12种药物对罗非鱼无乳链球菌的抑菌试验

无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)普遍存在于养殖水体中,可产生外毒素,对动物具有致死性,由无乳链球菌和海豚链球菌(Streptococcus inia)引起的罗非鱼链球菌病被认为是对罗非鱼危害最严重的细菌性疾病,而且链球菌还可随伤口感染人类.近几年来,因罗非鱼链球菌病的暴发流行,给罗非鱼养殖业造成极大的危害,甚至威胁到罗非鱼养殖产业的稳定发展.2011年5月～10月,广西多地暴发罗非鱼链球菌病,危害各种规格的养殖罗非鱼,共造成7127吨鱼死亡,经济损失8610.8万元,已严重制约了广西罗非鱼养殖业的健康发展.研究结果表明,近两年广西养殖罗非鱼链球菌病的病原菌为无乳链球菌,且大多表现为多重耐药菌株.而生产实际中,药物防治仍是目前养殖户针对罗非鱼链球菌病普遍采用的主要控制措施.本试验选取12种常用国标渔药,研究其对无乳链球菌的抑菌作用,旨在为罗非鱼无乳链球菌病的药物防治提供参考.     

高锰酸钾共振瑞利散射法测定磺胺二甲嘧啶

在0.2 mol/L H_2SO_4介质中,磺胺二甲嘧啶(SM_2)和KMnO_4在加热条件下发生氧化还原反应生成MnO_2微粒,导致共振瑞利散射(RRS)增强,并产生新的散射峰.其最大散射波长位于595 nm附近,散射强度在一定范围内与SM_2的浓度成正比,据此建立了测定SM_2的共振瑞利散射(RRS)新方法.本方法具有较高的灵敏度,检出限为8.6 ng/mL.实验优化了测定条件.考察了共存物质的影响,表明方法具有良好的选择性,用于片剂中SM_2的测定,结果满意.

Abstract：

In 0.20 mol/L H_2SO_4 medium, a redox reaction took place between sulfadimidine (SM_2) and po-tassium permanganate to form MnO_2 particles by heating.As a result, new spectra of resonance rayleigh scattering appeared and their intensities were enhanced greatly.The maximum peak of RRS was located at approximately 595 nm, and the scattering intensities were proportional to the concentration of SM_2.Based on these results, a new method for the determination of SM_2 was established.The detection limit (3σ) was 8.6 ng/mL.The effects of coexistent substances were tested, and the results demonstrated that this meth-od had good selectivity.It has been applied to the determination of SM_2 in tablets with satisfactory results.     

磺胺二甲嘧啶在黑鲪体内的药物代谢动力学和残留消除研究

在(14±1)℃水温条件下,对黑鲪单次口灌100 mg/kg体重的磺胺二甲嘧啶,进行药物代谢动力学研究。在(20±2)℃水温条件下,按照《中华人民共和国水产行业标准磺胺类药物水产养殖使用规范》推荐剂量对黑鮶连续5天口灌给予磺胺二甲嘧啶,研究其在黑鮶体内的残留消除规律。血浆、肌肉和肝脏样品采用高效液相色谱检测,DAS2.0药物代谢动力学软件对数据进行处理分析。结果表明磺胺二甲嘧啶在黑鲪血浆、肌肉和肝脏中均符合一室模型,肝脏、血液和肌肉中药物达峰时间分别为6 h,8 h和10 h;峰值浓度分别为26.45μg/g、25.57μg/g和31.15μg/g;连续多次给药后,黑鮶血液、肌肉、肝脏中药物浓度分别在给药后12d、14d、15d后小于最大残留限量要求(0.1mg/kg)。     

磺胺二甲嘧啶免疫抗原的合成研究

试验旨在研究磺胺二甲嘧啶（SM2）免疫抗原的合成。用重氮化方法将SM2分别与牛血清蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）偶联,合成了免疫抗原SM2-BSA和包被抗原SM2-OVA。紫外扫描和聚丙烯胺凝胶电泳结果表明, SM2-BSA的紫外吸收光谱与BSA、SM2相比均发生了改变,证明偶联成功,并测得SM2-BSA的结合比为13∶1;用SM2-BSA免疫BALB/c小鼠,获得了高效价和特异的多克隆抗体。结果表明,半抗原SM2和载体蛋白偶联成功,并可获得高价、敏感的多克隆抗体。     

磺胺二甲嘧啶快速直接竞争ELISA试剂盒的研制及应用

在多克隆抗体的基础上研制一种用于检测动物源性食品中磺胺二甲嘧啶(SMZ)残留量的直接竞争酶联免疫吸附测定法(ELISA)试剂盒,并与高效液相色谱(HPLC)分析方法比较和验证.将磺胺二甲嘧啶添加到猪肝、猪肉和鸡肉样品中,用所制备的试剂盒和HPLC分析方法检测样品中的磺胺二甲嘧啶残留,并对试剂盒的灵敏度、特异性、精密度、准确度和有效期进行测定.研究结果表明,磺胺二甲嘧啶浓度在0.5～50 ng·mL-1,方法的检测灵敏度IC10 =0.47 ng·mL-1,板内平均变异系数为7.4％,板间平均变异系数为9.27％.猪肝、猪肉与鸡肉组织样品中SMZ最低检测限分别为3.91、4.81与1.59 μg·kg1.在添加10.0～50.0 μg·kg-1时,平均回收率在85％～110％.试剂盒的检测时间为12.6 min,在4℃至少可以保存6个月.研制的试剂盒可以满足猪肝、猪肉和鸡肉中磺胺二甲嘧啶残留的现场快速检测.     

稻田土壤CH4排放及其关联微生物功能基因丰度对磺胺二甲嘧啶和铜污染的响应

为了研究畜禽粪便中磺胺类兽用抗生素磺胺二甲嘧啶(Sulfamethazine,SMZ)和典型重金属铜(Copper,Cu)复合污染对稻田土壤CH_4排放及其微生物相关功能基因丰度的影响,以猪粪为肥源,设置无污染、低、中、高4种SMZ和Cu不同污染水平的浓度,SMZ分别为0、0.1、1、5 mg·kg~(-1),Cu分别为0、100、500、1 500 mg·kg~(-1),两两组合共计16个处理,通过长时间室内模拟淹水培养实验,定期测定CH_4排放速率和相关土壤功能基因丰度,以期探索SMZ和Cu单一及复合污染影响CH_4排放和相关功能基因丰度的浓度效应及影响时长。结果表明:培养前期(0～12 d),不同浓度的SMZ和Cu未显著影响CH_4排放速率(P0.05);培养中后期(13～71 d),单一低浓度SMZ(0.1 mg·kg~(-1))处理对CH_4排放具有促进作用,高浓度SMZ(≥1 mg·kg~(-1))则反之,单一Cu污染及与不同浓度的SMZ复合污染处理均显著降低了CH_4排放速率(P0.05)。与对照(SMZ和Cu零添加)相比,除单一低浓度SMZ(0.1 mg·kg~(-1))处理的CH_4累积排放量增加了19.7%外,其他处理均显著降低了CH_4排放,尤其Cu和SMZ(≥1 mg·kg~(-1))复合污染处理显著降低了约77%(P0.05)。SMZ单一污染对16S rRNA-CH_4、mcr A和pmo A的基因丰度均有明显的浓度效应和输入时间效应,Cu单一污染则未有明显的浓度和时间效应,两者复合污染的联合作用比较复杂,主要取决于两污染物的起始浓度及SMZ输入土壤的时间。无论SMZ和Cu单一还是复合污染,中高浓度在培养的后期对三大基因丰度的影响均以降低为主,且pmo A基因丰度对Cu和SMZ单一及复合污染响应更敏感。研究表明,SMZ和Cu在一定程度上会降低稻田土壤CH_4排放及相关微生物基因丰度,有利于温室气体减排,但规模化养殖业畜禽粪便还田后导致抗生素和重金属高残留的环境风险仍不可忽视。     

抗磺胺二甲嘧啶单链抗体基因的克隆与序列分析

采用RT-PCR方法成功克隆出抗磺胺二甲嘧啶（SM2）单抗的杂交瘤细胞中396 bp的VH和339 bp的VL可变区基因,再通过重叠延伸PCR方法,由引入的（Gly4Ser）3柔性肽体外组装抗717bp的SM2-ScFv基因。测序经NCBI Blast比较分析和Expasy预测分析。结果表明：所得ScFv具有重组功能性鼠抗体可变区基因的特征,单链抗体的结构符合抗体可变区的功能区的框架区和可变区的结构特点,是抗磺胺二甲嘧啶的可变区基因,且经lingker连接后为影响轻重链的结构。     

三种抗生素与铜复合污染对土壤过氧化氢酶活性的影响

为分析抗生素与重金属单一及复合污染对土壤过氧化氢酶活性的影响，以三种兽用抗生素恩诺沙星（Enrofloxacin，ENR）、土霉素（Oxytetracycline，OTC）、磺胺二甲嘧啶（Sulfamethazine，SM2）和重金属铜（Cu）为目标污染物，采用高锰酸钾滴定法，研究其对土壤中过氧化氢酶活性的影响。结果表明，单一污染下，中低浓度的ENR各处理对酶活性有一定激活作用，最大激活率为5.52%；OTC处理组随着污染物浓度的增加，对酶活性的抑制作用增大，抑制率最大为8.36%；SM2处理初期，中低浓度处理组对酶有激活作用，最大激活率为7.46%，处理21 d，高浓度处理组对酶活性有显著促进作用，激活率为1.71%。Cu在第28 d时对过氧化氢酶活性表现为抑制。复合污染下，ENR与Cu复合污染组对过氧化氢酶活性的影响随污染浓度增加先抑制后激活；OTC与Cu处理第7 d，各浓度组与对照差异均不显著，14 d后，高浓度组产生抑制作用，抑制率最高为3.58%；SM2与Cu高浓度处理组在第7 d对土壤过氧化氢酶活性表现为明显激活作用，激活率高达10.00%，14 d后转为抑制作用，28 d时抑制率最高为4.49%。研究表明，单一污染下，抗生素对土壤过氧化氢酶的影响与其类型、暴露浓度以及暴露时间有关。复合污染下，抗生素和Cu的交互作用存在差异，表现为拮抗和协同两种作用，不仅与抗生素种类、复合污染浓度比例、暴露时间有关，还与抗生素和Cu配位反应产生复合物的比例有关。     

一例兔魏氏梭菌病的诊治

<正>1发病情况河北省武安市范某饲养的460只獭兔,突然发病,发病日龄为45～105日龄,并出现死亡,每天死亡10只左右,3天共死亡28只,发病后用氯霉素、土霉素、磺胺二甲嘧啶、抗生素肌肉注射,同时灌服庆大霉素,患兔病情不但没有好转,接下来几天又发现大量病兔,死亡率极高,遂来笔者处就诊。