蓝舌病单克隆抗体的研制

作者应用淋巴细胞杂交瘤技术,将小鼠骨髓瘤细胞SP_2(?)0—Ag14与提纯篮舌病10型病毒免疫的小鼠脾细胞进行杂交,制备能分泌抗蓝舌病病毒的单克隆细胞株225个,经三次克隆化,选择了35株杂交瘤细胞制备腹水,用间接ELISA和间接免疫荧光与蓝舌病病毒排谱反应表明,获得单抗中有12株具有群特异性。用蓝舌病病毒1、2、3、4、5、6、8、10、15和17型高免血清作阻断ELISA试验,单克隆抗体7D_8和2D_12有很明显阻断作用,可望用于检测临床样品。     

2013—2018年我国H9亚型禽流感分子流行病学监测

为了解我国H9亚型禽流感流行状况及流行毒株分子遗传进化特征,2013—2018年采集我国大部分地区养殖场鸡群的喉、泄殖腔拭子,进行了 H9 亚型禽流感病原学检测。对H9亚型禽流感检测阳性的病料进行病毒分离鉴定,并选取80株分离株进行HA基因遗传进化分析,并对其受体结合位点以及糖基化位点进行分析。研究结果表明：这80株分离株中,除2013年分离的1株毒株外,其余79株均属于Y4亚群;虽然这些分离株的裂解位点均属于低致病性禽流感特征,但具有致病性增强的风险。因此,加强 H9亚型禽流感的分子流行病学监测,及时掌握 H9亚型禽流感病毒的最新变异情况,对于我国禽流感防控具有重要意义。     

用异源抗体免疫荧光技术检测禽脑脊髓炎病毒和抗体

用禽脑脊髓炎病毒免疫的鼠阳性血清作为诊断抗体,对21份待检禽血清和10份病料进行检测,其结果如下:抗体阻断荧光试验(ABET)检测21份血清中,阳性血清11份,阴性血清10份,中和试验测得,阳性血清11份(NI＞1.17),阴性血清10份;琼扩试验测得阳性血清5份。间接免疫荧光试验测得10份病料中有7份阳性,2份可疑,1份阴性,用这些可疑病料脑内接种1日龄雏鸡,成功     

生态王对雏鸡细菌性疾病防治效果及对体液免疫影响的初步研究

用健康鸡盲肠的厌氧培养物制成的微生态制剂生态王，用不同途径给刚出壳2日龄的雏鸡饲喂，再用致病性大肠杆菌及沙门氏杆菌给鸡攻毒。结果表明，试验鸡无论是口服还是饮水摄入生态王，都能明显提高对致病菌的抵抗力。雏鸡无论是从2日龄还是从7日龄开始用该制剂，都有明显效果，但日龄越小效果越明显。此外，微生态制剂对疫苗的免疫有显著的增强作用。     

常规动物用活疫苗冻干保护剂的改良初探

目前国内动物用活疫苗仍然以5%蔗糖脱脂奶作为冻干保护剂,其冻干外型稳定,易溶性良好,成本低廉,但其耐热性能差,对病毒的保护作用较差。本试验以鸡新城疫Lasota冻干活疫苗为例,分别以不同浓度的海藻糖取代蔗糖,进行冻干保护性试验,结果表明海藻糖在2%以上时,对病毒的保护效果明显优于5%蔗糖脱脂奶组,证明其具有很好的应用前景。     

检测肠炎沙门氏菌ELISA方法的建立与应用研究

从已建立的抗沙门氏茵单抗中筛选出适用于肠炎沙门氏菌ELISA检验的3—47—26单抗．采用筛选强阳性杂交瘤细胞株制备了高效价的3—47—26单抗．改进用辣根过氧化物酶标记高效价单抗的方法，进行了HRP标记单抗的免疫生物学特性的鉴定。确定了包被浓度和酶标抗体的工作浓度：HRP-3—47—26为1：100；LPS的包被浓度为400ng／mL。试验中采用LPS与多聚赖氨酸的结合，解决了包被过程中的解吸附作用，增强了包被的稳定性，同时也减少了假阳性反应，优化了包被过程。建立了检测肠炎沙门氏菌的抗原竞争ELISA方法，利用样品中的LPS抑制酶标抗体与包被的LPS结合，以降低底物反应的颜色从而达到检测的目的。通过对210份肠炎沙门氏菌感染鸡泄殖腔棉拭子、羽毛和组织样品先筛选后鉴定的方法进行检测具有明显的抑制作用，通过与国标法对大量的样品检测结果比较表明，竞争ELISA方法的检出率为18．09％；检出阳性样品36份，国标法检出率为17．14％；两者符合率为97．14％。竞争ELISA敏感性和特异性分别为94．4％和97．7‰从而为肠炎沙门氏菌的检测提供了一种敏感、特异的检测方法。     

禽流感(H5、H9亚型)二价油乳剂灭活疫苗试验研究

本品系用A型禽流感病毒A／Ostrich／Denmark／72420／96(LPAI-H5N2)株及A／Chicken／Shanghai／1／98(H9N2)株分别接种易感鸡胚、收获感染胚液、超滤浓缩后经甲醛溶液灭活，加油佐剂混合乳化制成的油乳剂灭活疫苗。疫苗用4周龄SPF鸡作安全试验，每只鸡肌肉注射2ml，结果表明试验鸡均无全身症状和局部病变，证明疫苗安全性良好。取疫苗一羽份免疫4周龄SPF鸡作效力检验，免疫鸡全部获得保护，对照鸡全部感染或死亡。经不同免疫剂量测定，证明一羽份疫苗中至少含有8个免疫剂量。免疫干扰试验证明两种抗原具有免疫协同作用。     

“十一五”禽病发展态势及对我国蛋鸡生产的影响

<正> 一、新的鸡病/老病新表现1 鸡新城疫在我国目前流行的新城疫优势毒株为基因Ⅶ型。目前鸡新城疫主要有两个发病高峰期,即产蛋高峰前后(180～350日龄)和雏鸡阶段(20～40日龄)。产蛋高峰前后鸡群多为非典型新城疫,主要表现为发病初期出现轻微呼吸道症状(以呼噜为主),2～3天后鸡群采食量逐渐下降,产蛋率出现波动,4～5天后,采食量和产蛋率迅速下降。一般采食量下降为10%～30%,产蛋率下降幅度为30%左右。回升期很长,一般需要1～2个月。产蛋下降时,褪色蛋、薄壳蛋增多,产蛋恢复期。小蛋、畸形蛋增多。锥鸡(20～40日龄)多为典型新城疫,主要表现为发病早期就出现头颈摇摆、震颤、头点地等神经症状,病鸡精神差,死亡快,死亡率高,有时高达60%以     

通过检测血清中的病毒载量评估不同圆环病毒疫苗对母猪的免疫效果

为了给规模化猪场圆环病毒2型(PCV2)的感染和疫苗评价提供科学合理的评判标准,本研究建立了一套成熟敏感的real-time PCR检测方法,通过检测母猪免疫前后血液中病毒载量变化,来评价不同类型圆环病毒疫苗的免疫效果。结果显示:4个厂家疫苗对降低病毒载量的效果差异很大,其中原核表达的PCV2疫苗效果最佳,降幅比例为97.78%,离散度为49.8。此外,PCV2疫苗免疫能够降低猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的抗体水平,有助于猪场PRRS疫情的控制。以上试验证明:PCV2病毒载量的降低是控制PCV2感染的关键;抗体水平不能作为疫苗的评价标准;不同厂家的PCV2疫苗效果存在很大差异。