生物反应器培养BHK-21悬浮细胞增殖伪狂犬病病毒工艺优化

旨在筛选伪狂犬病病毒（PRV）敏感的BHK-21细胞并分析其生长和病毒增殖特性,优化反应器中BHK-21悬浮细胞的培养和病毒增殖条件,建立生物反应器培养BHK-21悬浮细胞增殖PRV工艺。本研究利用响应面和单因素优化法,以细胞生长动力学特性、TCID₅₀病毒滴度等参数为指标,优化1.2 L生物反应器中BHK-21悬浮细胞的最佳培养和增殖病毒条件,在5 L生物反应器中进一步批培养验证。结果显示,筛选获得PRV高敏感的BHK-21-02贴壁细胞和BHK-21-XF02悬浮细胞各1株,BHK-21-XF02悬浮细胞在含3%血清的SLM-BHK低血清培养基和SFM-BHK无血清培养基中均能实现良好的生长和病毒增殖。利用响应面法优化得到1.2 L反应器最佳培养条件为接种密度1.20×10⁶cells·mL^-1、搅拌转速120 r·min^-1、DO值40%,5 L反应器批培养72 h细胞密度可达（7.61±0.18）×10⁶ cells·mL^-1、细胞活率为（96.93±1.18）%。利用单因素法优化得到1.2 L反应器最佳病毒增殖条件为MOI 0.001、培养温度37℃、细胞密度2.0×10⁶cells·mL^-1、搅拌转速80 r·min^-1,5 L反应器批培养接毒后48 h病毒滴度达到最大值（7.13±0.11） lgTCID₅₀·mL^-1。本研究可为PRV疫苗相关研究和规模化生产提供参考。     

Isolation,Identification, 16S rRNA Gene Sequencing and Genetic Evolution Analysis of Aeromonas aeruginosa from Duck

【Objective】 The experiment was aimed to study the pathogenic bacteria of acute death of ducklings in a duck farm in Henan province and its phylogenetic status.【Method】 The liver and spleen of dead ducks in the diseased duck farm were collected.The bacterial morphology, Gram-staining, biochemical characteristics, sequence analysis of 16S rRNA gene, drug sensitivity test and pathogenicity test were carried out.【Results】 The isolated bacteria grew on blood agar medium with smooth, convex, milky white and α-hemolytic Gram-positive cocci.Biochemical test results showed that the isolated bacteria were positive for maltose, sucrose, raffinose, nitrate reduction reaction, MP-VP test, urea, lysine decarboxylase, ornithine decarboxylase and aescin, and negative for xylose, lactose, glucose, sorbitol, hydrogen sulfide, citrate, peptone, mannitol, phenylalanine and methyl red.The results of 16S rRNA gene sequencing and BLAST comparison results showed that the 16S rRNA gene sequence of the isolated strain was 94.8%-99.9% similar to that of Aerococcus viridans published on NCBI, and the similarity with strains Mnlv1, Mnlv2 and W66 was the highest, up to 99.9%.The similarity with strain GXBl-1 was the lowest, which was 94.8%.Phylogenetic tree analysis showed that the isolated bacteria belonged to the same genus and group on the same branch as strains of Aerococcus viridans FL09, 15MS and Mnlv2 etc., and had the closest genetic relationship with FL09.The results of drug sensitivity showed that the isolated strain was sensitive to fosfomycin, ampicillin and amoxicillin, moderately sensitive to penicillin, neomycin and amikacin, it was resistant to rifampicin, neomycin, bacitracin, erythromycin and enrofloxacin.The results of pathogenicity test showed that the strain was lethal and increased with the increase of inoculation concentration.【Conclusion】 This study determined that the pathogen causing the acute death of ducklings in a duck farm in Henan province was Aerococcus viridans, which provided a reference basis for clinical diagnosis and treatment of the diseases caused by this bacteria.     

小型饲料搅拌机和平模颗粒机组合使用制备颗粒饲料的工艺研究

[目的] 研究JB-300型精饲料搅拌机和300型平模颗粒机组合使用制备牛羊精补料颗粒饲料的最佳工艺参数。[方法] 测定不同搅拌时间、装载系数对饲料混合均匀度的影响;确定搅拌混合工艺参数的基础上,测定不同玉米粉碎粒度、水分含量对颗粒饲料成型率的影响。以模孔直径、玉米粉碎粒度和水分含量为测定因素,以成型率和硬度的综合加权评分值为指标,确定制备颗粒饲料的最优组合参数。[结果] 搅拌时间为10 min、20 min的变异系数均显著（P<0.05）低于搅拌5 min和15 min。装载系数为80%时,变异系数显著（P<0.05）低于装载系数为70%和60%。玉米粉碎粒度为2 mm和4 mm时,颗粒饲料成型率显著（P<0.05）高于玉米粉碎粒度为6 mm和8 mm。水分含量为10%和13%时,颗粒饲料成型率显著（P<0.05）高于水分含量为16%和19%。影响正交试验综合加权平均分值的模孔直径、玉米粉碎粒度、水分含量的极差分别为18.76、1.64和3.47。[结论] JB—300型精饲料搅拌机混合饲料最佳参数：装载系数为80%、搅拌时间为10 min;300型平模颗粒机制作精补料颗粒饲料最佳参数：模孔直径为4 mm（压缩比为6）、玉米粉碎粒度为4 mm、水分含量为13%。     

高寒地区栽培牧草化感效应缓解初探

为研究探讨土壤微生物对化感效应的潜在作用,以高寒草地生态修复常用牧草为研究对象,通过室内生物学实验,测定种子发芽率及幼苗的苗高、根长和干重,计算分析化感综合效应。结果显示：以未灭菌土壤U100为基质的5种牧草种子发芽率均为最高,完全灭菌土壤U0的均为最低,不同比例未灭菌土壤U75,U50和U25则因牧草种子的不同而表现出不同差异;幼苗生长方面,‘青海’垂穗披碱草(Elymus nutans ‘Qinghai’)、‘同德’老芒麦(Elymus sibiricus ‘Tongde’)和‘青海’中华羊茅(Festuca sinensis Qinghai)幼苗苗高随灭菌土壤增加而减小;5种牧草幼苗的根长均在U100处理下最长;幼苗干重的变化趋势同苗高相似。未灭菌土壤对5种牧草的影响主要表现在根系生长和干重方面。研究证明在幼苗生长阶段土壤微生物对根系生长至关重要,土壤微生物能缓解化感效应提高种子发芽率,但对不同物种的影响存在差异。     

不同成熟度沾化冬枣冰点测定及适宜贮藏温度的研究

贮藏温度是影响沾化冬枣贮藏寿命的关键因素,对白熟果、初红果、半红果和全红果4种成熟度冬枣冰点的温度进行了测定,分别为-2．1℃、-3．1℃、-3．9℃和-4．0℃。在此基础上确定了不同成熟度冬枣的适宜贮藏温度,为沾化冬枣贮藏提供了理论和技术依据。     

生物质热解液化技术研究现状及展望

生物质热解液化技术是把低能量密度生物质转化为高能量密度液体产物的一种新型生物质能利用技术。该技术很大程度上能缓解当今社会的能源危机以及环境污染，是人类开发可再生资源的一种非常有效的途径。本文简要介绍了国内外对这一技术的研究及其进展。     

树莓营养生长动态预测

通过对夏红树莓9号、38号、39号1年生枝的调查研究,并对调查所得360组数据分品种,采用修正指数曲线、严格苏玛克曲线、多项式回归、多元线性回归等变量回归模型,用计算机进行拟合,结果表明:树莓3个品种高、径生长量随生长天数变化的最佳回归模型均为多项式回归曲线方程。     

转锥式生物质闪速热解液化反应器生产能力的计算

转锥式生物质闪速热解液化装置是当今研究的一个热点,也是一种很有前途的生物能利用技术,其反应器的生产能力是该装置设计和推广的一个重要参数和指标。本文着重研究了转锥式反应器生产能力的计算方法,为转锥式反应器的设计提供理论支持。     

樟子松大苗造林的技术环节

1 樟子松大苗造林的有关技术环节 1.1 大苗标准 根据多年移栽经验,供选择的樟子松应具备 (1)适宜的高度,5～8年生苗高50～150 cm;(2)树冠完好,主枝完整、侧枝丰满,叶色浓绿;(3)根系发达,主根明显,侧根发达,根系分布均匀.在挖苗前,将选定的移栽苗用白色薄膜按统一标准、高度进行挂号,确保苗木质量及栽后整齐一致.     

垂榆嫁接及栽植的试验研究

垂榆是白榆(Ulmus pumila)的变种(Ulmus pumila var.pendulaRehd.),从新疆引种到内蒙古。由于垂榆在集通铁路沿线未有嫁接栽植,从1999年至2003年,在商都铁路苗圃进行了较系统的嫁接试验,并用该苗木在集通铁路沿线的锡林郭勒盟白旗和桑根达来地区进行了栽植试验,取得了具有实用价值的试验数据,为该地区栽植垂榆提供了宝贵的经验。