香猪睾丸间质细胞TAS1R3基因干扰后对自噬相关因子的影响

旨在探究TAS1R3基因通过mTOR对从江香猪自噬相关基因表达的影响。本试验选择30日龄健康雄性从江香猪3头，采集睾丸组织并培养出睾丸间质细胞。将构建成功的干扰载体和空载体转染至细胞中，利用qRT-PCR检测其对TAS1R3基因表达影响，运用qRT-PCR和Western blot检测TAS1R3基因干扰后对味觉受体第一家族一号受体(TAS1R1)、细胞外信号调节激酶1(ERK1)、细胞外信号调节激酶2(ERK2)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、BECN1和微管相关蛋白1轻链3β(MAP1LC3B)表达的影响。结果表明，当TAS1R3基因被干扰后，相较于shRNA-NC对照组，TAS1R1、ERK1、ERK2、mTOR基因mRNA表达量均极显著降低(P<0.01),自噬因子BECN1和MAP1LC3B表达量极显著升高(P<0.01)。Western blot结果表明当TAS1R3基因被干扰后，与shRNA-NC对照组相比，蛋白T1R3、T1R1、p-mTOR、p-S6K1、p-ERK12均极显著降低(P<0.01),而自噬蛋白Beclin 1表达量极显著升高(P<...     

白藜芦醇对哺乳动物雄性生殖系统有益作用的研究进展

白藜芦醇（RSV）是一种非黄酮类多酚有机化合物，分为反式与顺式两种，因具有抗氧化、抗炎、降脂、延缓衰老、抗肿瘤和保护心血管系统等优良的生物学活性，在多个领域有着广泛的应用。为发掘白藜芦醇作为新型功能性饲料添加剂、功能性保健品和药品开发应用提供依据，本文在分析形成雄性生殖系统障碍原因的基础上，从反式白藜芦醇对睾丸损伤的保护、生殖相关激素水平的影响、精子发生作用的影响及对精子活力的保护等方面归纳总结其在哺乳动物雄性生殖中的应用进展。 [关键词] 白藜芦醇|雄性生殖障碍|精子发生|睾丸损伤|精子冷冻     

OPN5-TSH-DIO2/DIO3和VIP-PRL在短光照抑制公山麻鸭睾丸活性中的表达规律

旨在探究短光照抑制公山麻鸭繁殖机能的过程中，OPN5-TSH-DIO2/DIO3通路和VIP-PRL通路主要相关因子表达规律及可能存在的相互关系。本试验选取80只正常繁殖期(220日龄)、体重相近且健康的山麻鸭公鸭作为研究对象，试验前15 d维持正常繁殖期的长光照(18L∶6D),从d16开始每天缩短光照2 h,到每天光照时间为8 h(8L∶16D)后持续至试验结束(d45);于d15、d21、d30、d45采集血液样本和下丘脑、垂体、睾丸等组织样，通过HE染色、ELISA、qRT-PCR、Western blot技术检测睾丸发育情况及下丘脑、垂体、睾丸中相关基因和蛋白表达水平。结果显示，与长光照条件相比，短光照导致公鸭睾丸萎缩，生精细胞和精子数量显著减少(P<0.05);血液LH、PRL、睾酮水平均显著降低(P<0.05);下丘脑GnRH表达下降，GnIH表达上升，但差异均不显著(P>0.05);垂体GnIHR呈上升趋势，FSH呈下降趋势，但均无显著差异(P>0.05),GnRHR试验后期明显上升(P<0.05),LH无明显变化趋势；睾丸中FSHR、LH...     

101例犬睾丸肿瘤病例的回顾性分析

调查犬睾丸肿瘤的发病及治疗情况，探讨原发肿瘤及骨髓抑制对疾病预后的影响。从中国农业大学动物医院2020年5月至2022年7月接诊的病例中筛选出101例符合要求的睾丸肿瘤病例，记录患犬的基本信息、实验室检查结果、诊断信息及治疗和预后情况进行统计学分析。结果显示，常见的睾丸肿瘤有间质细胞瘤(51.7%)、精原细胞瘤(27.3%)、支持细胞瘤(17.5%)。腹内隐睾常见的肿瘤类型为支持细胞瘤(76.9%),睾丸肿瘤的主要发病品种为贵宾犬(22.8%)、金毛寻回猎犬(19.8%)、杂种犬(8.9%)。睾丸肿瘤平均发病年龄为10.9岁，不同类型肿瘤发病年龄无显著差异(P>0.05)。并发全血细胞减少症的患犬预后差，存活期均未超过30 d。犬睾丸肿瘤患病动物的半年以上、1年以上和2年以上存活率分别为88.4%、73.8%和44.4%,死亡病例当中大部分(61.5%)死因与睾丸肿瘤无关。     

玉米赤霉烯酮对湖羊睾丸间质细胞毒性及m6A甲基化修饰相关基因表达的影响

[目的]本文旨在探究玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEA)对湖羊睾丸间质细胞(leydig cells, LC)的毒性作用。[方法]用200μmol·L^-1 ZEA处理湖羊LC 8 h,通过EdU法检测细胞增殖情况，RT-qPCR和Western blot分别检测与细胞增殖和凋亡、氧化应激、m⁶A甲基化修饰相关基因和蛋白的表达变化。[结果]与对照组相比，ZEA处理组LC活性和增殖数量极显著下降(P<0.01);细胞增殖相关基因pcna及其蛋白表达水平均极显著下降(P<0.01);促凋亡基因表达水平(bax、caspase3,P<0.01;tp53、caspase9,P<0.05)均显著升高，相对应蛋白表达水平(TP53、CASPASE9,P<0.01)极显著升高；抗凋亡基因bcl-2及蛋白表达水平显著降低(P<0.05);氧化应激相关基因相对表达水平(cat,P<0.05;gsh-px、sod2,P<0.01)显著或极显著上升，其相关蛋白表达水平(SOD2,P<0.01)极显著上...     

神经介素B及其受体在不同发育阶段山羊睾丸组织中的差异表达

[目的]本试验旨在探究神经介素B(NMB)及其受体NMBR[还包括胃泌素释放肽受体(GRPR)和蛙皮素受体(BRS3)]在山羊不同发育阶段睾丸组织中的差异表达，为解析哺乳动物睾丸发育及功能调节机制提供参考。[方法]选取系谱清晰和体况良好的雄性山羊12只(3月龄和9月龄，各6只)进行阉割并采集睾丸组织，在克隆NMB及其受体基因与分析序列的基础上，采用免疫组化技术检测NMB及其受体在睾丸组织中的表达定位，利用RT-qPCR和Western blot检测NMB及其受体在不同发育阶段山羊睾丸组织中的表达变化。[结果]NMB及其受体基因与绵羊和牛的进化关系最近，NMB及其受体基因编码区的核苷酸序列与牛和绵羊的同源性达96%以上，结构分析发现NMBR、GRPR和BRS3均属于7次跨膜受体。NMB及其受体在3月龄和9月龄山羊睾丸组织中广泛表达，其中在间质细胞、肌样细胞和精子细胞中呈高表达。与3月龄山羊相比，9月龄山羊睾丸组织中NMB与GRPR的mRNA和蛋白表达量显著降低(P<0.05),而NMBR与BRS3的mRNA和蛋白表达量显著增加(P<0.05)。[结论]NMB及其受体可能参与山...     

MMP15、PICK1基因在山羊睾丸中的表达研究

MMP15、PICK1基因均是哺乳动物性腺组织中影响性腺生理功能正常发挥的重要影响因子，但它们在黔北麻羊睾丸组织中的表达规律尚不明晰。为研究黔北麻羊不同月龄的睾丸中MMP15、PICK1基因的表达情况，本试验以黔北麻羊为研究对象，通过qRT-PCR技术分别检测MMP15与PICK1基因在1、3、6、9、12月龄的黔北麻羊睾丸中的表达水平并建立基因表达的标准曲线。结果显示：MMP15、PICK1基因在黔北麻羊不同月龄睾丸组织中均有表达；MMP15基因在黔北麻羊不同月龄睾丸中的表达量从高到低排列为：12月龄>1月龄>9月龄>3月龄>6月龄；12月龄与1月龄的表达差异不显著(P>0.05),二者表达量均极显著高于3月龄、6月龄、9月龄(P<0.01);9月龄表达显著高于3月龄(P<0.05),极显著高于6月龄(P<0.01);3月龄表达极显著高于6月龄(P<0.01)。PICK1基因在黔北麻羊不同月龄睾丸中的表达量从高到低排列分别是：3月龄>6月龄>12月龄>9月龄>1月龄；3、6月龄其表达量极显著高于9、12月龄...     

兰州大尾羊肾和睾丸组织细胞的分离培养和鉴定

兰州大尾羊是中国濒临灭绝的物种，通过体细胞培养和长期保存，在细胞水平上保存珍贵的种质资源。采用胰蛋白酶消化分离并培养原代肾细胞和睾丸细胞，并通过差速消化和差速贴壁法纯化成纤维细胞并用液氮保存，细胞复苏后进行活力、形态、生长特性、微生物污染和染色体等检查，保存兰州大尾羊26个个体的肾细胞和9个个体睾丸细胞，保存细胞生长良好，均呈成纤维型，平均复苏活力为98.6%和95.2%，生长曲线均呈“S”型，最大增殖密度分别为3.15×10⁵ mL^-1 和2.92×10⁵ mL^-1，倍增时间分别为29.3 h和30.8 h，细菌、真菌、病毒和支原体检查均为阴性，染色体为2n=54，二倍体占88%和90%，说明成功分离培养并保存兰州大尾羊肾和睾丸组织细胞。     

消暑促精散对高温环境中雄性小鼠生殖系统的影响

为了研究“消暑促精散”对高温环境中雄性小鼠生殖系统的影响，试验将45只8周龄雄性小鼠随机分为对照组、高温组和治疗组，每组15只，对照组饲养于室温环境中；高温组及治疗组饲养于33℃恒温培养箱中，在小鼠耐受的情况下每5 d增加1℃,从33℃开始一直增加至38℃;治疗组每天饲喂含2%消暑促精散的鼠粮，其余两组饲喂基础日粮，每日观察小鼠的采食和死亡情况。从正式试验开始每5 d为一个阶段，在每个阶段的最后1 d晚上将10只发情雌鼠放入雄鼠笼中2 h,记录雄鼠爬跨情况，试验期为30 d,第31天剖杀，检测血清睾酮含量，取睾丸、附睾制备切片，进行H.E.染色并观察组织结构。结果表明：随着温度升高，治疗组死亡数低于高温组；出现爬跨行为的小鼠数量高于高温组，高温组和治疗组雄性小鼠外周血清中睾酮含量极显著低于对照组(P<0.01)。高温组和治疗组小鼠体重极显著低于对照组(P<0.01)。各组间睾丸指数差异显著(P<0.05),高温组和治疗组的双侧附睾重显著低于对照组(P<0.05)。与对照组相比，高温组睾丸组织中部分曲细精管管腔较大，管腔中精子数量少且呈无序排列，各级精母细胞排列疏...