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101.
[目的] 克隆瑶山亚种树鼩干扰素刺激基因15(interferon stimulating gene 15,ISG15)基因,在大肠杆菌中高效表达并纯化、制备多克隆抗体,为其生物学应用及检测方法的建立奠定基础。[方法] 提取瑶山亚种树鼩外周淋巴细胞总RNA,经RT-PCR扩增出ISG15基因,亚克隆到真核表达载体构建重组真核表达质粒pcDNA3.1-ISG15,并瞬时转染仓鼠肾细胞(baby hamster syrian kidney,BHK-21);同时亚克隆到原核表达载体pET-28a(+)构建重组表达质粒pET-28a-ISG15,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达树鼩ISG15蛋白;重组蛋白经镍离子亲和层析法纯化并免疫小鼠,获得鼠抗树鼩ISG15多克隆抗体,利用Western blotting和间接免疫荧光技术(IFA)检测其反应性。[结果] 成功克隆瑶山亚种树鼩ISG15基因,并构建了其真核和原核表达载体,真核表达载体在BHK-21细胞中能高效表达;原核表达载体在大肠杆菌中30 ℃、0.5 mmol/L IPTG诱导6 h获得重组蛋白(分子质量22 ku),蛋白以包涵体形式表达,经镍离子亲和层析法得到纯化。乳化后的重组蛋白免疫小鼠,获得抗瑶山亚种树鼩ISG15的多克隆抗体,经Western blotting检测,制备的鼠抗树鼩ISG15多克隆抗体稀释度在1:8 000时仍能够与0.01 μg ISG15重组蛋白结合。IFA检测发现,多克隆抗体能与真核细胞过表达的蛋白反应,抗体反应性良好。[结论] 构建的原核表达载体在大肠杆菌中高效表达瑶山亚种树鼩ISG15蛋白,重组蛋白纯化复性后具有良好免疫原性,获得的多克隆抗体为进一步研究树鼩抗病毒感染免疫奠定了良好基础。 相似文献
102.
选择18月龄初产努比亚母羊40只及对应羔羊44只随机分为2组,母羊在饲喂新鲜牧草+全株玉米青贮的基础上分别补饲精料补充料400g(试验Ⅰ组)和200 g(试验Ⅱ组),试验期进行母羊及羔羊体重、母羊体况(BCS)测定。结果表明:试验期间Ⅰ组母羊体重均显著大于Ⅱ组(P<0.05);母羊泌乳期BCS和体重变化趋势一致,75 d时两组间存在显著差异(P<0.05)。Ⅰ组和Ⅱ组羔羊在0~15日龄时长势几乎相同,自15日龄后,Ⅰ组羔羊增重显著高于Ⅱ组羔羊(P<0.05或P<0.01)。 相似文献
103.
104.
借助同余和关系同态,证明了以下3条性质在完全正则半群S= (Y;Sα)上等价:?S是正则密码群并半群;
? ?a∈S,等价关系ρa = {(x,y)∈S×S :(axa)0 = (aya)0}是S上的同余;? ?α,β∈Y,α≥β,存在关系
同态Φα,β:Sα
ρα,
→
β 2Sβ ,使得 ?a∈Sα,b∈Sβ,有ab = (aΦb
α,β)b,且ba =b(aΦb
α,β). 相似文献
105.
106.
107.
108.
109.
研究播期和种植密度对油葵生长发育及产量的影响,可以为油葵优质高产栽培时播期和密度的选择提供科学依据.以油用型向日葵YK18-1为试材,采用二因素(播期、种植密度)裂区试验设计,其中播期(主因素)设5月15日、5月30日、6月14日和7月1日4个水平,种植密度(副因素)设8.3万、6.7万、5.6万、4.8万、4.2万和3.7万株/hm2计6个水平,在行距60 cm条件下研究了不同播期和密度处理对向日葵生育性状、品质和产量的影响.结果表明:播期推迟会导致向日葵各生育期均缩短,其中出苗到开花阶段历经时间受播期影响较大,开花到成熟阶段历经时间受播期影响较小.播期对籽仁粗脂肪含量、结实率、单盘粒重和产量具有极显著影响;种植密度对籽仁率具有极显著影响;播期×种植密度对油葵品质和产量指标影响均不显著.不同的播期与种植密度组合除百粒重差异不显著外,其他指标均存在显著差异,但各指标达到最高值的播期与种植密度组合不同.综合油葵品质和产量指标分析认为,播期5月30日、种植密度8.3万株/hm2组合效果最好.该处理下,产量最高,达到1888.89 kg/hm2,籽仁粗脂肪含量为59.54%. 相似文献
110.
选用40头28日龄断奶约滇陆(YN1)杂交仔猪进行为期5周的试验,试验仔猪随机分为5个组(锌添加量分别为80,240,1000,3000和5000mg/kg),研究锌对断奶仔猪生产性能、免疫器官生长发育及组织锌沉积的影响。结果表明:适量高锌(1000mg/kg和3000mg/kg)能显著提高仔猪生产性能(P〈0.05):补锌对免疫器官指数无影响(P〉0.05):高锌增加肝脏、肾脏、趾骨、血清和毛发中锌含量(P〈0.01):而背最长肌、扁桃体和胸腺锌含量则只有在添加5000mg/kg日粮锌时含量显著上升(P〈0.05)。脾脏锌含量则随着高锌的添加变化差异不显著(P〉0.05)。低锌添加(80mg/kg和240mg/kg)对机体各组织中锌含量无显著影响(P〉0.05)。 相似文献