苏云金芽胞杆菌cry2Ac4基因在 大肠杆菌中的表达

在大肠杆菌中表达苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)cry2Ac4基因;笔者以含有BtWB9菌株cry2Ac4基因的质粒pMD2Ac为模板,利用cry2Ac4基因的特异引物对(ET-F/ET-R)扩增获得该基因,进而将cry2Ac4基因与pET-29a原核表达载体连接;成功构建了重组表达载体并转化大肠杆菌JM109,从阳性转化子中提取重组表达质粒pET-29a-cry2Ac4,再转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,经IPFG诱导后,对诱导表达产物进行了SDS-PAGE检测;cry2Ac4基因编码的约70kDa蛋白在大肠杆菌中得到了高效表达.     

建设社会主义新农村，水土保持大有可为

党的十六届五中全会提出了建设社会主义新农村的重大历史任务，把建设新农村作为“十一五”经济社会发展的一个主要目标，并在规划建议中放在“十一五”期间主要任务的第一位，具有标志性、转折性的意义。《建议》为我们勾画出了“生产发展、生活宽裕、乡风文明、村容整洁、管理民主”的社会主义新农村的蓝图，必将对我国经济社会发展产生意义深远的作用。本文从五个方面进行了详细分析，认为水土保持工作与新农村建设的每一项内容都有着千丝万缕的联系，是新农村建设中不可缺少的一部分，大有可为。     

基层水保部门电子文件管理工作亟待提高

随着时代的发展 ,电子文件应运而生 ,电子文件管理工作已得到社会高度重视。作为基层水保部门同样需要对电子文件进行科学、合理和有效的管理 ,利用电子文件管理档案使之能够更好地适应信息社会的需要。针对基层水保部门电子文件管理工作中存在的问题 ,采取对策能更好地进行编制、保管和利用电子文件档案 ,使之为水土保持工作服务。     

苏云金芽胞杆菌cryI基因探针的制备及质粒基因定位

将ｐＥＳＩ经ＥｃｏＲＩ酶解后回收纯化的含有苏云金芽胞杆菌ｃｒｙＩ基因高保守区的ＥｃｏＲＩ－Ｆ片段重组到ｐＳＥＬＥＣＴ－１的ＥｃｏＲＩ位点，通过ＤＩＧ体外标记转录制备高灵敏度、背景清楚的ＲＮＡ探针，并利用该探针进行苏云金芽胞杆菌８０１０杀虫基因定位．结果表明，该菌株编码杀虫晶体蛋白的基因位于相对分子质量３７×１０６的质粒上     

我国茶叶的卫生质量现状与整治对策

中国是茶树原产地,茶叶生产历史悠久.现今有20个省、市、区,1000多个县(市)生产茶叶.全国茶园面积(不包括台湾省,下同)110.6万hm2,占世界茶园总面积的43%,位居世界第一;茶叶产量68万t,占世界茶叶总产量的23%,位居世界第二;茶叶出口22.78万t,仪次于斯里兰卡,居世界第二.     

花生新品种桂花32选育及其栽培技术

[目的]选育壳薄、粗脂肪含量高、高产稳产、适应性广且适合广西种植的花生新品种,为广西花生产业可持续发展奠定基础.[方法]以优异种质0442/3001-18为母本、抗病种质03秋/3016为父本进行杂交,并对杂交后代进行多代定向选择,低世代侧重于果型、出仁率及产量潜力的选择,高世代侧重于产量性状、粗脂肪含量和抗逆性的筛选;2010～2014年分别进行品比试验、广西花生品种区域试验及试验示范.[结果]育成的桂花32表现为早熟、高产稳产、壳薄、粗脂肪含量高、适应性广等特点.2010～2011年品比试验中,平均荚果产量4361.2 kg/ha,比对照品种桂花17平均增产11.19％.2012～2013年广西花生区试中,平均荚果产量3975.0 kg/ha,比对照品种桂花21减产1.43％,而籽仁产量2743.1 kg/ha,比桂花21增产7.32％.在广西武鸣试验示范中,荚果产量为4084.6 kg/ha,比桂花17增产11.78％;在钟山县试验示范中,鲜荚果产量9445.5 kg/ha.粗脂肪含量52.12％～54.10％,蛋白质含量25.00％左右;饱果率79.4％,双仁果率81.8％,百果重186.3 g,百仁重71.3 g,出仁率70.3％.桂花32农艺性状优于桂花17,于2014年6月通过广西农作物品种审定委员会审定.[结论]桂花32综合性状优良,可作为桂花17的替代品种,适合在广西花生产区旱坡地推广种植.     

富硒抗病黑花生桂花黑1号的选育及优质栽培

为了培育出高产抗病黑衣花生新品种,填补广西乃至南方花生产区黑花生优良品种空白并形成相应的优质栽培技术,促进广西及华南区域花生产业的发展,以高产抗病果形好的桂花836为母本,以组合桂花30×93-8116杂交后代中单株结果多、产量较高的黑花生品系3H-1①为父本进行杂交,经系谱选育结合多代定向筛选,选育出抗病富硒高产黑花生新品种桂花黑1号.桂花黑1号属珍珠豆型黑花生品种,在2014—2015年广西特色花生品种区域试验中,荚果平均产量4308.75 kg/hm2,比对照增产10.51％;籽仁平均产量2961.3 kg/hm2,比对照增产11.99％;饱果率93.7％,双仁果率82.3％,百果重165.8 g,百仁重63.7 g,出仁率68.8％;粗脂肪含量为52.62％,蛋白质含量为25.31％,硒含量0.14 mg/kg;抗青枯病、锈病和叶斑病;2016年6月通过广西农作物品种审定委员会审定,2019年4月通过国家非主要农作物品种登记.桂花黑1号是广西首个通过杂交育成的特色鲜食型富硒抗病黑花生品种,适宜在广西及我国南方花生产区推广种植,也可以在我国北方进行推广,青枯病发病严重的地块均能种植.     

苏云金芽孢杆菌chi36基因的克隆、表达和酶活性分析

通过PCR方法从苏云金芽孢杆菌010菌株克隆出几丁质酶基因chi36,该基因开放阅读框(ORF)的长度为1 083bp,编码360个氨基酸。氨基酸序列分析表明:Bt 010的Chi36与Bt15A3、Bc28-9、Bc6E1的Chi36相似性分别为99%、99%和96%,其N-端具有27个氨基酸的信号肽序列。该蛋白归类为18家族几丁质酶,属于一种胞外酶。将chi36基因插入到PGEX-KG原核表达载体的表达框中,构建成原核表达载体并转化到大肠杆菌E.coli BL21(DE3)进行蛋白表达,酶活性测定结果表明,表达产物对几丁质有降解作用,在pH值为5.0、温度为55℃时酶活性最高。     

黑龙江省农产品冷链物流现状调研及其发展战略分析

加快发展农产品冷链物流,对于提高农产品竞争力、促进农民增收和保障食品安全,具有十分重要的意义。从冷链物流建设规模、基础设施、冷链物流技术现状、冷链物流企业、冷链物流发展环境等5个方面入手,分析了黑龙江省农产品冷链物流现状和存在的主要问题,提出了黑龙江省应重点发展肉禽冷链、果蔬冷链、水产品冷链、加工食品冷链等领域,并针对各个领域阐述了其实施的战略对策。     

红麻6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PDGH)基因克隆及RNAi载体构建

[目的]克隆红麻不育系和保持系6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PDGH)基因,并构建其RNAi载体,为进一步研究其在红麻花药发育中的功能奠定基础.[方法]根据红麻花药转录组高通量测序数据结果和生物信息学方法获得6PDGH基因全长cDNA拼接序列,分别以红麻不育系(P3A)和保持系(P3B)的花药反转录cDNA及总DNA为模板克隆红麻6PGDH基因全长.依据RNAi载体设计原则,选取红麻6PGDH基因cDNA序列中段389bp的特异片段做为RNA干扰片段,构建红麻6PGDH因的RNAi载体.[结果]克隆获得的红麻不育系(P3A)和保持系(P3B)花药6PGDH基因全长均为1751 bp,均包含1458bp的开放阅读框,编码485个氨基酸残基,无内含子;其碱基序列在不育系和保持系中仅存在两个碱基差异.该基因氨基酸序列(GenBank登录号KF964027)与拟南芥、玉米、大豆、苜蓿、三角叶杨、蓖麻的6PDGH同源性分别为75.07%、84.57%、86.50%、87.24%、91.19%和92.01%.成功构建了红麻6PGDH基因的RNAi载体,获得了干扰表达载体pART27-pKANNIBAL-R1+2.[结论]成功克隆获得红麻6PGDH基因全长序列,构建的干扰表达载体可用于红麻6PGDH基因的功能研究.