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研究了不同浓度1α,25-二羟维生素D3(0,10-9,10-8,10-7mol/L)对体外培养SD大鼠成骨细胞(Osteoblast,OB)超微形态结构的影响。结果表明:与对照组比较,10-9mol/L组细胞铺展较好,表面突起、线粒体数量增多;10-8mol/L组细胞趋于扁平,表面突起减少且呈现细长状,内质网数量增多,线粒体减少;10-7mol/L组细胞外基质中大量丝状纤维连接成网状,胞内细胞器较少,出现大量分泌小泡,胞浆内含有大量钙颗粒沉积。说明,高浓度1α,25-二羟维生素D3能够抑制OB增殖,促进细胞的分化及功能表达。 相似文献
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以MC3T3-E1细胞系为材料,体外转染pEFNeu-HA-CHIP质粒,Western blot检测热休克蛋白Hs70(HSP70)C端相互作用蛋白(CHIP)表达,建立了稳定过量表达CHIP蛋白的MC3T3-E1/HA-CHIP细胞系.然后用含10 mol/L甘油磷酸钠和50靏/mL抗坏血酸的条件培养基诱导MC3T3-E1和MC3T3-E1/HA-CHIP细胞系向成骨细胞定向分化,结果表明,诱导期MC3T3-E1/HA-CHIP细胞系中碱性磷酸酶(ALP)的活性比MC3T3-E1细胞中的ALP活性低,ALP染色实验同时证实了这个结果;诱导培养18d后,Von Kossa染色和茜素红染色结果表明,MC3T3-E1/HA-CHIP细胞系中生成的磷酸钙比MC3T3-E1细胞系中生成的磷酸钙少.结果提示,过量表达CHIP蛋白抑制MC3T3-E1细胞的分化和矿化. 相似文献
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《中国兽医学报》2020,(2)
脂联素受体激动剂(AdipoRon)是人工合成的与脂联素(ADPN)有相似作用的口服活性小分子,研究显示ADPN可调节成骨细胞生长和分化,但AdipoRon是否具有类似的功能目前鲜见报道。本试验主要研究AdipoRon对鸡成骨细胞的影响。从14日龄鸡胚额骨中分离获得成骨细胞,细胞培养第4日,分别添加100,200 mg/L AdipoRon处理成骨细胞,处理72 h后,MTT法检测细胞增殖活性,并进行碱性磷酸酶(ALP)染色。Real-time PCR检测脂联素受体1(AdipoR1)、脂联素受体2(AdipoR2)、成骨细胞成熟标志基因骨钙素(osteocalcin,OC)、Ⅰ型胶原α2链(alpa2 of type I collegen,COL1A2)、细胞凋亡相关基因Caspase-3、Bcl-2及Bax的基因表达量,计算Bcl-2与Bax基因表达量的比值。结果显示,100,200 mg/L AdipoRon处理后的成骨细胞正常形态消失,细胞数量减少,体积变小,细胞核明显固缩,细胞存活率极显著降低(P<0.01)。AdipoRon可增加成骨细胞中AdipoR1、AdipoR2、OC、Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达量(P<0.05),并呈剂量依赖性,但对COL1A2和Bcl-2/Bax的表达无显著性影响。结果表明,100,200 mg/L AdipoRon均可促进鸡成骨细胞AdipoR1/2的表达,且能抑制成骨细胞的增殖,促进成骨细胞的成熟及凋亡。 相似文献
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取蒙古马背臀部皮下脂肪组织,通过Ⅰ型胶原酶消化、离心等步骤分离培养脂肪组织来源的间充质干细胞(Adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,ADSCs),经过原代培养和传代培养,分别加入成脂诱导剂和成骨诱导剂培养,采用倒置显微镜观察诱导后的细胞形态变化,并通过油红O染色和茜... 相似文献
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目的:探讨氟对体外培养成骨细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax基因表达的影响。方法:采用酶完全消化法分离2~3月龄胎羊颅盖骨成骨细胞,加入不同浓度(0~10-3mol/L)NaF,作用24h后,提取细胞总RNA并反转录成cDNA,通过实时荧光定量PCR方法,检测成骨细胞Bcl-2和Bax基因表达的变化。结果:1.0×10-5mol/LNaF组Bcl-2基因表达水平较对照组高,其他组Bcl-2表达水平均比对照组低;各NaF浓度组Bax基因表达量均比对照组高,且5.0×10-4mol/L组最高;除1.0×10-5mol/LNaF组外,Bcl-2/Bax比值均比对照组低,且5.0×10-4mol/L组最低。结论:高浓度NaF可能增加成骨细胞线粒体膜的通透性,下调Bcl-2 mRNA表达,上调Bax mRNA的表达,可能启动了线粒体凋亡信号转导途径。 相似文献
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体外培养奶牛成骨细胞,用10-12,10-11,10-10,10-9和10-8mol/L成骨生长肽干预5 d后,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖,紫外分光光度法检测细胞上清液中碱性磷酸酶(ALP)。结果显示:10-12~10-8mol/L的成骨生长肽均能促进成骨细胞的增殖,并且呈现剂量依赖方式,10-12mol/L试验组即可促进成骨细胞增殖,与对照组比较差异不显著(P>0.05),10-11~10-8mol/L试验组与对照组比较均有极显著差异(P<0.01),以10-10mol/L试验组差异最为显著;成骨生长肽对细胞上清液中ALP活性起抑制作用,其中在10-10mol/L时抑制作用最为显著(P<0.01)。结果表明成骨生长肽对体外培养奶牛成骨细胞增殖作用明显,对碱性磷酸酶起轻微抑制作用而且呈双向性。 相似文献
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由于外伤、感染、肿瘤切除或先天性疾病等原因造成的骨质缺失,形成较大的间隙,称为骨缺损,是临床常见的病症,其中尤以大段骨缺损的修复治疗较为困难。目前修复大段骨缺损的方法很多如自体骨移植、异体骨移植、人工骨移植、组织工程骨、引导性骨再生、转基因工程[1]等。现就目前常用的修复方法及研究现状综述如下。 相似文献
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在体外培养4日龄SD大鼠成骨细胞(OB)的基础上,添加不同浓度钙(0、1、2、4mmol/L),钙作用2d后,观察细胞活性、间隙连接通讯(GJIC),测定钙离子([Ca2+]i)浓度;钙作用2、5、8d测定OB内总蛋白及Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)含量。与对照组比较,钙作用2d后,OB内线粒体增多,内质网扩张,细胞内[Ca2+]i浓度增加,GJIC的荧光扩散距离缩小。总蛋白含量,在2d,钙1、4mmol/L组高于(P〈0.05或P〈0.01)对照组,在5、8d低于对照组,但仅在8d差异显著(P〈0.05或P〈0.01)。第2天后,钙抑制Col-Ⅰ分泌(P〈0.01),在5、8d均促进(P〈0.05或P〈0.01)其分泌。结果表明,添加钙作用2d后,促进OB代谢及[Ca2+]i沉积,抑制细胞间通讯,促进总蛋白分泌,抑制Col-Ⅰ分泌,促进了细胞增殖。增殖期过后,则抑制总蛋白分泌,促进Col-Ⅰ分泌,使OB较早的进入基质成熟期,利于骨骼的重建。 相似文献