鸡传染性法氏囊病免疫增强剂的研究

鸡传染性法氏囊病流行至今,尚未能有效地控制其流行,主要原因是现有的大部分疫苗抗原性差,群体免疫时个体之间应答反应不均衡,近年来不断出现的超强病毒株。为此,我们经三年来的筛选试验,选出3个免疫增强剂配方,经现场5472只鸡的试验,试验组琼扩抗体效价均值为1：1024,与对照组相比差异极显著（P〈0．01,提高琼扩效价4个滴度）。用该免疫增强剂,可产生出高效价（10Log2）的法氏囊病的抗体,群体免疫应答反应均衡,达到了研究的目的。现将研究结果报告如下：     

猪腹泻病毒一步法多重TaqMan荧光定量RT-PCR检测法的建立及应用

【目的】建立一种可同时检测猪流行性腹泻病毒（PEDV）野毒株、猪A群轮状病毒（GARV）、猪德尔塔冠状病毒（PDCoV）、猪阿尔法冠状病毒（SADS-CoV）及猪捷申病毒（PTV）5种猪腹泻病毒的一步法多重TaqMan荧光定量RT-PCR检测法。为猪腹泻病的快速诊断和流行病学调查提供高效灵敏的工具。【方法】对 PEDV 多个基因型毒株ORF3基因比对分析,以PEDV野毒株为模板,对疫苗株ORF3基因稳定缺失区域设计特异性探针,并在两端保守区域设计上下游引物;在靠近GARV G3、G4、G5和G9型 NSP5基因5′端保守碱基区域设计引物及探针,并加入简并碱基。同时,分别选择PDCoV M基因、PTV 5′UTR序列、SADS-CoV N基因等保守基因设计特异性引物及探针,用于多重荧光定量PCR方法的建立。对引物、探针浓度和退火温度进行优化;用RStudio参照代码绘制ROC曲线,确定检测方法的敏感度值、特异度值及曲线下面积AUC,并计算Youden指数,最终确定检测临界值;从阳性核酸中扩增靶基因,并克隆至pEASY-T1载体。通过体外转录,获得5种标准品分别命名为：cRNA-PEDV、cRNA-GARV、cRNA-PDCoV、cRNA-PTV和cRNA-SADS-CoV。对检测方法的敏感性、特异性和重复性等进行评估;并与同类方法对临床样本的检测符合率进行比较。【结果】得到了5种病原检测的最佳引物、探针浓度和最佳退火温度。根据ROC曲线确定PEDV、GARV、PDCoV、PTV和SADS-CoV临界CT值分别为：35.78、34.25、34.98、34.60和35.70;5种病原的检测下限均可达到1×10² copies/μL,标准曲线线性关系良好,扩增效率在96.3%—104%之间;该方法对PEDV CV777疫苗株、PEDV AJ1102疫苗株、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪伪狂犬病毒（PRV）、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）、猪霍乱沙门氏菌（S.choleraesuis）、多杀性巴氏杆菌（P.multocida）、大肠杆菌（E.coli）、猪链球菌（S.suis）和葡萄球菌（S.aureus）等多种菌毒株均不检出,具有良好的特异性;经重复性检验,组内变异系数在0.22%—3.08%之间,组间变异系数在0.89%—4.0%之间;对242份临床样本检测并与同类方法的检测结果进行比较,符合率分别为：PEDV 97.9%、GARV 98.8%、PDCoV 100%、PTV98.3%和SADS-CoV100%,Kappa值均大于0.9。对PEDV野毒株的检测准确性高于同类方法。此外,对临床样本检测结果显示,当前四川省腹泻猪群中尚无SADS-COV检出;但PEDV、GARV、PDCoV和PTV仍持续流行,其总体阳性率分别达到：10.7%（26/242）、13.6%（33/242）、18.2%（44/242）和14.5%（35/242）,且各腹泻病原之间存在不同形式和程度的混合感染,使感染猪腹泻病情加剧。故需进一步加强几种猪腹泻病毒在本地区猪群中流行情况调查和遗传变异规律研究,为制定更具针对性的防控措施提供依据。【结论】本研究成功建立了一种同时检测PEDV野毒、PDCoV、SADS-CoV和 GARV、PTV多基因型的一步法多重TaqMan荧光定量RT-PCR,为猪腹泻病的快速鉴别诊断和流行病学调查提供了一种高效灵敏的工具。     

欧盟农村发展政策体系演变及对中国乡村振兴的经验借鉴

中国现代化建设最薄弱的环节在农村,如何通过乡村振兴战略推进中国农村发展是"三农"面临的重要问题。欧盟乡村建设起步较早,通过阶段性改革积累了丰富经验,对推动中国乡村振兴有很好的借鉴。从政策目标、运行机制、资金预算、政策体系4个维度探究了欧盟农村发展政策体系的演进逻辑及特点,对比分析了中国乡村振兴的约束条件,总结了欧盟农村政策的改革经验及难点,并提出了推进中国乡村振兴的对策建议。     

SarA调控金黄色葡萄球菌生物被膜形成的研究进展

金黄色葡萄球菌生物被膜的形成是一个多基因和多因子共同调控的过程。葡萄球菌属辅助调节子SarA是金黄色葡萄球菌主要的毒力基因表达调控系统,能直接或间接调控多种生物被膜形成相关基因的表达。本文将对SarA的结构及其调控生物被膜形成的机制作一综述,为深入研究金黄色葡萄球菌的致病机理和开发新的抗生物膜感染策略提供参考。     

广东省H1和H3亚型猪流感病毒抗体血清学调查

为了解广东省规模化猪场H1和H3亚型猪流感病毒的流行情况,采用ELISA检测方法对采集于广东省14个市的28个规模化猪场的1 015份猪血清进行H1亚型和H3亚型猪流感病毒的抗体检测。结果表明,H1亚型抗体总阳性率为40.9%,猪场阳性率高达92.9%(26/28);H3亚型抗体总阳性率为16.8%,猪场阳性率为78.6%(22/28)。其中粤西和珠三角地区H1亚型抗体阳性率分别为49.6%和45.4%,H3亚型抗体阳性率分别为14%和20.8%;而粤东和粤北地区H1亚型抗体阳性率分别为2.7%和12%,H3亚型抗体阳性率分别为6.3%和0。说明在广东省被调查的猪场中,H1和H3猪流感病毒的感染较为普遍,其中H1型感染率高于H3型。广东省SIV流行情况存在明显的地域性差异。     

贵州新农村建设中的民生科技发展模式研究

社会主义新农村建设的目的是让广大农村居民享受到改革发展的成果,实现生存环境的改善和生活质量的提高。民生科技是最贴近百姓生活、直接服务于人的科技。文章分析了民生科技对新农村建设的支撑作用;归纳了发达国家民生科技的发展模式;探讨了贵州新农村建设中民生科技发展模式。认为贵州新农村建设中民生科技的发展离不开政府的政策导向和推动、提高全民创新意识和创新能力、加强科技管理体制的改革。     

利桃村社区发展基金管理模式探讨

针对望谟县利桃村社区发展基金的产生原因及其基本运作模式,总结了发展基金的主要效果和存在的问题,分析了农村社区发展基金管理模式的成功因素,对社区发展基金存在的主要问题进行了探讨.     

深化三农金融服务助推县域经济转型升级--专访中国农业银行湖北省分行行长朱正罡

“让金融成为一池活水,更好地浇灌小微企业、‘三农’等实体经济之树。”这是李克强总理在今年政府工作报告中对深化金融体制改革的生动表述。湖北是农业大省,三农地位举足轻重,是湖北中部崛起战略支点的重要基石。农业银行作为国有大型银行,要如何发挥自身优势,服务三农,服务地方经济？近期,记者对农业银行湖北省分行行长朱正罡进行了专访.     

车前子提取物对大肠杆菌耐药抑制作用初步研究

为了对车前子提取物耐药抑制作用进行研究,采用棋盘法测定车前子乙醇提取物与环丙沙星的联合作用,二者联合应用对大肠杆菌耐药菌株具有较好的抗菌作用。通过环丙沙星蓄积动力学试验检测车前子乙醇提取物对鸡源大肠杆菌外排泵的影响,结果表明,车前子乙醇提取物能增加环丙沙星在细胞内的蓄积量,抑制耐药大肠杆菌对抗生素的主动外排作用。三氯甲烷萃取物对大肠杆菌的药物外排具有一定的抑制作用,但其抑制作用不如乙醇提取物。