子,进行发芽试验。分析结果表明：人工栽培雷公藤植株内的化感物质在不同光照条件下有不同的效应,在每日无光照条件下各处理对萝卜发芽指标的影响提高幅度远大于12 h光照和24 h光照。     

Comparative study on the anti-inflammatory and immune suppressive effect of Wilforlide A

Tripterygium Glycosides (TG) is effective in the treatment of patients with a variety of inflammatory and autoimmune diseases, especially rheumatoid arthritis (RA) in clinical. Wilforlide A (T₁) serves as a quality control standard of TG that be listed in Drug Standard of Ministry of Public Health of the People's Republic of China. The pharmacologic actions of T₁ remain to be unidentified. In this paper, we studied the anti-inflammatory and immune suppressive effect of T₁, and compared it with Triptolide (TP), which believed to be the major active component of TG. Carrageenan-induced rat pedal swelling, tampon-induced rat granulation, and mice ear inhibition rate of swelling trail results show that high-dose T₁ has obvious anti-inflammatory effect. Colorimetric detection contents of hemolysin, carbon elimination from plasma of mice, mice delayed hypersensitivity immune, and organ index were measured. The results show that T₁ has no significant immune suppressive activity, and there has a significant difference with TP and TG. Therefore, we think the content of TP also should be controlled as a supplement standard in order to ensure safe and effective medication.     

雷公藤叶面积回归方程法测算

对雷公藤叶面积、叶长、叶宽、叶长宽乘积、叶长宽比的测量和计算发现:其具有较稳定的叶长宽比和叶形,采用5个常用方程拟合,其叶长、叶宽、叶长宽乘积与叶面积间存在高度正相关关系.经验证,以一元线性回归方程的叶面积与叶长宽乘积、一元幂回归方程的叶面积与叶长宽乘积2个方程理论值与实际值差异不显著,且误差率较少,在±4%之内,能较精确测算雷公藤的叶面积.