山葡萄VaCIPK18原核表达与多克隆抗体制备

类钙调磷酸酶B亚基蛋白(CBLs)互作蛋白(CIPKs) 作为类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在植物响应非生物胁迫信号转导中起着重要作用。基于前期山葡萄响应低温胁迫转录组测序结果,发现低温胁迫引发的早期伤害及感知阶段的激酶基因中涉及CBL-CIPK 信号通路的VaCIPK18表达显著上调。为进一步研究山葡萄(Vitis amurensis)VaCIPK18激酶参与低温胁迫的功能,采用同源克隆获得了VaCIPK18基因,其开放阅读框为1 320 bp,编码439个氨基酸。基于对VaCIPK18蛋白生物信息学分析,获取胞外结构域中抗原表位丰富的肽段,并将其C端调控结构域(230~439 aa)构建到原核表达载体pET28a-SUMO。将重组表达载体转化至大肠杆菌(E. coli Rosetta)中,经0.8 mmol·L^-1 IPTG、37℃诱导4 h表达出大小为42 kDa的包涵体蛋白。将重组蛋白作为抗原免疫日本大耳白兔,获得anti-VaCIPK18多克隆抗体,经检测具有高效价及特异性。Western Blot结果表明,该抗体可以与葡萄内源CIPK18特异性结合,且在50 kDa位置出现与预期一致的条带。同时,CIPK18在低温胁迫后葡萄叶片中蛋白表达水平与室温下相一致,但两种状态下均存在可能的磷酸化与泛素化修饰现象。本研究结果为进一步探究VaCIPK18的蛋白定位、表达及其功能奠定了基础。     

Application of abscisic acid (ABA) at veraison advanced red color development and maintained postharvest quality of ‘Crimson Seedless’ grapes

‘Crimson Seedless’ is a popular table grape cultivar, but in warm-climates, its fruits often fail to develop adequate red color, even after they have been treated with ethephon. Application of abscisic acid (ABA) may improve color more effectively than ethephon, but its potential effects on postharvest quality must be considered before recommending its use on table grapes. Therefore, we compared the postharvest quality attributes of grapes treated preharvest with 250 μL L⁻¹ ethephon, the current industry standard, to that of grapes treated with 150 or 300 μL L⁻¹ ABA, or nontreated. Treatment with either ethephon or 150 μL L⁻¹ ABA allowed grapes to be harvested 10 d before nontreated fruit, and fruits treated with 300 μL L⁻¹ ABA attained marketable quality 30 d before nontreated fruit. Early harvest was possible because the treatments induced more rapid coloring of the grapes, and though total yield was not affected by any plant growth regulator (PGR), all PGRs doubled packable yields by improving the color of the grapes. ABA-treated grapes were characterized by superior appearance both in berries and clusters’ rachises compared to ethephon-treated and control grapes. Other quality attributes such as firmness, berry weight, decay incidence, and shatter remained unaffected among treatments. Therefore, ABA is an effective alternative to ethephon for enhancing the color and maintaining postharvest quality of ‘Crimson Seedless’ grapes.     

宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄叶部氮磷钾生长季动态研究

通过叶分析研究了贺兰山东麓酿酒葡萄产区的葡萄植株叶全氮磷钾6～9月含量动态变化规律。结果表明：宁夏贺兰山东麓御马酿酒葡萄基地酿酒葡萄全生育期叶片氮素营养充足，而叶片磷钾生育后期供应不足，成为酿酒葡萄生育后期叶片生长量下降的主要原因；酿酒葡萄叶片氮磷钾动态变化揭示了对晚熟酿酒葡萄品种8月份应少量补充氮素，而8月末是磷、钾补充的关键时期；酿酒葡萄氮磷钾营养诊断的最适部位是叶柄，最佳营养诊断时期为8月份。     

葡萄砧木组培快繁研究

[目的]建立葡萄无病毒苗木繁育体系。[方法]以3个葡萄砧木品种3309、101-14 mg、trup的单芽茎段为材料,对其进行一定时间的预培养,探讨外植体来源、取材季节、培养基类型、激素配比等关键因素对葡萄组培快繁的影响。[结果]预培养后取材的外植体的污染率和褐死率分别为20.00%~28.33%和10.00%~13.33%,室外直接取材的外植体的污染率和褐死率分别为56.67%~81.67%和20.00%~25.00%;以1/2MS为基本培养基最有利于葡萄外植体萌发,各品种腋芽的萌发率均达到60%~72%;春季取材的外植体萌芽率较高,且萌发所需时间较短;3个品种的最适初代培养基为1/2MS＋0.05 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L IBA,最适继代和生根培养基为1/2MS＋0.05 mg/L IBA和1/2MS＋0.2 mg/L IBA。[结论]该研究对促进葡萄产业化发展具有积极意义。     

宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄发展的肥力制约因素与改良措施

宁夏贺兰山东麓地区干旱少雨,光照充足,土壤富含石砾,土壤质地一般为砂壤至砂壤偏轻,土壤有机质、氮、磷、钾含量很低,营养元素常处于亏缺状态.酿酒葡萄栽培区肥水管理措施粗放.对该区域发展酿酒葡萄有利的土壤及气候因素和不利的土壤、气候、栽培管理、肥力调控等因素进行分析,根据土壤供肥能力和酿酒葡萄的营养规律,提出了改善酿酒葡萄品质,提高酿酒葡萄产量,促进酿酒葡萄产业健康发展的水肥管理技术及土壤改良措施.     

不同副梢处理对酿酒葡萄生长及果实品质的影响

以5年生酿酒葡萄"蛇龙珠"为试验材料,通过不同副梢处理,研究了酿酒葡萄蛇龙珠果穗长、单果质量等生长指标和可溶性总糖、可溶性固形物、可滴定酸等品质指标的变化.结果表明:在葡萄果实的整个发育期,副梢保留3片叶(处理4)的果穗长、可溶性总糖、可溶性固形物含量均显著高于其他各处理;花后105 d,与副梢全部保留处理相比,副梢保留3片叶(处理4)和副梢保留2片叶(处理3)处理总酚和单宁含量为各处理中最高;果实成熟期果实可滴定酸含量为副梢全部保留处理最高;说明适当程度的副梢修剪可以提高酿酒葡萄蛇龙珠的果实品质.     

对氯苯氧乙酸对红地球葡萄低温霜害的影响

对红地球葡萄生长后期喷施4种不同浓度4-CPA,在不同低温胁迫下,用电导法测定细胞膜透性,配合Logistic方程求出拐点值,确定冰冻半致死温度(LT50).结果表明:低温胁迫下,红地球葡萄电解质透出率呈S型曲线增长,在0～-6℃间随着温度下降,葡萄叶片组织电解质透出率有一急剧升高的敏感区域,喷50 mg/L 4-CPA的抗寒性最强,拐点温度为-2.57～-2.90℃.     

褪黑素对‘无核白’葡萄体细胞胚的诱导作用

以欧洲葡萄‘无核白’（Vitis vinifera‘Thompson Seedless’）未开放的小花蕾为外植体,研究0、1.0、2.0、3.0 mg ? L-1褪黑素（Melatonin）对其体细胞胚的诱导效果。结果表明：‘无核白’小花蕾在 MS + 1.0 ~ 3.0 mg ? L-1 褪黑素 + 2.0 mg ? L-1 6-BA + 30 g ? L-1蔗糖 + 3 g ? L-1植物凝胶的培养基上继代培养30 d时愈伤组织诱导率较好,为73.67% ~ 89.10%,显著高于2,4-D处理,愈伤组织形成所用时间较2,4-D处理缩短了14 d。愈伤组织诱导120 d时,不同浓度褪黑素均出现体细胞胚,其中,以MS + 1.0 mg ? L-1褪黑素 + 2.0 mg ? L-1 6-BA + 30 g ? L-1蔗糖的培养基体细胞胚的发生率最高,180 d时达12.05%。体胚在 MS + 60 g ? L-1 蔗糖 + 0.5 g ? L-1活性炭的X6培养基中萌发30 d后,将萌发的子叶胚转移至MS + 0.2 mg ? L-1 6-BA + 0.1 mg ? L-1 NOA + 30 g ? L-1 蔗糖 + 0.5 g ? L-1活性炭的成苗培养基上,其中,1.0 mg ? L-1褪黑素诱导产生的体胚发育正常的数量较多,为14.84%。不同浓度褪黑素处理的体胚诱导率均于180 d后增长较快,且低浓度的褪黑素有利于体胚萌发与正常发育,2,4-D诱导的愈伤组织无体胚形成。     

不同灌溉及施肥方式对酿酒葡萄生长发育及产量品质的影响

针对贺兰山东麓酿酒葡萄栽培中存在的大水大肥等问题,采用田间试验的方法研究不同灌溉和施肥方式下酿酒葡萄长势及产量和品质。结果显示:在常规氮磷钾化肥的基础上增施中微量元素钙镁硫能显著促进新梢生长,增施腐植酸则能显著提高叶绿素含量;灌水方式对葡萄叶片全氮磷钾含量影响不显著,滴灌能显著提升叶柄养分尤其全钾含量;相同施肥条件下沟灌与滴灌产量相当;滴灌条件下进一步增施腐植酸和钙镁硫后产量提高;增施钙镁硫等中量元素可显著增加可溶性糖含量和可溶性固形物,同时明显降低总酸度,改善品质。     

水杨苷异羟肟酸对香水百合切花保鲜效应的研究

[目的]筛选出适宜的切花保鲜剂及浓度。[方法]以香水百合为试材,清水为对照,应用不同浓度的CaCl2、6-BA和SHAM保鲜剂处理百合切花,测定其瓶插寿命、单花寿命、第4天最大花径和第7天最大花。[结果]2 000 mg/L CaCl2、2.0 mg/L 6-BA和40 mg/LSHAM对百合切花保鲜效果最好。[结论]SHAM可延缓百合切花采后衰老,延长其瓶插寿命。