中国主要地方绵羊品种遗传共适应的检测及其与近缘物种山羊的比较

【目的】探讨用于遗传共适应分析的合适组合座位模型,为遗传共适应理论增添关于绵羊品种间及与近缘物种山羊间遗传共适应进化机制差异比较的研究内容。【方法】以中国主要地方绵羊品种湖羊、同羊、小尾寒羊、滩羊和洼地绵羊为研究对象,以近缘物种山羊作为对照群体,选择多态程度不同的9个结构基因座。【结果】(1)"显隐性-显隐性"模型不适合遗传共适应的分析;"共显性-显隐性"和"共显性-共显性"模型可用于遗传共适应的分析。(2)对于与具有过多稀有等位基因的Tf座位组合的座位间的遗传不平衡的原因,经典的中性遗传不平衡原理并不能给出合理的解释或解释的原因前后不一致。(3)不同物种、不同品种的遗传共适应系数、遗传不平衡系数以及连锁不平衡系数与座位的组合有关。【结论】(1)在"显隐性-显隐性"组合不存在遗传共适应现象,而在"共显性-显隐性"模型和"共显性-共显性"模型中有可能发现存在遗传共适应现象。(2)由于起源不同,绵羊与山羊间遗传共适应存在较大差异,而绵羊物种内不同品种间由于起源相同,在遗传共适应上差异不大,有趋向一致的倾向。(3)本文首次拟合得到的不同座位组合模型的遗传共适应系数与遗传不平衡系数的回归方程,对于探讨遗传共适应的作用机理与计算具有一定的借鉴意义。     

干细胞治疗1型糖尿病研究进展

1型糖尿病是一种具有遗传倾向的慢性病。该类型糖尿病是由胰岛β细胞受到自身免疫的攻击产生不可逆破坏所致,属于胰岛素依赖性糖尿病。传统的治疗方法有胰岛素注射治疗和胰腺胰岛移植等。近几年随着干细胞研究的发展,诱导干细胞分化形成可分泌胰岛素的类β细胞的技术日渐完善,这为治疗1型糖尿病提供了新的技术支持。文章阐述了1型糖尿病的发病机制及干细胞应用于糖尿病治疗的研究进展。     

胎牛视网膜干细胞向神经细胞诱导研究

旨在研究胎牛视网膜干细胞(Retinal stem cells,RSCs)的分离、培养、鉴定及向不同类型细胞诱导分化等的生物学特性。采用机械吹打法从胎牛眼睫状体部细胞中分离RSCs,通过免疫荧光方法鉴定RSCs标志物Nestin、Pax-6和Chx-10,并诱导其向星形胶质细胞、神经元及少突胶质细胞诱导分化,检测其多向分化潜能。结果表明,机械吹打法获得的胎牛RSCs不仅表达干细胞特有的标志,而且成功诱导分化为星形胶质细胞、神经元及少突胶质细胞。综上表明,胎牛RSCs具有良好的体外增殖能力和多向分化潜能。为今后视网膜干细胞的研究提供相应的理论依据。     

会理黑山羊血液生化指标的测定

实验旨在研究会理黑山羊的血液生化指标,选择了30只（11♂,19♀）会理黑山羊,测定了其9项血液生化指标。结果表明：会理黑山羊的各项生化指标在公母羊间差异不显著（P〉0.05）,均在我国山羊正常血液生化指标范围内,而总蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三酯和胆固醇与其他品种的山羊存在一定的差异。实验为会理黑山羊的血液生化指标常值、疾病治疗、饲养管理和选育方案的制订提供了参考。     

鸡小肠上皮干细胞的分离培养

为建立鸡小肠上皮干细胞（Intestinal epithelial stem cells，IECs）体外培养体系并对其进行生物学特性研究，取18日龄鸡胚，分离小肠获得IECs，在DMEM/F12培养基中培养并观察其形态。通过传代及生长曲线的绘制分析其增殖情况，并经形态学观察及细胞免疫组织化学、RT-PCR等方法对所得到的纯化后的鸡小肠上皮干细胞进行鉴定。结果表明，鸡IECs可在体外扩增培养，目前传代至P11，纯化所得的鸡小肠上皮细胞经形态学观察及免疫荧光、RT-PCR法鉴定为阳性，由此可得出结论：鸡小肠组织中可以分离出IECs，且能够在体外增殖培养。     

不同哺乳动物卵母细胞孤雌激活的研究进展

卵母细胞孤雌激活是核移植的关键技术之一，卵母细胞激活率的高低直接影响核移植的效率。作者主要对卵母细胞孤雌激活的机制、激活途径及不同哺乳动物卵母细胞孤雌激活进行概括性的分析。     

中国斗鸡高分子质量DNA的高效制备

采集斗鸡翅静脉血液,加ACD抗凝,离心收集血细胞,经细胞计数后,用低融点琼脂糖包埋血细胞,蛋白酶K消化,经脉冲电泳分离,获得了较纯净的720 kb以上的DNA.对大片段DNA进行限制性酶切,回收特定大小的DNA片段.利用该方法制备的高分子质量DNA,经酶切、回收的特定大小DNA片段可用于后续细菌人工染色体(BAC)文库的构建和基因组分析.     

湖羊GHR和IGF-Ⅰ基因表达的发育性变化 及其与肉质性状的关联

 【目的】探讨生长激素受体（growth hormone receptor,GHR）和胰岛素样生长因子-Ⅰ（insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ）基因在湖羊不同生长阶段背最长肌中表达丰度与肉质性能的相关性以及这两个基因表达水平的关联性,为湖羊肌肉生长性状的选育提供遗传学资料。【方法】利用荧光定量RT-PCR分析GHR和IGF-Ⅰ基因在湖羊早期生长背最长肌肉组织中的mRNA的发育性变化。【结果】①出生后随着月龄的增加,母羊GHR基因在背最长肌的表达趋势为：先升高后降低再升高再降低最后再升高,最后6月龄到达最高点;公羊GHR在背最长肌的表达趋势为：先升高到2月龄到达一个峰值,2月龄到4月龄为一个降低的过程,4月龄到6月龄又升高,并到达最高点;母羊IGF-Ⅰ基因在背最长肌的表达趋势为：由2日龄开始依次升高最后于6月龄到达最高点;公羊IGF-Ⅰ基因在背最长肌的表达趋势为：先升高到1月龄到达一个峰值,1月龄到3月龄为一个降低的过程,并于3月龄降至与初生接近相等的水平,此后随月龄增加逐渐升高,并于6月龄到达最高点;②GHR和IGF-Ⅰ基因在湖羊各月龄间大多存在显著或极显著差异,湖羊的公羊和母羊的GHR和IGF-Ⅰ基因的相同生长阶段的表达也大多存在显著或极显著差异;③GHR和IGF-Ⅰ基因的表达存在显著正相关（0.01＜P＜0.05）,GHRI和GF-I基因与肌纤维直径均存在极显著正相关（P＜0.01）,GHR与肌纤剪切力存在极显著正相关（P＜0.01）,IGF-Ⅰ与肌纤剪切力存在显著正相关（0.01＜P＜0.05）,GHR和IGF-Ⅰ基因与肌纤维密度均存在极显著负相关（P＜0.01）。【结论】性别和年龄对于GHR和IGF-Ⅰ基因在湖羊不同生长阶段的肌肉中的表达具有重要影响;出生后,各基因表达水平并非随之上升或者下降,各基因表达水平出现拐点的时间并不相同;GHR和IGF-Ⅰ基因在湖羊早期肌肉性状的表达为显著正相关,可以作为湖羊早期肉质性状的候选基因。     

脂质体介导转染法原理及其研究进展

脂质体也称人工细胞膜,是由脂质双分子层组成的,磷脂分子在水中可自动生成闭合的双层膜,从而形成一种囊状物被称为脂质小体.最初人们只是运用脂质体模拟膜的构造及功能,从而发现了膜的融合及内吞作用.最早证明脂质体能把DNA十分有效地引入动物细胞的实验是从鼠/人杂种细胞系(HGPRT-)中分离出的中期染色体包裹到脂质体中,并用以转染HGPRT-的细胞,结果转化率比裸露染色体高十多倍,而且转化子能稳定地表达HGPRT-的活性.脂质体法具有很多优点,操作简便,转化效率比较高,可以用于瞬时转染,也可以用在永久表达系的建立,对细胞类型的运用面广,对转染的核酸类型和分子量有很高的包容性,细胞毒性小,也可以用于体内的基因转染.因此脂质体转染法得到了越来越广泛的应用.     

牛超数排卵影响因素分析

高效、稳定的超数排卵方法是获得充足卵源，充分发挥胚胎移植实际应用效果，扩大优良母畜繁殖速度的技术支撑和保障。长期以来，对于牛超数排卵影响因素的研究一直是生殖生物学家关注的热门课题之一。因此本文在查阅大量相关文献资料、总结实验经验和综合分析的基础上，紧密结合胚胎工程研究与应用过程中的实际需要，就环境条件、个体情况和超排处理方法对超排效果的影响因素等关键技术环节进行了概括性的论述，为建立牛超数排卵的科学体系奠定基础。