单胚性二倍体为母本与异源四倍体杂交大规模创制柑橘三倍体

【目的】以单胚性的二倍体柑橘品种为母本与异源四倍体体细胞杂种杂交培育三倍体植株。【方法】选择亲本配置杂交组合进行人工授粉,授粉后70—100 d采幼果进行胚挽救,以流式细胞仪结合根尖染色体压片对再生植株进行倍性检测,最后进行SSR分子标记鉴定。【结果】2009—2012连续4年,以8个二倍体为母本、以4个异源四倍体体细胞杂种为父本,共配置14个倍性杂交组合,授粉花数3 347朵,坐果数678个,平均坐果率20.26%。实施胚挽救的果实数505个,培养种子12 357粒,经生芽、生根诱导培养共获得1 022个株系。通过对再生植株的倍性检测,共获得三倍体植株755个株系,四倍体19个株系。对华农红柚 × NH组合的三倍体、四倍体后代进行分子鉴定,表明三倍体和四倍体全部为双亲的有性杂种后代。【结论】本研究通过杂交获得的三倍体为我国无籽柑橘品种选育奠定了材料基础;同时获得的四倍体后代也为未来的柑橘三倍体育种提供了优良的亲本材料。     

柑橘不同品种对根癌农杆菌介导遗传转化的反应差异

以15种不同柑橘品种的胚性愈伤组织为材料,在已经建立的根癌农杆菌介导的愈伤组织转化体系的基础上,对不同品种进行转化实验。结果表明：在所用的15个柑橘品种的愈伤组织中,有12个可以获得不同程度的抗性愈伤组织,3个始终无法获得再生的抗性愈伤组织;品种之间呈显著差异。国庆一号、山金柑、明尼奥拉桔柚和纽荷尔脐橙4个品种为首次成功转化。     

果树学科服务产业扶贫的实践探索与模式探究——基于华中农业大学柑橘团队为例

产业发展是脱贫致富、乡村振兴的根本之策。果树产业作为农业增效、农民增收的重要支柱产业,在产业扶贫中具有不与粮棉争地、开发自然禀赋、符合精准要求、生态环境受益等比较优势。总结了果树产业扶贫的实践探索,包括坚持短期见效与长远受益相统一、坚持育种与育人相统一、坚持技术可行与经济可行相统一、坚持做特产品和做优支撑相统一、坚持问题驱动与科技引领相统一。最后,凝练出果树学科服务产业扶贫的基本范式,建议运用系统思维,统筹好果品生长技术系统、"政府-高校-农户-市场"社会系统和果树学科支持系统,推动果树学科发展与产业发展相融共生、协调并进。     

一种快速鉴定柑桔体细胞杂种对脚腐病抗性的方法

通过用菌丝块接种柑桔叶片法进行柑桔体细胞杂种抗病性鉴定,并与接种柑桔枝条法,菌丝块接种嫁接苗法比较,证明柑桔不同部位对脚腐病的抗性存在着相关性,可采用这种相关性接种柑桔叶片进行体细胞杂种的抗病性鉴定。     

银杏组织培养与黄酮生产的研究 ：Ⅰ.银杏愈伤组织的诱导与褐变调控的研究

以叶片为试材,对银杏愈伤组织的诱导、继代培养及褐变调控进行了研究。结果表明：（1）银杏愈伤组织的诱导及继代培养均以MT附加BA 1.0mg/L和NAA 3.0mg/L的培养基效果最好;(2)0.1%的植酸具有明显地促进愈伤组织生长、抑制褐变的作用,而活性炭和硫代硫酸钠效果最差;（3）蔗糖浓度为5%的培养基,愈伤组织增长倍数最高,达13.77;(4)继代培养40～45d愈伤组织增长倍数达到最大值。综上研究结果,获得较高生物量的适宜培养条件是：MT+BA1.0mg/L+NAA3.0mg/L+蔗糖5%+PA0.1%培养基,光照培养40～45d。可为下一步黄酮生产培养提供大量的、生长旺盛的新鲜愈伤组织。     

柑桔愈伤组织染色体变异研究

利用Giemsa染色技术对柑桔不同种和品种的愈伤组织及再生的多丛芽进行了染色体检查。结果表明,柑桔愈伤组织中染色体变异是一普遍现象。从锦橙申分离出A、B、C三种类型的愈伤组织,其中A类变异最大,含有0.4%的单倍体、35.1%的二倍体、3.8%的三倍体、49.1%的四倍体、1.3%的六倍体、0.4%的八倍体、0.09%的十倍体和0.03%的十六倍体细胞以及9.9%的非整倍体细胞,C类变异最小,B类介于A、C两类之间。A类再生出的多丛芽中,有16.5%的三倍体和34.5%的四倍体。在生根培养基中加入0.4%的活性炭,能显著地促进多丛芽的增殖和生长。2,4-D对愈伤组织染色体变异有促进作用。     

柑桔同源及异源四倍体花粉育性研究

对８个柑桔同源四倍体及通过原生质体融合得到的２个异源四倍体的花粉育性和花粉粒大小进行了测定。结果显示，同源四倍体柑桔花粉育性平均为３６％，约为二倍体（６２％）的６０％。‘伏今夏’甜橙由于是异质结合的染色体易位突变体，其同源四倍体花粉育性比二倍体（２３％）高出５０％。权（Ｐｏｎｃｉｒｕｓｔｒｉｆｏｌｉａｔａ）与甜橙（Ｃｉｔｒｕｓｓｉｎｅｎｓｉｓ）属间以及来檬（Ｃ．ａｕｒａｎｔｉｆｏｌｉａ）与甜橙种间四倍体体细胞杂种花粉育性介于其双亲之间，花粉育性分别为各自高值亲本的９９％和７５％。同源及异源四倍体花粉粒体积平均为二倍体的２倍或双亲之和。本结果说明，柑桔体细胞杂种可作为杂交亲本进一步被利用。     

银杏雌雄株核型及性别早期鉴定

以银杏茎尖及根尖为试材，采用压片法对雌雄株核型及性别早期鉴定进行了深入研究，结果表明，①银杏雌雄株核型一致，唯一差异就是雌株第１０对亚中部着丝粒染色体的长臂上各有一个随体，而雄株这对染色体仅一条染色体具有随体，属异型染色体，即性染色体，如果用ＸＹ表示雄株这一对染色体，则雌株可用ＸＸ表示。因此，雌株核型为２ｎ＝２ｘ＝２４＝２２ＡＣ［４ｍ（２ｓａｔ）＋６ｓｍ＋１２ｓｔ］＋ＸＸ；雄株核型为２ｎ＝２ｘ＝２４＝２２Ａ［Ｃ４ｍ（２ｓａｔ）＋６ｓｍ＋１２ｓ］＋ＸＹ，进一步证实了银杏的性别决定机制属ＸＹ型；②根据ＸＹ性别决定机制，借助胚培技术对７５株银杏实生幼苗进行了性别早期鉴定，雌株为３１珠，占４１．３％，雄株为４４株，占５８．７％     

柑桔花药培养研究

引言 自本世纪六十年代,印度科学家S.Guha在蔓陀萝上取得花粉植株以来,许多植物的花药培养均取得了成功,通过花药培养,得到了小麦,水稻等新品种。花药培养已成为获得新品种的一条途径。柑桔花药培养可为柑桔遗传育种研究提供许多有价值的材料。日本首先在枳壳上得到花粉植株。随后,我国在四季桔、雪柑等柑桔种上也培养出花粉植株。由于花药培养受环境因素,如气候、树体生理状况等的影响较大,因此有必要研究在我国的环境条件下,枳壳花粉植株的再生技术,以便在育种实践中更好地利用这一抗寒资源。     

培养三倍体柑桔植株的研究

以柑桔异源四倍体体细胞杂种[哈姆林甜橙（CitrussinensisOsbeckcv．Hamlinsweetorange）＋粗柠檬（C．jambhiriLush　cv．Rough　lemon）]为父本与单胚的二倍体柑桔类型[宜昌橙（C．ichangensisSwingle）与华农本地早（C.reticulataBlancocv．Huanongbendizao）的杂交后代]杂交,通过幼胚早期离体培养,获得了113株再生植株,其中89％为三倍体,并初步筛选出了适宜的幼胚离体培养时间为授粉后80d。