猪圆环病毒2型特异性纳米抗体文库的构建及鉴定

为构建猪圆环病毒2型(PCV2)特异性纳米抗体文库,并对其库容和多样性进行鉴定分析,使用PCV2全病毒灭活疫苗免疫羊驼,经四次免疫后采血分离外周血淋巴细胞,提取总RNA,通过RT-PCR反转录合成cDNA;根据羊驼重链抗体基因序列设计特异性引物,通过巢式PCR扩增羊驼单域重链抗体(variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody,VHH)基因片段vhh,并将其克隆到噬菌粒载体pCANTAB 5E中,构建pCANTAB- vhh重组质粒;通过电穿孔法将重组质粒导入E. coli TG1获得抗PCV2特异性纳米抗体基因文库。文库菌梯度稀释后计数单克隆菌落数,并通过菌液PCR鉴定重组菌阳性率,计算抗体文库库容量;对PCR鉴定为阳性的重组质粒进行测序,分析抗体文库多样性。结果显示,构建的PCV2特异性纳米抗体文库重组菌阳性率为92.0%,库容量为2.75×10¹⁰ CFU/mL;测序后序列比对分析结果表明,纳米抗体文库包含的基因序列具有丰富的多样性。本研究成功构建了PCV2特异性纳米抗体文库,且文库质量满足后续试验要求,为进一步获得针对PCV2抗原的纳米抗体奠定了基础。     

鸭源禽腺病毒分离株的致病性及细胞培养特性研究

为进一步了解Ⅰ群禽腺病毒鸭源分离株的致病性和生物学特性,采取接种鸡胚和鸭胚,攻毒SPF鸡和雏鸭,并应用鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸡胚肝细胞(CEL)培养观察细胞病变。试验结果表明,SPF鸡胚和鸭胚均出现死亡以及心包积液等典型症状,SPF鸡和雏鸭也引起不同程度死亡,且出现与临床送检病例类似的症状,PCR检测与序列分析证实分离的2株鸭源Ⅰ群禽腺病毒均为FadV-4血清型,病毒接种CEF细胞后没有细胞病变,而接种CEL细胞后则出现很强的聚集性、细胞变圆等典型病变。表明分离的鸭源FadV-4对SPF鸡和雏鸭均具有一定的致病性,对CEL细胞具有一定的适应性。     

商品化鸡传染性鼻炎疫苗分类及特点

本文介绍了7种商品化鸡传染性鼻炎疫苗(有批签发产品)的种类、毒株组成、抗原含量、性状、用途、免疫程序、注意事项、贮藏与有效期,为了解各种类型的商品化鸡传染性鼻炎疫苗提供参考。     

MTT法细胞计数中细胞接种量的确定

在96孔细胞培养板中接种不同数量的CHO细胞,经过48 h和120 h培养后,采用MTT法进行细胞计数,以观察各孔细胞数量是否超出该法的可检测范围。为确保在经过连续培养5 d后各孔细胞数量仍在MTT法的测定范围内,确定出较为合适的细胞接种量非常必要。     

防治禽病的中兽药研究与发展趋势

正1中兽医防治禽病的理论与技术模式治未病就是通过中药的调理,使动物机体阴阳平衡,在机体内形成一道强大的防御机能,使疾病不能入侵。张仲景已经用中医整体观念和五行学说的生制克化理论,较全面地继承和发扬了《内经》治未病的思想,对治未病作出了具体细致的阐述。现代化畜禽养殖业追求的就是最佳     

一步法RT-PCR快速检测猪瘟活疫苗中BVDV外源病毒方法的建立

为检测商品化猪瘟细胞毒活疫苗中牛病毒性腹泻病毒污染,根据牛病毒性腹泻病毒5′端非编码区基因保守序列设计引物,建立了检测牛病毒性腹泻病毒一步法反转录—聚合酶链(RT-PCR)方法,并对其特异性、敏感性进行了研究。该一步法RT-PCR对牛病毒性腹泻病毒扩增结果为阳性,对照毒株扩增结果均为阴性,对牛病毒性腹泻病毒检测的灵敏性为1pg总RNA量,应用该方法,检测了32批猪瘟细胞毒活疫苗样品,以上结果表明该一步法RT-PCR方法检测速度快、特异性强、敏感性高,可用于猪瘟细胞毒活疫苗中污染的牛病毒性腹泻病毒外源病毒检测。     

猪细小病毒病的诊断与防治研究进展

猪细小病毒是可以感染母猪和仔猪的一种病毒性传染病,该病毒可以引起母猪的繁殖障碍,流产和产死胎及木乃伊胎,仔猪腹泻和皮炎。该病毒在猪场经常发生感染,给养猪业带来严重的经济损失。通过综述猪细小病毒的临床诊断和分子生物学诊断及防治研究进展,旨在为疾病的预防和控制提供参考。     

一例猪伪狂犬变异株的诊治

为对山东省某养猪场疑似猪伪狂犬病进行诊断,采用发病情况调查、临床症状、病理剖检、病原分离、PCR鉴定及血清中和试验诊断,确诊病原为猪伪狂犬病毒变异株。根据确诊结果,按照猪伪狂犬病治疗措施操作,猪场发病情况得到有效控制。     

禽流感疫苗的研究进展

由于禽流感基因组的抗原漂移，使禽流感疫苗仅能提供70％的保护力。针对这种特点，禽流感灭活疫苗通常制备成针对几种不同亚型病毒的多价疫苗。己证明一种灭活疫苗可以至少包括4种不同的AIV亚型，同只含单一亚型的疫苗比，并没有减弱对同一种血凝素（HA）亚型病毒攻击的有效保护，而且各亚型抗原之间不产生免疫干扰。禽流感灭活疫苗能使免疫鸡群在感染禽流感野毒时，     

兔球虫病和螨虫病的诊治

随着规模化养兔业的发展,寄生虫病流行更为广泛,危害越来越大。该类疾病在全国养殖区内均有不同程度的发生,毛兔、肉兔、獭兔均易感。一年四季均可发病。本病不但发病率高,传播快,死亡率高,很难迅速控制,严重的全军覆没,兔场倒闭。