Biochemical study of resistance to imidacloprid in B biotype Bemisia tabaci from Guatemala

Systemic uptake bioassays using excised cotton leaves confirmed resistance to imidacloprid in a Guatemalan population of the tobacco whitefly Bemisia tabaci Gennadius. Polyacrylamide gel electrophoresis of naphthyl esterases identified the insects as B-types. Upon collection from the field, resistance was determined to be 58-fold relative to a susceptible strain originating in the Imperial Valley of California. Resistance levels increased to 126-fold in this population during its continuous exposure to systemically treated cotton. In biochemical investigations, there was no detectable NADPH-dependent mixed function oxidase metabolism of 14C-imidacloprid at any time during the selection process. In contrast, microsomal preparations from housefly abdomens readily produced significant amounts of the mono-hydroxy and olefin derivatives of the parent compound. Detoxification of imidacloprid by housefly MFOs may account for reports of lower toxicity of the insecticide towards this insect compared with whiteflies, despite similar binding properties between imidacloprid and the nicotinic acetylcholine receptors in both species.     

Modifying Myxococcus xanthus protoporphyrinogen oxidase to plant codon usage and high level of oxyfluorfen resistance in transgenic rice

Protoporphyrinogen oxidase (Protox) of Myxococcus xanthus (Mx Protox) is a 49-kDa membrane protein that catalyzes conversion of protoporphyrinogen IX (Protogen IX) into protoporphyrin IX (Proto IX). Upon heterologous expression in transgenic rice plants, Mx Protox is dually targeted into plastids and mitochondria, increasing resistance against the herbicidal Protox inhibitor oxyfluorfen. Here, we describe the chemical synthesis of the Mx Protox gene by assembling several small synthetic DNA fragments derived by ligation-PCR. Codon usage in the resulting 1416-bp gene was modified to correspond to that of the Arabidopsis Protox gene, a change that resulted in a decrease in G+C content from 71 to 49%. The modified Mx Protox gene was used to generate transgenic rice plants via Agrobacterium-mediated transformation. Integration, expression, and inheritance of the transgenes were demonstrated by Southern, Northern, and Western blot analyses. In plants transformed with the modified, low G+C-content Mx Protox gene, levels of Protox expression and enzyme activity were low compared to the levels observed for plants transformed with the native Mx Protox gene. Nonetheless, like the native gene, the modified gene conferred a high level of resistance to the herbicide oxyfluorfen in a seedling growth test.     

不同装液量对金顶侧耳液体摇瓶培养的影响

以食用菌金顶侧耳为试验研究对象;用综合PDA(马铃薯20 g,葡萄糖20 g,硫酸镁1.5g,磷酸二氢钾3.0g,水1 000 mL,pH自然)为液体培养基;以(25±1)℃,180 r/min为气浴恒温振荡器的温度和振荡速率.设定了60、80、100、120、140 mL 5个不同的装液量.经过7 d的摇瓶培养,过滤发酵液,得到菌丝体和粗酶液.再通过测定菌丝体烘干后的生物量,以及测定粗酶液中多酚氧化酶和漆酶活性,得出了:装液量为100 mL,菌丝体烘干生物量明显大于其他装液量;装液量为140 mL,有利于多酚氧化酶的分泌,酶的活力较强,并且其活力随装液量的递增而变强.装液量为100mL,有利于漆酶的分泌,酶的活力较强,不同装液量的菌丝生长都在第6天出现了高峰期,其中以装液量为100mL/250mL时,其菌丝球数量较多.     

花生多胺氧化酶的组织化学定位及显微拍摄

报告了花生幼苗（苗龄为６ｄ）中多胺氧化酶的组织化学定位，并就该酶定位研究中的摄影问题提出了几点看法     

为害小麦新害虫——显脉污灯蛾Spilarctia bisecta Leech (Lepidoptera: Arctiidae)

小麦是我国三大粮食作物之一, 其在生产过程中受到多种害虫为害;在调查重庆市潼南区小麦病虫害过程中新发现一种鳞翅目害虫为害小麦, 对其进行形态学及细胞色素氧化酶Ⅰ亚基(cytochrome oxidase Ⅰ, COⅠ)基因序列鉴定, 确定其为显脉污灯蛾Spilarctia bisecta Leech。污灯蛾属中有多种为害农作物的害虫, 但显脉污灯蛾在中国还未有为害小麦的确切报道, 这一发现提醒我们应当注意小麦和其他禾本科作物上的潜在害虫。     

饮用天然高钼水诱发的钼中毒耕牛主要生物酶测定

本研究对高钼饮水诱导钼中毒的耕牛及对照牛的血浆及组织（肝脏、肺脏、肾脏、脾脏、心脏、肌肉）中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、黄嘌呤氧化酶（ＸＯＤ）及谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）等３种生物酶活性进行了对比分析测定。结果表明，血浆和组织中ＳＯＤ、ＸＯＤ及ＧＳＨ－ＰＸ均随着钼中毒的加重其活性显著下降。这３种生物酶是钼中毒比较灵敏且相关较大的生化指标，对钼中毒具有一定诊断价值；测定ＳＯＤ。ＸＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ可作为钼中毒监测的重要手段。     

喀斯特地区泡核桃林土壤酶、微生物量及无机氮的动态研究

【目的】泡核桃林的土壤质地是决定核桃产量的重要因素。开展喀斯特地区泡核桃林土壤肥力状况及微生物群体功能年际变化的研究，不仅有助于指导泡核桃科学高效地生产，而且能为该地区的石漠化治理、土地修复实践提供理论基础。【方法】对喀斯特地区不同种植年限（4、5、6、7 年）泡核桃林土壤酶活性、微生物生物量（碳、氮）及无机氮（硝态氮、铵态氮）的变化及其相关性进行测定和分析。【结果】（1）泡核桃种植 5、6 年后，土壤酶活性普遍高于种植 4、7 年。（2）随着种植年限的增加，微生物量碳呈先增后降的趋势，而微生物量氮逐渐增加，且种植 5、6、7 年后差异不显著；泡核桃种植 4 年后的微生物量碳氮含量均极显著低于其他年限。（3）随着种植年限的增加，铵态氮含量呈波动式变化，硝态氮先增后减，且种植 6 年后的硝态氮含量极显著高于其他年限处理。（4）酶活性、微生物量和无机氮含量均随着土层深度（0~10、10~20、20~30 cm）的增加而降低，显示出明显的“表聚现象”。（5）酶活性、微生物量和无机氮含量三者之间具有不同程度的相关性。【结论】总体来看，泡核桃林的建立有利于喀斯特地区的土壤发育。在泡核桃种植 7 年后，应注重水肥管理以提升泡核桃果实的质量，同时为该区的生态恢复提供基础条件。     

STS标记在扬麦158×淮麦18F_4群体中的应用及其与PPO活性的关系

小麦籽粒中的多酚氧化酶活性是导致酶促褐变的主要因素.选育低多酚氧化酶活性的品种是改良面制食品外观品质的重要途径之一.本研究利用位于小麦2A和2D染色体上PPO基因分子标记PPO18和STS01,对扬麦158×淮麦18组合的300个F4代分离株系进行PCR扩增,说明不同带型与PPO活性的相关性.结果表明用PP018扩增的300个分离株系中有59个扩增出876 bp(2aaa型)的目标片段,其活性均值为82.01;46个同时扩增出685 bp和876 bp的目标片段(2Aab型)其活性均值为163.41;其余195个扩增出685 bp的目标片段(2Abb型)其活性均值为233.73.方差分析表明三者的PPO活性差异达到极显著水平,其中基因型为2Aaa型的PPO活性值明显低于2Abb型;PPO18在本试验群体中对PPO活性的决定系数为66.61%;用STS01扩增的300个株系中都扩增出了560bp的片段,群体间没有差异.文中说明了两对引物在该群体中的效应及其与PPO活性的关系.     

光核桃AmSO基因初克隆及生物信息学分析

为了初步探索光核桃（Amygdalus mira）亚硫酸盐氧化酶（Sulfite oxidase，SO）的蛋白结构与功能，以1 a生光核桃叶片cDNA为模板，采用分子克隆技术获得光核桃AmSO基因全长为1 182 bp的开放阅读框（ORF），共编码393个氨基酸，相对分子质量是43.45 ku。生物信息学分析结果显示，AmSO蛋白是一种能在细胞核内发挥生物学作用的稳定碱性亲水蛋白，二级结构由无规则卷曲、α-螺旋和延伸链构成。蛋白结构域的预测及氨基酸序列同源性比对发现，编码氨基酸序列的N端具有氧化钼结构域，常存在于氧化还原酶中，可以与钼辅因子结合；在C端具有钼钴（Mo-co）二聚体结构域，该结构域参与二聚体的结合，并且能够参与硫、氮和碳循环中的氧化还原反应，二者在进化过程中高度保守。系统进化树分析表明AmSO与碧桃PpSO亲缘性最近，进化相对保守。对光核桃AmSO蛋白进行生物信息学预测，有助于进一步系统研究光核桃 AmSO基因在生物学上的功能，为进一步了解其对非生物胁迫的响应机制奠定基础。