猪流行性腹泻病毒S2基因B细胞表位的筛选及其单克隆抗体的制备与鉴定

目的 应用生物学软件与单克隆抗体技术相结合的方法鉴定PEDV S2基因B细胞表位肽。方法 利用CLC Sequence viewer 6.8软件及在线数据库IEDB筛选出PEDV S2基因B细胞表位,并人工合成表位肽。将表位肽与钥孔血蓝蛋白（KLH）耦联后作为抗原,免疫雌性BALB/c小鼠,通过ELISA法筛选出抗体效价较高的小鼠进行1次加强免疫,3 d后取脾脏制备脾细胞悬液进行细胞融合。经HAT选择培养基培养筛选有效杂交瘤细胞,采用ELISA法筛选阳性克隆继续进行扩大培养。将部分阳性杂交瘤细胞进行小鼠腹腔注射,并收集腹水。通过ELISA方法分别检测小鼠腹水和单克隆细胞株培养上清液抗体效价,确定最高效价作为后备细胞株。结果 筛选出B细胞表位肽序列为:MQYVYTPTYYML;免疫多肽抗原后融合前血清抗体效价达到1:2 000;BALB/c小鼠腹水及单克隆细胞株培养物上清液ELISA检测结果显示抗体效价达到1:4 000。结论 筛选出了PEDV S2基因B细胞表位,为PEDV表位肽疫苗载体构建研究提供参考。     

猪圆环病毒Ⅱ型体外诱导3D4/2细胞炎症模型的建立

【目的】通过对猪圆环病毒Ⅱ型（PCV2）体外感染3D4/2细胞浓度、时间与细胞炎症水平进行探讨,建立PCV2体外感染3D4/2细胞炎症反应模型,以期为后期药物调控PCV2诱发3D4/2细胞炎症反应的研究奠定基础。【方法】将3D4/2细胞分为对照组及10⁰、10^-1、10^-2和10^-3 PCV2感染组,每组3个重复。对照组用DMEM培养,各PCV2感染组用不同稀释倍数PCV2液培养,2 h后均更换为含5%胎牛血清（FBS）的DMEM维持液进行培养,培养4、8、12和24 h后分别收集细胞及细胞上清液。采用Griess法检测一氧化氮（NO）水平,DCFH-DA荧光探针法检测活性氧（ROS）水平,酶标法检测还原型谷胱甘肽（GSH）水平,分光光度法检测黄嘌呤氧化酶（XOD）和髓过氧化物酶（MPO）活性,ELISA法测定白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-10、γ干扰素（IFN-γ）、IL-8、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）以及环氧合酶1（COX-1）和COX-2的分泌水平。【结果】10⁰至10^-3 PCV2作用4、8、12和24 h均能够成功感染3D4/2细胞。与对照组相比,10⁰ PCV2在感染3D4/2细胞4、8、12、24 h后ROS水平均极显著升高（P<0.01）,10^-1至10^-3 PCV2感染3D4/2细胞8、12、24 h后ROS水平显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）;10⁰至10^-3 PCV2感染3D4/2细胞8、12、24 h后,细胞内NO浓度及MPO活性显著提高（P<0.05）,细胞上清液中的IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10、IFN-γ、IL-8和MCP-1水平及COX-1活性均显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）,其中10⁰ PCV2感染3D4/2细胞后,各炎症因子水平上升最显著,且随着时间的延长,NO浓度逐渐升高,XOD活性逐渐降低。【结论】PCV2可诱导3D4/2细胞炎症反应,且10⁰ PCV2体外感染3D4/2细胞4~12 h是建立炎症模型的最佳条件。     

高浓度CO2下红松幼苗根系呼吸对土壤呼吸的贡献

本文于2003年5月至10月在长白山森林生态系统定位站内研究了高浓度CO2(500和700靘olmol-1)对红松幼苗土壤呼吸以及根系呼吸对土壤呼吸的贡献。经过4个生长季高浓度CO2的处理,利用LI-6400-09土壤呼吸室对红松幼苗土壤总呼吸和根系呼吸进行了测定。为了区分根系呼吸对土壤总呼吸的贡献,本文采用了PVC管断根法,即每种处理下将三根PVC管插入土壤中30cm以切断根系,从而终止了植物冠层对根系碳水化合物的供应。分别于6月16日、8月20日和10月8日对管内外土壤呼吸进行了测定。结果表明大气和土壤5cm温度都存在明显的日变化,但不同处理之间没有显著差别(P>0.05)。土壤总呼吸和断根土壤呼吸也有明显的日变化和季节变化。不同处理之间土壤总呼吸和断根土壤呼吸差异显著(P<0.01)。6月16日、8月20日和10月8日不同处理下土壤总呼吸和根系呼吸的贡献的平均值分别为3.26、4.78和1.47靘olm-2s-1以及11.5%、43.1%和27.9%。图5表1参38。     

7种乔木对SO_2清除能力的定量评价

本文采用基于ArcView软件的CITYgreen模型,以东北林业大学哈尔滨实验林场为例,结合航片判读与实地调查,对哈尔滨市7种主要乔木树种对SO2的清除能力进行了定量评价。结果表明：糖械对SO2的清除能力最强。其次是白桦。最弱的落叶阔叶树种为水曲柳。针叶树种对SO2的清除能力普遍低于阔叶树种。随着树木的生长其清除能力有逐步增强的趋势,其清除量增加的强度在生长旺期最大,以后其强度逐渐渐弱。     

林业经济信息集成平台的构建

本文通过介绍基于J2EE技术框架的林业经济信息系统的构建,指出了为林业经济信息的集成与共享提供一个基础平台的重要作用与意义,以及其构建的方法与步骤。     

绿芬威在大樱桃育苗上的应用

绿芬威是美国太平洋化学公司生产的系列微肥，有1号、2号、3号等。在大樱桃育苗上应用绿芬威2号，与磷酸二氢钾相对照，从大樱桃苗的高度、粗度、百叶鲜重、百叶厚、叶片的大小、叶片的光泽度等方面调查看出，绿芬威2号效果明显。     

全球变暖将引发冲突 CO2储存从容应对

如同温度计中持续上升的水银柱一样，全球变暖的话题近年来不断升温，最近又有几个相关的重要报告出炉，这个似乎已是老生常谈的警告让人们的心又一次悬了起来。二氧化碳不断在大气层中聚集，吸收的热量越来越多，会不会有一天地球真的变成烧热的铁锅，而人类就是那上面备受煎熬的蚂蚁？幸好间或也有一些好消息传来，把二氧化碳捕集起来并储存到地下，也许是个为地球降温的好办法。     

德国低甲醛释放量刨花板的生产方法及评价

随着现代工业的发展,生产和生活中有害化学物质对人体的危害普遍得到了政府、企业等各部门的关注,人造板板材甲醛释放量标准的规定就是其中一例。德国的E1级刨花板是指板材甲醛释放量用穿孔法测定低于10mg/100g,大室法测定低于0.1PPm。本文主要介绍德国低毒刨花板的生产和对产品性质的研究情况。     

萃取大红袍花椒挥发油的研究

利用超临界CO2萃取装置，采用动态萃取的方法，研究了压力、温度、萃取时间等因子对花椒挥发油萃取的影响，为规模化生产及其相关研究提供了科学依据。研究表明，样品200g粒度40目，最佳的萃取条件为：压力33MPa，温度55℃，时间1．0h，花椒挥发油萃取率为10．2％。气-质联用分析花椒挥发油结果表明，挥发油为3-甲基-2氮杂芴、γ-萜品烯、3-蒈烯等31种化舍物组成。其中3-甲基-2-氮杂芴含量最高，达到18．63％。     

TiSiWl2O40／TiO2催化合成苹果酯—B的研究

报道了固载杂多酸盐TiSiW12O40／TiO2的制备方法，并以TiSiW12O40／TiO2为多相催化剂，通过乙酰乙酸乙酯和1，2-丙二醇反应合成了苹果酯-B，探讨TiSiW12O40／TiO2对缩酮反应的催化活性，较系统地研究了原料量比、催化剂用量、反应时间诸因素对产品收率的影响。实验表明：TiSiW12O40／TiO2是合成苹果园-B的良好催化剂，在乙酰乙酸乙酯与1，2-丙二醇的物质的量比为1：1．5、催化剂用量为反应物料总质量的1．0％、环已烷为带水剂、反应时间1．0h的优化条件下，苹果酯-B的收率可达83．3％。