表达猪瘟病毒E0-E2基因重组腺病毒疫苗 在小鼠体内的存留时间分析

研究E0-E2基因和表达蛋白及抗体水平在小鼠体内的最长存留时间,以确定表达猪瘟病毒E0-E2基因重组腺病毒疫苗(rAd-E0-E2)在小鼠体内的存留规律。本试验选用30只SPF级别的健康小鼠,随机分为A、B组,各免疫组以1×106 IFU/只剂量接种rAd-E0-E2,对照组注射生理盐水。A组20只于接种后不同特定时间(2只/次)采集血液和组织进行PCR和IFA检测E0-E2基因及表达蛋白残留情况;B组10只于接种后1、3、5、7、10、14、21、28d采集血清检测猪瘟抗体水平。PCR和IFA检测显示,在接种12、24、36h后肝、脾、肾组织和血清中E0-E2基因和蛋白检出率为100%,接种48h后小鼠肝、脾组织检出率为50%,肾组织和血清检出率为100%。接种72h以后,小鼠血液和组织检测均为阴性。接种后7d试验组体内抗体阳性率为40%,接种后10d小鼠体内抗体阳性率为100%,抗体阻断率在43%～51.2%,接种后28d,猪瘟抗体阳性率为100%,抗体阻断率在75.6%～87.5%。表明rAd-E0-E2在小鼠体内的存留时间最长72h,接种时间与E2抗体水平呈正相关。     

鸡传染性喉气管炎基因工程疫苗研究进展

鸡传染性喉气管炎(Infectious laryngotrac-theitis,ILT)是由传染性喉气管炎病毒(Infectiouslaryngotractheitis virus,ILTV)引起的一种急性呼吸道传染病,其特征性病变是呼吸困难、气喘、咳出血样渗出物,喉部和气管粘膜肿胀,严重者会导致糜烂和出血[1].     

猪伪狂犬病毒gE基因在大肠杆菌中的表达

根据Genebank中伪狂犬病毒Min-A株gE基因序列,设计了一对引物,PCR扩增长度为557bp的gE基因去信号肽后的主要抗原区域(157-714bp),将其克隆进测序载体PGEM-Teasy中,成功构建质粒PGEMTeasy-gE。用BamhI和HindIII将gE基因主要抗原区域从PGEM-Teasy中切出,然后与同样酶处理的原核表达载体PET32A连接,命名为PET-gE。在IPTG的诱导后,经SDS-PAGE电泳发现43ku处出现特异性蛋白条带。经过Western blot分析,表达产物具有很好的免疫原性。该研究成功表达出具有抗原性的目的蛋白,为血清学鉴别诊断方法gE-ELISA的建立打下很好的基础,同时gE-ELISA也能对野毒和疫苗毒进行鉴别。     

论先秦杂家的存在问题

虽然在学术界有许多学者认为,先秦时期杂家"学无所主"、"调和"、"折衷"百家之学,杂家不成其为一个学派,甚至将其归属于黄老道家。但笔者通过多年的研究,发现先秦杂家有自己独特的学术宗旨、理论方法和构筑思想体系的思维模式,先秦杂家有自己的代表人物和作品,而且,先秦杂家和汉初诸子有着学术上的传承关系。     

栉孔扇贝鳃细胞原代培养与B[α]P细胞毒性检测技术的研究

本研究优化了栉孔扇贝(Chlamys farreri)鳃细胞制备方法和原代培养条件,采用3种细胞活性检测技术,比较分析了苯并(a)芘(B[α]P)对栉孔扇贝鳃细胞的毒性作用。结果显示,栉孔扇贝鳃组织在1%青霉素–链霉素(双抗)和庆大霉素消毒10~30 min内,原代培养鳃细胞存活率无明显差异。消毒30 min时,镜检无染菌现象,细胞状态良好。胰蛋白酶消化时间对鳃细胞收获量影响显著,在消化15~25 min内,鳃细胞存活率较高,胰蛋白酶的最佳消化时间为25 min。在150~300 g相对离心力作用下,鳃细胞形态和存活率存在明显差异,在150 g时,存活率和细胞完整性较好。添加胎牛血清(5%~20%)在6~12 h内鳃细胞存活率无显著变化,培养24 h时,5%和20%处理组存活率显著下降,10%和15%处理组存活率无明显变化。台盼蓝拒染法细胞活性检测表明,B[α]P对栉孔扇贝鳃细胞活性无明显影响;CCK8试剂法得出,仅在16 μg/mL最高浓度下,鳃细胞活性受到显著抑制;而中性红比色法显示,鳃细胞毒性作用与B[α]P浓度、染毒时间呈正相关性。研究表明,栉孔扇贝鳃细胞最佳制备方法：消毒30 min、胰蛋白酶消化25 min、相对离心力为150 g、原代培养基添加10%胎牛血清为最佳。同时,中性红比色法可以作为评价B[α]P对栉孔扇贝鳃细胞毒性的敏感指标。     

2011～2015年山东口岸进境木质包装疫情分析及建议

本文对山东口岸2011~2015年进境木质包装疫情截获情况进行统计,重点对所截获检疫性有害生物的年度趋势、种群类别、截获频次等进行分析,汇总山东口岸近年进境木质包装中截获的检疫性有害生物名单,并在对疫情截获进行分析的基础上提出了进境木质包装检疫工作对策和建议。     

平菇等六种食用真菌糖蛋白的理化性质及对顺铂诱导肾细胞损伤恢复的作用

采用水提醇沉法提取6种真菌中的糖蛋白,通过苯酚—硫酸法、间羟基联苯法、BCA法测定其总糖、酸性糖和蛋白质含量,采用PMP柱前衍生化法和HPGPC法测定其单糖组成及分子量分布,采用顺铂建立受损肾细胞模型,研究6种食用真菌糖蛋白的恢复作用。结果表明,香菇糖蛋白的总糖含量最高,为38.11%,口蘑糖蛋白中蛋白质含量最高,为34.21%,各糖蛋白中酸性糖含量均较低且相差不大;6种食用真菌糖蛋白中均含有甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其分子量在500~20 000 u之间,在质量浓度为12.5~50 μg·mL^-1时6种多糖对受损肾细胞具有一定的恢复作用。理化性质测定结果表明,这6种食用真菌糖蛋白均含有较高的多糖成分,且均对顺铂诱导的肾细胞损伤具有一定的恢复能力。     

杏鲍菇多糖的提取及其对RAW264.7细胞吞噬活性·NO释放的影响

[目的]以杏鲍菇多糖的理化性质作为综合评价指标,提取杏鲍菇多糖,并研究其对RAW264.7细胞吞噬活性的作用及对NO释放的影响。[方法]采用水煎煮提取、超声提取、90℃热水浸提、70℃热水浸提、50℃热水浸提提取杏鲍菇多糖,并采用苯酚-硫酸法、间羟基联苯法以及Lowry法测定其总糖、酸性糖和蛋白质含量;采用PMP柱前衍生化法和HPGPC法测定其组成糖和分子量分布;采用吞噬中性红法和Griess试剂盒法测定其吞噬能力及NO的释放量。[结果]试验得出,50℃热水浸提提取的多糖总糖含量最高,超声提取的多糖蛋白质含量最高,各组提取酸性糖含量相当且均较低,水煎煮提取多糖中的单糖种类最少、分子量最低。综合比较,90℃热水浸提为杏鲍菇多糖的最佳提取方法;在质量浓度为25~100μg/m L,能够极显著地促进细胞吞噬中性红的能力和NO的释放。[结论]90℃热水浸提水煎煮为杏鲍菇多糖的最佳提取方法,一定浓度的杏鲍菇多糖能够提高RAW264.7细胞的吞噬活性,并能促进NO的释放,提示杏鲍菇多糖具有一定的免疫活性。     

造化风景承古意 自在园林有大观——浅谈中国古典园林植物景观营造的历史沿革

在中国传统文化中,植物是极为重要的文化信息载体.植物景观作为风景园林的重要组成部分,对于中国古典园林意境的形成、文化内涵的体现,是其他任何园林构成要素所无法替代和超越的.中国古典园林植物景观设计、营造历经千年的发展,在技术和方法上逐渐成熟,成为东方园林的典范.     

智能灌溉系统的可靠性仿真研究

介绍了一种智能灌溉系统的构成及其工作原理,并对该系统的可靠性进行了研究;分析了系统的失效模式,进而建立了系统的故障树;利用Monte Carlo法进行可靠性仿真,给出了仿真结果,并根据仿真结果对系统的改进完善提出了建议,为提高智能灌溉系统的可靠性和维修性提供参考依据,对提高农业生产具有重大意义.