绵羊肌肉IGF-Ⅰ基因表达的发育性变化研究

[Objective] To detect the mRNA of muscle insulin-like growth factorⅠ (IGF-Ⅰ) in the early development of Kazak sheep and Xinjiang fine-wool sheep, so as to provide information for the research about the early growth and development of sheep. [Method] With real-time quantitative PCR, the muscle IGF-Ⅰ mRNA level was separately detected in two varieties of sheep at 2, 30, 60, 90 and 120 days old. Then the data was analyzed with SPSS software. [Result] The IGF-Ⅰ mRNA in sheep muscle first increased and then decreased with ages, peaking at 30 days old in Kazak sheep and at 60 days old in Xinjiang fine-wool sheep. The IGF-Ⅰ expression level of Kazak sheep had no significant difference with Xinjiang fine-wool sheep at 2 or 90 days old (P>0.05), but was lower than that of the latter with extremely significant difference (P<0.01) from 30 to 60 days old. [Conclusion] The male Kazak sheep and Xinjiang fine-wool sheep have similar model of developmental changes of muscular IGF-Ⅰ mRNA, but the expression level is different between these two species.     

小尾寒羊GHR、GHRH、GHRHR基因多态性与肉质性状的关联分析

主要分析GHR、GHRH、GHRHR基因的多态性,以及其与小尾寒羊肉质性状的关联,以期为优质绵羊新品种培育提供一定的参考依据。采用PCR技术,检测小尾寒羊群体中GHR、GHRH和GHRHR基因的多态性,利用SPSS软件分析以上3种基因的不同基因型与肉质性状的关联性。结果表明,GHR与GHRHR共有3种基因型,分别为II、ID、DD,而GHRH基因仅检测到2种基因型,分别为II、DD。GHR基因中II基因型频率最高,为0.625,ID的基因型频率为0.313,DD的基因型频率最低,为0.063;多态信息含量(PIC)为0.283,处于中度多态性(0.25≤PIC<0.50);小尾寒羊GHR基因的DD基因型肉质的色泽显著低于ID、II基因型(P<0.05)。GHRHR基因中II基因型频率最高,为0.687 5,DD基因型频率最低,为0.062 5,ID基因型频率为0.2500;多态信息含量为0.258,处于中度多态性(0.25≤PIC<0.50);GHRHR基因的DD基因型的剪切力显著高于ID、II基因型(P<0.05)。GHRH基因中DD基因型频率最低,为0.43...     

湖羊Myostain 和Myogenin基因表达的发育性变化及与屠宰性状的关联分析

 【目的】探讨湖羊肌肉生长抑制素(myostain,MSTN)和生肌调节因子(myogenin, MyoG)基因表达的发育性变化及其与屠宰性状的相关性以及这两个基因表达水平的关联性。【方法】利用RT-PCR分析MSTN和MyoG基因在湖羊早期生长背最长肌肉组织中的mRNA的发育性变化。【结果】湖羊MSTN基因在肌肉中的表达在2日龄时表达水平最低,并随着日龄增加而增加直到60日龄为止,而后随着年龄增加而下降。湖羊MyoG基因在2日龄时表达最低,在30日龄之前随着日龄的增加而增加,然后在30日龄后下降,公羊直到120日龄、母羊直到90日龄为止,然后随着日龄的增加而又增加。MSTN和MyoG基因在湖羊各生长阶段间大多存在显著或极显著差异。湖羊公羊与母羊MSTN和MyoG基因之间在各相同生长阶段间大多存在显著或极显著差异。MSTN和MyoG基因表达水平与宰前活重、胴体重和净肉重均呈正相关,但只有MSTN和净肉重呈显著正相关(0.01＜P＜0.05),MSTN基因和MyoG基因的表达存在极显著正相关(P＜0.01)。【结论】 性别和年龄对于MSTN和MyoG基因在湖羊肌肉中的表达具有重要影响。MSTN、MyoG基因在不同生长阶段的公羊和母羊中的表达模式相似。MSTN和MyoG基因在湖羊不同生长阶段的肌肉中的表达均没有出现随着日龄的增加而一直增加或下降的趋势。MSTN基因和MyoG基因在湖羊早期肌肉性状中的表达为正相关。     

生长抑素基因免疫对湖羊羔羊生长及GH和IGF-Ⅰ的影响

为探讨生长抑素DNA疫苗免疫湖羊的效果,将生长抑素(SS)与乙肝表面抗原(S)基因融合构建真核表达质粒pES/2SS,分别与pE-CpG质粒、细菌DNA、脂质体粗品配合及重新构建的pES/2SS-GMCSF免疫断奶母羔羊,4周后以相同剂量加强免疫1次。结果显示,免疫组的抗体水平高于对照组(P<0.05),首次免疫4周和加强免疫2周后,细菌DNA佐剂组的抗体水平高于生长抑素单独免疫组(P<0.05),其抗体阳性率也为各免疫组最高。全期免疫组抗生长抑素抗体阳性率达36.0%;免疫羊的增重比对照组高18.82%(P<0.01)。加强免疫后2周,免疫组的GH和IGF-Ⅰ水平显著高于对照组(P<0.05),抗体阳性羊的GH和IGF-Ⅰ水平显著高于抗体阴性羊(P<0.01)。分析第2、4、6和10周所检测的各免疫组湖羊生长抑素抗体P/N值、GH、IGF-Ⅰ及周增重之间的相关性,发现生长抑素抗体与GH、IGF-Ⅰ、周增重显著相关(P<0.01),周增重与生长抑素抗体(P<0.01)、GH(P<0.01)、IGF-Ⅰ(P<0.05)显著相关。结果表明:SS基因免疫产生SS抗体,有效中和了内源性SS,影响了相关激素的分泌,促进羔羊生长。     

湖羊IGF-Ⅰ和MyoG基因表达的发育性变化及其与屠宰性状的关联分析

以湖羊为研究对象,采用RT-PCR法对IGF-Ⅰ和MyoG在湖羊不同生长阶段背最长肌中的表达丰度及其与屠宰性状的相关性进行研究,以揭示湖羊肌肉生长性状的分子遗传学基础。结果表明:(1)随着年龄的增加,母羊IGF-Ⅰ在背最长肌中的表达趋势,由2日龄开始逐渐升高,并于6月龄达最高点;公羊IGF-Ⅰ在背最长肌中的表达趋势,先升高至1月龄时达一峰值,1~3月龄为一个降低的过程,且于3月龄降至与初生相近水平,此后随着年龄的逐渐增加,于6月龄达最高点。母羊MyoG在背最长肌中的表达趋势,先升高后降低再升高再降低最后再升高,并于6月龄达最高点;公羊MyoG在背最长肌的表达趋势,2日龄至1月龄处于上升过程,1~4月龄为下降过程,4~6月龄又逐渐上升,且于6月龄达最高点。IGF-Ⅰ和MyoG在湖羊各月龄间大多存在显著或极显著差异,公羊和母羊在相同生长阶段IGF-Ⅰ和MyoG的表达大多存在显著或极显著差异。(2)IGF-Ⅰ和MyoG表达呈极显著正相关,IGF-Ⅰ与宰前活重呈极显著正相关,与胴体重呈显著正相关,与净体重呈正相关。这一研究显示,IGF-Ⅰ和MyoG基因存在极显著正相关,受年龄的影响对湖羊早期肌肉生长发育具有重要的促进作用,且在湖羊早期肌肉生长发育过程中可能存在性别特异性。     

绵羊IGF-Ⅰ和IGF-Ⅰ R基因特征分析及其在肌肉组织中的表达差异

为了比较IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因在绵羊肌肉中的表达差异,根据GenBank公布的绵羊IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因mRNA序列设计特异性引物,采用实时定量PCR方法检测其在甘肃‘高山细毛羊’及其与南非肉用‘美利奴’杂交F1代(南甘F1代)羔羊肌肉组织中的表达量.利用生物信息学软件分析了绵羊IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因结构,并构建系统进化树,探讨了其生物学功能.结果表明:南甘F1代羔羊肌肉组织中IGF-Ⅰ基因的表达量显著高于‘甘肃高山细毛羊’(P0.05),而IGF-ⅠR基因的表达量在南甘F1代羔羊和‘甘肃高山细毛羊’肌肉组织中没有显著变化(P0.05).绵羊IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因分别含有465bp和4 518bp的完整开放阅读框,编码154个和1 505个氨基酸;其蛋白质分子量分别为17 011.71U和169 267.26U,等电点分别为9.36和6.70;IGF-Ⅰ基因信号肽切割点分别位于49~50位氨基酸之间,而IGF-ⅠR基因不含信号肽;IGF-Ⅰ基因编码产物的二级结构主要以无规则卷曲和α-螺旋为主,位于细胞核的可能性最高(62.5%);IGF-ⅠR基因编码产物的二级结构主要以无规则卷曲为主,位于细胞质的可能性最高(34.8%);IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因分别作为激素和信号传感器参与机体生物学过程.     

水貂GHR基因SNPs检测及其与生长性状的关联分析

为了检测水貂GHR基因多态性及其与生长性状的相关性分析,寻找可用于选育水貂生长性状的分子遗传标记,以同龄同场的短毛黑水貂、红眼白水貂和咖啡水貂为研究对象,采用PCR产物直接测序检测GHR基因的单核苷酸多态性,利用SPSS 19.0软件将该基因多态性与水貂生长性状进行关联分析.结果表明,存在3个SNPs位点,分别为外显子...     

陆川猪和大白猪IGF-Ⅰ基因对生长性状的效应分析

探讨陆川猪和大白猪IGF-Ⅰ基因多态性与生长性状的关系,以期为猪生产性状标记辅助选择候选基因提供理论依据.试验采用PCR-SSCP技术,在陆川猪和大白猪群中进行了IGF-Ⅰ基因的基因型频率检测及不同基因型的生长性状效应分析.结果表明,IGF-Ⅰ基因对陆川猪和大白猪的断奶重和平均日增重影响显著(P＜0.05),对初生重影响不显著(P＞0.05).     

小尾寒羊GHR和GHRHR基因多态性与生长性状的关联分析

为了解小尾寒羊的生长和发育的遗传机制,为小尾寒羊的品种选育做基础,本研究对GHR和GHRHR基因的多态性进行检测,并将其多态性与生长性状进行了关联分析。试验利用PCR-SSCP技术,检测GHR和GHRHR基因在小尾寒羊群体的多态性,利用SPSS软件分析GHRH基因的多态性与生长性状之间的关联性。结果表明,在小尾寒羊群体中检测到3种GHR和GHRHR基因基因型,即DD、II、ID,GHR基因和GHRHR基因中II的基因型频率分别为0.625 0、0.687 5,ID的基因型频率分别为0.3 130、0.2 500,DD的基因型频率为0.0 630、0.0 625。GHR基因个体中DD基因型个体和ID基因型个体在宰后胴体质量、臀端高、尻长、颈长、胸深这5个性状中均表现出显著差异(P<0.05);DD基因型个体和Ⅱ基因型个体在宰前活体质量、宰后胴体质量、臀端高、尻长、颈长这5个性状中均表现出显著差异(P<0.05)。GHRHR基因中,DD基因型个体和ID基因型个体在宰前活体质量、宰后胴体质量、体高、体长、尻高、颈长、腰角宽、腿臀围这8个性状中均表现出显著差异(P<0.05)...     

微生态制剂对湖羊营养物质消化率、屠宰性能和肉质性状的影响

试验旨在研究微生态制剂对湖羊营养物质消化率、屠宰性能和肉质的影响,为微生态制剂应用于羊生产提供科学依据。体重、年龄相近湖羊60只,随机分为4组(对照组、乳酸菌组、芽孢杆菌组、芽乳混菌组),每组3个重复,每个重复5只。对照组饲喂基础日粮,乳酸菌组、芽孢杆菌组、芽乳混菌组分别在基础日粮中添加600mg/kg的微生态制剂,并测定各试验组粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、干物质及无氮浸出物消化率,以及屠宰率、净肉率、胴体脂肪含量(GR值)、眼肌面积、肉色、大理石纹、p H值、剪切力、滴水损失、熟肉率等指标,分析微生态制剂对湖羊营养物质消化率、屠宰性能和肉质性状的影响。结果表明:营养物质消化率方面,芽乳混菌组粗蛋白和粗纤维消化率较乳酸菌组、芽孢杆菌组差异显著(P0.05),较对照组差异极显著(P0.01);屠宰性能方面,芽乳混菌组屠宰率、净肉率较乳酸菌组和芽孢杆菌组差异显著(P0.05),较对照组差异极显著(P0.01);肉质性状方面,乳酸菌组、芽孢杆菌组和芽乳混菌组大理石纹显著高于对照组(P0.05),初步推断,微生态制剂均能显著提高湖羊的营养物质消化率和屠宰性能,改善羊肉品质,且复合微生态制剂效果更好。     

新扬州鸡IGF-Ⅰ基因多态性的PCR-SSCP检测及其与生长发育性状的相关性

以新扬州鸡胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因作为控制其生长、发育性状的候选基因,通过对IGF-Ⅰ基因主要部分序列进行PCR-SSCP检测,发现了2个多态位点.测序结果表明,IGF-Ⅰ基因存在2个突变位点:插入(G)和(G→C).分析多态位点与0-12周龄鸡生长发育性状的关联性,结果表明:插入(G)突变基因型中,2周龄鸡体重BB型与AB型差异显著(P<0.05),但AA型与AB型和BB型差异均不显著,而(G→C)突变各基因型间没有显著差异;插入(G)突变位点对0-12周龄鸡的龙骨长、胫骨长均没有显著影响,而(G→C)突变位点仅在鸡6周龄时表现出与龙骨长、胫骨长间的差异显著性.     

胰岛素、IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ及其对卵巢的作用

介绍了近年来胰岛素、胰岛素样生长因子Ⅰ和Ⅱ(IGF—Ⅰ和IGF—Ⅱ)的分子特征、受体性质以及它们促进动物卵巢的细胞代谢、甾体激素合成和受体表达的研究进展。     

羔羊肝脏IGF-I和IGF-I R基因表达的发育性变化研究

【目的】通过对羔羊IGF-Ⅰ和 IGF-ⅠR基因表达的发育性变化的研究，为羔羊生长发育规律提供理论依据。【方法】选择2、30、60、90和120日龄的雄性哈萨克羊和新疆细毛羊各6只（共54只，120日龄只有新疆细毛羊），测体重后屠宰，采取肝脏，用荧光实时定量PCR法，以GAPDH基因为内标，检测IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR基因的发育性变化，并进行品种之间比较。【结果】（1）肝脏IGF-Ⅰ基因的表达量都呈先升后降的趋势，其中雄性哈萨克羊肝脏IGF-Ⅰ基因的表达量从2日龄到60日龄持续上升，60日龄后开始下降，90日龄的表达量显著低于前三个时期（P＜0.05）；雄性新疆细毛羊肝脏IGF-Ⅰ基因的表达量从2日龄到90日龄持续上升，90日龄后开始下降，120日龄的表达量显著低于60日龄（P＜0.05）。雄性哈萨克羊肝脏IGF-Ⅰ基因的表达量在2日龄时与新疆细毛羊差异不显著（P＞0.05），在30～60日龄期间都显著高于新疆细毛羊（P＜0.05），在90日龄时极显著高于新疆细毛羊（P＜0.01）；（2）肝脏IGF-ⅠR基因的表达量都呈现持续下降的趋势，其中哈萨克羊肝脏IGF-ⅠR基因在2日龄的表达量最高，然后就持续下降，2日龄时的表达量与其他各时期差异显著（P＜0.05）；新疆细毛羊肝脏IGF-ⅠR基因在2日龄的表达量最高，然后就持续下降，2日龄时的表达量与其他各时期差异显著（P＜0.05）。哈萨克羊肝脏IGF-ⅠR基因的表达量在2和90日龄时都极显著低于新疆细毛羊（P＜0.01）。【结论】羔羊肝脏组织中IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR的基因表达量有特定的发育模式，IGF-ⅠR的基因表达水平的变化不依赖IGF-Ⅰ的基因表达水平。     

3个绵羊品种肉质性状及其发育性规律的比较研究

【目的】比较滩羊、蒙古羊和小尾寒羊的肉质性状及其发育性规律,为选育优质肉羊品种提供理论基础。【方法】选取80,120,160和200日龄的雄性滩羊33只、蒙古羊31只、小尾寒羊34只,屠宰后取其背最长肌测定剪切力、失水率、大理石纹评分和pH。【结果】3个供试绵羊品种背最长肌的剪切力随日龄增加而增大;大理石纹评分和失水率随日龄增加而减小;pH值在滩羊和小尾寒羊背最长肌中呈波动变化,在蒙古羊背最长肌中则随日龄增加而减小。3个绵羊品种中,蒙古羊背最长肌的肉嫩度、失水率、大理石纹评分及pH最高,滩羊的肉嫩度和pH在3个品种中最低,小尾寒羊的失水率和大理石纹评分在3个品种中最低。供试绵羊背最长肌的肉嫩度在品种间差异显著(P<0.05),在不同日龄间差异不显著(P>0.05);供试绵羊背最长肌的失水率、大理石纹评分及pH在不同日龄和品种间均差异显著(P<0.05)。整体而言,绵羊背最长肌的剪切力与失水率呈强负相关(r=-0.535,P<0.01),大理石纹评分与失水率(r=0.403,P<0.02)、pH值(r=0.369,P<0.05)间均呈正相关。【结论】滩羊、蒙古羊和小尾寒羊背最长肌肉质性状的发育性变化规律基本相同,蒙古羊背最长肌的肉嫩度和多汁性在3个品种中最优;大理石纹评分、失水率和pH对肉嫩度均具有正效应。     

基于WGCNA方法识别影响猪肉质性状的关键模块和基因

【目的】发掘和识别猪肉质性状相关的基因共表达模块和关键基因。【方法】采用加权基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)、基因互作关系网络以及中心性方法,对来自NCBI基因表达数据库的大蒲莲猪和长白猪各8头个体的背最长肌基因表达数据集GSE119368进行关键基因共表达模块和基因挖掘,以3头撒坝猪和3头大白猪为素材对肉质性状部分关键基因进行qPCR验证。【结果】共鉴定出蓝色和红色2个与猪肉质性状显著相关的基因共表达模块(r值分别为0.89和0.91,P值分别为5E-6和7E-7);蓝色模块基因主要与快慢肌纤维转换及细胞外基质等相关,其中的10个基因COL3A1、COL5A1、COL1A2、COL14A1、CRTAP、COL5A3、LEPREL1、DEPTOR、COL4A2和COL6A2为肉质性状关键基因;红色模块基因主要与骨骼肌细胞及脂肪细胞分化等有关,其中的11个基因FBXL4、RNF115、FBXO40、ASB4、ASB15、UBE2L6、RNF41、ASB5、HERC5、SOCS1和ASB11为肉质性状...     

鸭胚骨骼肌GHR基因表达与生长发育的关系

为了研究不同品种鸭胚胎期胸肌和腿肌中GHR基因mRNA的发育变化规律,采用实时荧光定量PCR方法测定生长速度不同的高邮鸭和金定鸭在13日、17日、21日、25日和27日胚龄时胸肌和腿肌中GHR基因mRNA的表达水平,并分析其与胚重、胸肌重和腿肌重的关系。结果表明:GHR mRNA在两个品种鸭肌肉早期发育中表现出一致的表达规律,在胸肌中呈"波浪形",在腿肌中呈先降后升再降,然后趋于水平的表达趋势。胸肌和腿肌GHR mRNA的表达量在两个品种相同胚龄间差异均不显著(P>0.05)。不同性别间比较,除了在27日胚龄时,公鸭胸肌GHR mRNA略低于母鸭外,其他胚龄都是公鸭高于母鸭。在13日、17日和21日胚龄时,两个品种鸭的胸肌GHR mRNA的表达量均显著或极显著低于腿肌(P<0.05或P<0.01),而在25日和27日胚龄时,两个品种鸭的胸肌GHR mRNA的表达量均极显著高于腿肌(P<0.01)。相关性分析表明,两个品种鸭胸肌中GHR mRNA的表达与其胸肌重和胚重均呈极显著正相关(P<0.01);两个品种鸭腿肌中GHR mRNA的表达与其腿肌重和胚重均呈极显著负相关(P<0.01)。提示,肌肉中GHR基因表达具有显著的胚龄、组织和性别差异,但不存在品种差异;在鸭胚胎期,胸肌中GHR mRNA表达对胸肌重和胚重可能有正调控作用,而腿肌中GHR mRNA表达对腿肌重和胚重可能有负调控作用。     

影响猪肉质性状的基因的研究进展

综述了猪肉质性状的评定指标以及影响猪肉质性状的几个基因.即氟烷基因、RN基因、心脏脂肪酸结合蛋白基因、钙蛋白酶家族的相关基因、MyoD基因家族和黑素皮质素受体基因的研究进展.     

鸡GARS-AIRS-GART基因多态性及其与肉质性状的关联性研究

【目的】探讨GARS-AIRS-GART基因对鸡肉质风味性状的影响。【方法】以大恒优质肉鸡品系为研究对象,利用PCR-SSCP和测序方法对GARS-AIRS-GART基因的多态性进行研究。【结果】研究结果显示:GARS-AIRSGART基因外显子4有1个SNP位点位于6545处(A→C突变),该位点为错义突变并导致氨基酸序列第173位点由天冬氨酸(Asp)突变为谷氨酸(Glu)。GARS-AIRS-GART-6545SNP位点对鲜味氨基酸含量和肌苷酸含量有显著影响(P<0.05),NN型表现为高肌苷酸含量。【结论】由此推测GARS-AIRS-GART基因可能是影响鸡肉质性状的主效基因或与控制这些性状的QTL连锁。     

IGF-Ⅰ对不同绵羊皮肤中5个毛囊相关生长因子基因表达的影响

【目的】为探讨外源性IGF-Ⅰ对绵羊皮肤中毛囊生长调控的影响。【方法】选取36只新疆细毛羊，随机分成6组。在每只绵羊的左、右两侧肩胛前部分别进行拔毛、剃毛处理。同时在左侧肩胛前部的拔毛、剃毛和正常区的交叉处注射0.5ml IGF-Ⅰ（10ng•ml-1），然后在第0、3、6、9、12、50天采取皮样。用RT-PCR方法，测定各皮肤中GHR、IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR、KAP3.2和KAP6-1的mRNA相对丰度。【结果】（1）IGF-Ⅰ可以下调正常皮肤中GHR基因的表达，对IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR的表达没有显著的影响，能显著提高KAP3.2和KAP6-1的转录水平；（2）IGF-Ⅰ在3 d内可降低拔毛皮肤中GHR的表达，6 d以上无明显影响；对剃毛皮肤中的GHR表达无显著影响。IGF-Ⅰ对拔毛皮肤中的IGF-Ⅰ和IGF-ⅠR的表达均无明显影响；对剃毛皮肤中IGF-Ⅰ的表达有明显的促进作用，但IGF-ⅠR的变化不明显。IGF-Ⅰ对拔毛皮肤和剃毛皮肤中的KAP3.2 和KAP6-1的表达都能显著提高，且表达模式也基本一致，KAP3.2的表达早于KAP6-1的表达。【结论】IGF-Ⅰ对绵羊皮肤中的GHR和IGF-ⅠR的表达均无显著影响，对KAP3.2和KAP6-1的表达能显著提高，但呈现出颠倒的特定时序性，这是否是外源性IGF-Ⅰ不能促进体内毛囊生长的原因所在，有待进一步研究。