我国部分地区ＮＤＶ的分子流行病学研究

本研究根据新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ基因编码区１－３７４位核苷酸序列计算其遗传距离并给出了ＮＤＶ的系统发育进化树，将６８株ＮＤＶ分为９个基因型（３０株为国内分离株），其中Ⅰ－Ⅵ是早已存在的老基因型，Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ为新发现的基因型，特别是Ⅸ为我国特有的基因型（Ｆ４８ＥＯ、Ｍ３、ＨＬＪ－３、ＨeB-1P和ＮＭ－５）。１９９７－１９９９年我国云南、广西、甘肃、陕西、新疆等地分离的ＹＮ－１Ｐ、ＧＸ－３、Ｈ１、Ｈ２、Ｐ１、ＧＸ－１、ＧＸ－２、ＧＳ－３、ＳＨＸ－２、ＳＨＸ－３、ＳＨＸ－６、ＳＨＸ－７、ＸＪ－２和１９９１年分离的ＨuB-1均属于Ⅶ基因型，该基因型的病毒是９０年以来引起新城疫发生的主要病原。根据遗传距离和分离年代可将此基因型进一步划分为５个基因亚型，分别是Ⅶa、Ⅶb、Ⅶc、Ⅶd和Ⅶe。此外ＨuN-1/98、HLJ-4/95和ＨeH-1P属一个老的基因Ⅵ，１９７９－１９８５年分离自青海的ＱＨ－１、ＱＨ－２、ＱＨ－４属于一个新的基因型－Ⅷ型。可见在我国新城疫的流行是极其复杂的，既有老基因型的危害（Ⅰ－Ⅵ），又有新基因型（Ⅶ）的流行，更有我国独特Ⅷ和Ⅸ基因潜伏。     

真核表达载体构建表达ＰＲＶ闽Ａ株gE基因表位抗原编码区片段的重组质粒

根据伪狂犬病病毒闽Ａ株gE基因表位抗原编码区的序列与身份种真核表达载体pPICZaA、pAcGP67A序列与特性分别设计了两对ＰＣＲ引物。通过ＰＣＲ方法扩增到了两端具有不同酶切位点的gE基因表位抗原编码片段。将这２个片段分别克隆到pPICZaA与pAcGP67A载体，转化大肠杆菌ＴＯＰ１０菌档及ＸＬ１－Ｂlue菌株，获得了含伪狂犬病病毒闽Ａ株gE基因表位抗原编码区的重组质粒pICZaA-FS与pAcGP67A-FS。序测定结果显示两个重组质粒中插入片段的大小与方向均正确。     

捻转血矛线虫(H.contortus)ZJ株H11蛋白基因的克隆及序列分析

参照已发表的捻转血矛线虫H11蛋白基因序列设计引物，以H．contortuss ZJ株的总RNA为模板，进行RT—PCR扩增，成功扩增出H11基因。将PCR产物与pUCm—T载体连接后，转化DH5α感受态细胞，筛选阳性克隆并测序。序列分析表明，其核苷酸序列与国外报道的H11基因的同源性为99．5％。编码氨基酸序列具有氨基肽酶的保守序列，推测可使虫体不能获得所必需的氨基酸而导致死亡。     

PCR扩增TK基因检测鸡传染性喉气管炎病毒的研究

根据已发表序列设计一对包含鸡传染性喉气管炎病毒（ILTV）TK基因全长核苷酸的1259bp引物，对2株ILTV强毒和1株ILTV疫苗毒进行PCR扩增，均能扩增出预期大小的目的片段，酶切分析证实了目的片段的特异性，而其它禽病原体的扩增均为阴性。PCR检测ILTV DNA的最小检测量为75pg。此方法检测人工接种鸡的气管棉拭样品，均能检测到ILTV，因此可用于临诊样品鸡传染性喉气管炎病的检测和诊断。     

Cloning of plasma membrane H-ATPase gene in Populus euphratica Oliv.

For this paper, the plasma membrane (PM) H -ATPase gene has been cloned from Populus euphratica Oliv. through a homology based strategy. The isolated 3,210 bp cDNA contains a single 2,862 bp open reading frame (ORF) which encodes a putative H -ATPase protein of 953 amino acid residues, with a significant homology to plasma membrane H -ATPase of Primus persica, Phaseolus vulgaris, Sesbania rostrata and Daucus carota. The predicted protein has a molecular weight of 104,553 Da. The copy number analysis revealed multiple copies of the PM H -ATPase in the P. euphratica genome after digestion of their genomic DNA by the restriction enzymes EcoRI, NdeⅠ, FbaⅠand BglⅡ, and Southern blot.     

通过农杆菌介导法将口蹄疫结构蛋白全长基因P1导入大豆的研究

本研究以大豆体细胞胚为受体。用农杆菌介导法将口蹄疫病毒结构蛋白全长基因P1导入大豆基因组中．获得了抗性植株。经GUS染色、PCR及PCR-southern杂交等分子检测。证明目的基因已导入并整合到大豆基因组中。为利用大豆作为生物反应器生产口蹄疫新型口服疫苗奠定了基础。     

中国野生种毛葡萄光合特性的研究

毛葡萄（ＶｉｔｉｓｑｕｉｎｑｕａｎｇｕｌａｒｉｓＲｅｈｄ）的净光合速率日变化值明显高于山葡萄、宝石、白玉霓，且无栽培品种光合作用的“午休”现象。毛葡萄的净光合速率与其它野生种葡萄和栽培品种比较也表现出较高水平。在进行ＣＯ２饱和点和补偿点测定时，毛葡萄也较栽培品种白玉霓有较强的光合作用，因此，毛葡萄是葡萄高光合效率育种的优良野生种质资源。     

Influence of the Indoleacetic Acid-Lysine Synthetase Gene (iaaL) of Pseudomonas syringae subsp. savastanoi on Yield Attributes of Potatoes

The iaaL gene of Pseudomonas syringae subsp. savastanoi encodes an indoleacetic acid-lysine synthetase which conjugates free indoleacetic acid (IAA) with lysine. lAA-lys is biologically less active than free IAA. The iaaL coding region was expressed under the control of the cauliflower mosaic virus 35S promoter and transgenic potato plants were produced (Spena et al. 1991). 35S iaaL potato plants are characterized by increased internodal length and epinastic bending of older leaves. In three greenhouse experiments with plants grown in pots of different size and in two growth chamber experiments tuber number increased in iaaL transgenic plants compared to untransformed and vector-transformed controls of the same genotype. The increase in tuber numbers observed under controlled conditions was reflected in tuber yield which increased in the pot grown transgenics.     

强毒小肠结肠耶氏菌生物素标记基因探针的研究

在构建的小肠结肠耶氏菌毒性质粒DNA基因文库pYB1～8与pYP1～6的基础上,筛选出了pYB7和pYP6克隆株.用限制性内切酶Bam HI消化pYB7,Pst消化pYP6,可分离出3.8kb和6.4kb的插入性DNA片段.以这两个基因片段为目的基因,用生物素化dUTP和光敏生物素标记,获得了生物素标记的基因探针.该探针能检出10pg以上的强毒小肠结肠耶氏菌DNA,不与无毒小肠结肠耶氏菌及大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等18种对照菌反应,具有高度的特异性和敏感性.pYB7与pYP6探针对不同血清型及来源的小肠结肠耶氏菌检测,其结果与自凝性试验、依钙试验等结果相符;对小肠结肠耶氏菌强毒株与无毒株检定的准确率为100%.