大肠杆菌K88ac-ST1-LTB三价基因工程菌株的构建

利用PCR技术,从大肠杆菌C83902质粒中扩增出K88ac基因、ST1突变基因和LTB基因,通过分离、纯化、内切酶酶切、连接和转化,构建了含K88ac-ST1-LTB融合基因表达载体的重组菌株BL21(DE3)(pXKST3LT5).经酶切鉴定和DNA序列分析证实,构建的重组质粒pXKST3LT5中含有K88ac-ST1LTB融合基因,且基因序列和阅读框架均正确.免疫试验结果表明,K88ac-ST1-LTB融合蛋白能够诱发机体产生抗体,该抗体具有中和天然ST1肠毒素毒性的作用.用从IPTG诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原免疫小鼠,结果免疫小鼠至少能抵抗2 MLD的大肠杆菌强毒株C83902(K88ac,ST+,LT+)的攻击.由此表明,构建的工程菌株BL21(DE3)(pXKST3LT5)可以作为预防幼畜大肠杆菌性腹泻的基因工程菌苗的候选株.     

L1免疫刺激剂增强鸡新城疫免疫效果的研究

自行研制的Ｌ１免疫刺激剂与鸡新城疫疫苗同时应用后，可显著地提高机体细胞免疫和体液免疫功能，增强疫苗的免疫效果。应用Ｌ１免疫刺激制组，红细胞、吞噬指数、Ｔ淋巴细胞、血清γ球蛋白都有增加、与对照组比较，差异显著。但血红蛋白、白细胞总数、血清α、β蛋白差异不显著。     

PPA-ELISA与常规方法诊断奶牛结核病的比较研究

应用Mycobacterum bovis SAg_2抗原的PPA—ELISA检测了32例奶牛血清样本,其中20例呈阳性反应,12例阴性反应。应用牛PPD变态反应检查这20例ELISA阳性奶牛,全部呈阳性反应,另12例则为阴性反应。病理学检查,20例中18例发现结核病理变化,细菌学检查,其中17例呈阳性反应,另12例阴性奶牛,经病理学,细菌学检查,全部阴性。     

水貂β溶血性链球菌MS_2菌珠对常用化学消毒药的敏感性研究

本文报告了水貂溶血性链球菌MSZ菌株,对常用化学消毒药2～3％氢氧化钠、1～2％福尔马林、0.1％升汞、0.1％新洁尔灭敏感,而对2％来苏尔、0.1％高锰酸钾等不敏感,从而为生产单位用消毒药来预防和控制水貂链球菌病提供了科学依据。     

鹅源副黏病毒HN基因真核表达质粒的构建及基因疫苗的研究

本试验通过FCR技术从pGEM-HN质粒中扩增出了HR基因，构建了真核表达质粒pcDNA3-HN。真核表达质粒pcDNA3-HN肌肉注射免疫鸡后，HI血清抗体效价较空白对照组高，攻毒后鸡发病、死亡均少于空白对照组，有27%-36％的鸡耐过。但血清抗体效价较灭活苗组低，发病率和死亡率较灭活苗组高。试验结果表明HN基因在鸡体内，得到了表达，并使鸡获得了一定的免疫力，但保护作用不及鹅副黏病毒油乳剂灭活苗。     

猪细小病毒分子生物学与核酸探针的研究进展

猪细小病毒( Porci ne parvovi rus,PPV) 是引起猪繁殖障碍的主要病原之一,近年来PPV感染呈扩大上升趋势,给养猪业造成了巨大的经济损失。各国的研究者加强了PPV基因组结构和蛋白质的研究。随着分子生物学的发展,核酸探针以其敏感性和特异性成为快速诊断PPV的一种方法。     

牛朊蛋白27-30基因的克隆与表达

利用PCR技术，从含有牛朊蛋白（Prion protein，PrP）基因Prnp的开放阅读框的克隆质粒BoPrnp—T中扩增出约420bp的目的基因（PrP猢基因）。将PrP^27-30基因和载体pPIC9K分别用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和NotⅠ进行双酶切，T4DNA连接酶作用后，转化至E．coli JM109中，构建重组表达载体pPIC9K-boPrP^27-30。pPIC9K-boPrP^27-30经限制性核酸内切酶SalⅠ线性化后电转至毕赤酵母GS115中，经G418筛选后得到高拷贝的重组菌株GS115／pPIC9K-boPrP^27-30。GS115／pPIC9K-boPrP^27-30经1．0％甲醇诱导后，表达产物用SDS-PAGE和Western blot分析，结果表明牛PrP^27-30基因在毕赤酵母细胞中获得表达，表达产物的分子量约为27Ku，能够被单克隆抗体SAF-70识别。     

禽流感研究进展

禽流感(Avian Influenza,AI)是由A型流感病毒引起的、发生于各种家禽和野禽的病毒性传染病,有多种表现形式。过去一直用欧洲鸡瘟或真性鸡瘟来描述这种致死率极高的急性出血性疾病,1981年在美     

嗜肾型鸡传染性支气管炎W93株活疫苗的研究及其S1基因的克隆与序列测定

利用鸡胚分离法由发生肾病变型传染性支气管炎(IB)的病鸡分离到嗜肾型传染性支气管炎病毒(NIBV)W株；再通过SPF鸡胚连续传代，获得了NIBV疫苗毒株W93；继而借助RT—PCR法扩增了其S1基因，并测定了S1基因的核苷酸序列，分析了与相关毒株间的同源性。结果显示，W93株在鸡胚中的病毒产量达107.8EID50／0.1mL，适用于所有日龄的雏鸡；W93S1基因的核苷酸序列与马萨诸塞型的M41株、H52株和H120株的同源性很高，分别为96．9％、96．8％和97．1％。表明，W93可作为制备IB弱毒疫苗的毒株。     

猪瘟免疫失败原因概述

针对近年我国时常发生的猪瘟免疫失败现象，从疫苗，对疫苗的使用方法，猪瘟病毒本身变异以及免疫程序免疫方法等几方面对发生免疫失败的原因进行分析。并对免疫失败的防制措施提出一些看法。