气肿疽梭菌CctA基因的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立

研究旨在原核表达气肿疽梭菌细胞毒素A （CctA）基因,用纯化的重组蛋白建立其间接ELISA检测方法,a。利用大肠杆菌密码子的偏爱性优化CctA基因序列,克隆至原核表达载体pET-28a （+）,双酶切鉴定原核表达质粒pET28a-CctA并测序。将重组质粒转入大肠杆菌,经IPTG诱导得到高表达的重组CctA包涵体蛋白。包涵体蛋白变性后经镍（Ni）柱纯化,SDS-PAGE检测其纯化效果。以豚鼠抗气肿疽梭菌抗血清为一抗,用Western blotting方法检测重组CctA蛋白的反应原性。用棋盘滴定法建立间接ELISA检测方法,以复性后的重组CctA蛋白作为检测抗原,摸索抗原包被浓度、封闭液的种类及浓度、抗体的最适稀释度和反应条件等。选用3批气肿疽灭活疫苗免疫豚鼠后采集血清,同时用攻毒和间接ELISA两种方法验证疫苗的免疫效力。质粒双酶切结果显示,得到大小约853 bp的条带,与预期相符,且测序结果正确。SDS-PAGE结果表明,成功表达并纯化大小为35 ku的重组CctA蛋白。Western blotting结果显示,豚鼠抗气肿疽梭菌抗血清与重组CctA蛋白具有良好的反应原性。建立的间接ELISA法的最适条件为：抗原的包被浓度为0.5 μg/mL,于4 ℃包被过夜;封闭液选择10%胎牛血清,37 ℃孵育2 h;二抗的稀释度为1：8 000;室温避光显色10 min后终止反应,测定D_{450 nm}值。当P/N>4.6时,间接ELISA法检测结果与豚鼠攻毒试验结果拟合度较好。本研究成功表达CctA基因并纯化了重组CctA蛋白,建立的以重组CctA蛋白为检测抗原的间接ELISA检测方法,有望成为气肿疽灭活疫苗免疫效果验证的替代方法。     

PEDV 流行毒株抗体对不同亚型毒株的中和试验

猪流行性腹泻病毒(PEDV)是一种通过小肠感染,引起猪呕吐、腹泻、脱水的急性高度接触性传染病。2010年起在我国迅速暴发,对仔猪的致死率高达80%～100%。PEDV可分为G1 (G1a、G1b)与G2 (G2a、G2b)基因亚型,各亚型病毒纤突(S)蛋白基因序列存在缺失、插入和大量点突变。为进一步研究S蛋白序列的差异是否造成病毒抗原性的差异,本试验采集猪流行性腹泻流行毒感染猪只肛拭子进行PEDV-S蛋白基因序列比对分析,并对感染康复猪只采集血清进行中和试验,研究PEDV流行毒株血清抗体与不同基因亚型毒株中和反应情况。结果显示,流行毒(G2a)感染猪只血清抗体中和PEDV不同亚型病毒株,中和能力存在显着差异。对PEDV-A (G2a)毒株的中和能力最强,均值为1:60,对PEDV-B(G2b)株中和能力次之,均值为1:20,对CV777 (G1a)毒株无中和能力。     

粮饲兼用型冬小麦鲁原886的旱作效应研究

粮饲兼用型冬小麦鲁原886是我所于1997年利用航天搭载与同位素示踪技术选育而成的新品系之一。在品比和示范试验中表现为抗旱、高产、稳产。为进一步探讨该材料的生产性能，我们在田间条件下，进行水旱对比试验，以为该材料推广提供参考。     

核技术在我省的开发应用研究

核技术是一项高、精、尖技术,具有很好的开发价值和广阔的发展前景。因此,早在19世纪末,人类就开始了对它的研究及应用,但长久以来人们只从事军事、战争的应用研究。近30多年来,才开始大力发展原于能和平利用,以造福于社会,造福于人类。 技术在农业上的应用 核技术的农业应用,它涉及到辐射育种、耕作施肥、植物保护、并渗透到畜牧,兽医、林业、水产,农副     

太阳能干燥装置设计及热研2号柱花草低温干燥试验

利用太阳能空气集热器、干燥仓、传感系统、控制系统、鼓风机等自行设计了太阳能干燥平台,在此平台上进行热研2号柱花草低温干燥试验,研究实时太阳辐射下的集热器接收辐射强度、干燥仓进出口温度、相对湿度、温度差、湿度差等对柱花草干燥的影响。试验结果表明:牧草干燥大致分为3个阶段,牧草含水率在3个阶段的干燥速率约为0.243、0.140 5、0.039 2%/min,牧草干燥效率较自然日晒显著提高。通过干燥参数和牧草质量变化的散点图,建立多元线性线性回归方程,相关系数为0.986 5,与试验结果符合良好,有助于进一步对干燥工艺进行优化。     

螺旋离心式潜水排污泵叶轮的加工

对引进意大利技术生产的螺旋离心式水泵中的关键零件螺旋式叶轮的结构特点进行了分析，讨论了叶轮的加工工艺、夹具及工装设计对叶轮精度的影响，确定了螺旋式叶轮的加工工艺、校平衡的方法及加工中应注意的问题。     

基于互联网的高校科研管理信息系统的设计

科研管理在高校有着举足轻重的作用。针对高校科研管理的现状，以减轻科研管理人员的劳动强度、提高工作效率为目的。提出了基于互联网的高校科研管理信息系统的总体设计方案和信息资源结构。对建立基于互联网的高校科研管理信息系统有着指导作用。     

生物有机肥对黄州萝卜主要经济性状和效益的影响

为了验证生物有机肥对蔬菜作物生长的促进作用与增产效应,以黄州萝卜为试验材料,探究不同生物有机肥对黄州萝卜产量及品质等方面的影响,设置3个施肥处理:每667 m~2分别施用200 kg生物有机肥+20 kg三元复合肥;200 kg灭活生物有机肥+20 kg三元复合肥;常规施肥(每667 m~2施200 kg饼肥+20 kg三元复合肥)以及空白对照。结果表明:每667 m~2施200 kg生物有机肥+20 kg三元复合肥处理的萝卜667 m~2产量最高,为2 921.5 kg;在品质方面,萝卜含粗纤维7 g/kg,可溶性糖42 g/kg,水分92.6%;综合667 m~2效益最优,达到4 567.3元,产投比最高,为3.5。     

硝酸镧处理对短穗鱼尾葵幼苗耐寒性的影响

为探明硝酸镧对短穗鱼尾葵(Caryotamitis)耐寒生理指标的影响,用4个不同浓度的硝酸镧溶液(0、100、350、500mg/L)喷施盆栽短穗鱼尾葵叶片,经变温处理后检测各项耐寒指标。结果表明,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、丙二醛(MDA)、脯氨酸、可溶性蛋白和叶绿素的含量表现出明显的浓度效应,而且25℃恢复后幼苗叶片的各项耐寒指标的模糊隶属函数值分别为0.41、0.46、0.70、0.50,其中350mg/L硝酸镧溶液处理对提高短穗鱼尾葵幼苗的耐寒性具有显著的效应。     

新型农药—福戈对超级稻壮苗和延缓功能叶衰老的效果

2010年晚季以超级稻品种合美占为试材,进行了新型农药—福戈对超级稻秧苗、功能叶片、产量效果的影响研究。结果表明：福戈具有明显的壮苗、壮根和匀苗的作用;福戈具有延缓功能叶片衰老、增强植株抗倒能力的作用;福戈具有明显的增产效果。