芒果类胡萝卜素裂解双加氧酶1(CCD1)基因的克隆与序列分析

类胡萝卜素裂解双加氧酶(carotenoid cleavage dioxygenases,CCD)是植物类胡萝卜素新陈代谢中的降解酶,类胡萝卜素在双加氧酶的作用下氧化产生具有生物活性的不同衍生物,例如维生素A,植物激素脱落酸以及芳香物质,这些物质在植物的颜色、苦味、香气方面具有重要意义。通过转录组数据设计CCD1基因的全长引物,采用RT-PCR技术从芒果(Mangifera indica)果皮中克隆到类胡萝卜素裂解双加氧酶CCD1的全长序列。结果表明:c DNA序列长度为1 900 bp,开放阅读框为1 614 bp,共编码537个氨基酸。CCD1蛋白属于稳定蛋白,在CCD1编码的蛋白质的氨基酸各组分中,亮氨酸(Leu)含量为最高,缬氨酸(Val)的含量次之。蛋白序列分析表明芒果中的CCD1基因编码的蛋白存在一个结构域RPE65,并且属于RPE65 superfamily家族。通过构建系统发生树,结果发现芒果CCD1基因所编码的蛋白序列与蜜柑、甜橙、栗子、大豆等的蛋白序列亲缘关系较近,可聚为一类,而与咖啡豆、菠菜、马铃薯、烟草的亲缘关系较远。芒果的CCD1与柑橘的CCD1的一致性为90%,有比较近的进化关系。亚细胞定位分析结果显示,芒果CCD1定位在细胞质中。对芒果的CCD1蛋白进行疏水性/亲水性预测,结果发现氨基酸疏水/亲水性主要介于+2.267~-0.633之间,CCD1蛋白属于亲水性蛋白。分析二级结构和三级结构得出CCD1基因编码的蛋白质主要由α-螺旋和无规则卷曲构成了其二级结构,α-螺旋占22.16%,无规则卷曲占37.43%。     

基于高效液相色谱法测定长白猪肌肉组织 和肠道内容物中腺苷酸含量

腺苷酸是能量代谢的载体,为了更好地研究长白猪肌肉组织和肠道内容物中能量代谢的差异,建立了一种快速检测猪肌肉组织和肠道内容物中腺苷酸含量的高效液相色谱(HPLC)分析方法。色谱条件为:Waters Symmetry C18反相色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-50 mmol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH6.5),其体积比为9∶91;流速0.5 m L/min;柱温30(±1)℃;紫外检测波长259 nm,进样体积10μL时,在0.1~100 mg/L浓度范围内,ATP、ADP和AMP质量浓度与峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数分别为0.999、0.998和0.996,检出限(LOD,S/N≥3)分别为0.0001、0.004、0.004 mg/L,定量限(LOQ,S/N≥10)分别为0.002、0.02、0.02 mg/L,且平均回收率分别为92.00%~99.05%、100.77%~104.48%和110.84%~113.72%,相对标准偏差(RSD)为0.29%~1.02%、0.33%~1.65%和0.69%~1.92%,整个过程可在10min内完成。该方法具有快速、准确、灵敏性高、重复性好等特点,可用于猪肌肉组织和肠道内容物中ATP、ADP和AMP含量的检测以及能量代谢研究。     

香菇庆科212栽培管理要点

<正>香菇庆科212子实体单生,菇形朵大,菌盖圆正,具有产量高、品质优、抗性较强、商品性好,适应性广、菌龄短等优点,该品种适宜栽培花厚菇。近几年示范栽培,菇农普遍反映该品种产量高、出菇早及菌棒转色不完整等情况。现将栽培该品种应注意的环节及管理要点介绍如下。     

广西铁皮石斛组培苗栽培技术研究

文章介绍铁皮石斛栽培、管理、施肥、病虫害防治、采收等技术要点。目前广西民间普遍利用松树皮作基质栽培铁皮石斛,通过试验发现,采用松树皮加松木屑进行铁皮石斛组培苗炼苗,能有效提高组培苗的成活率,达95%以上。     

我国芒果种质资源研究进展

本文阐述了我国芒果种质资源收集、保存、评价和选育种现状,认为目前我国在资源收集、整理、评价和选育种方面做出了较大成绩,部分研究已经处于国际先进水平。分析了芒果种质资源研究中存在的主要问题,认为今后我国将继续加大芒果种质资源的收集和选育种力度,促进我国芒果产业可持续发展。最后提出了种质资源研究的趋势,认为要加强不同科研单位的合作,实现资源的共享利用;此外还要瞄准国际国内市场,选育出具有抗病、色艳、质优、味鲜等特点的优良新品种。     

芒果ISSR反应体系的建立与优化

运用L16(45)正交设计对芒果ISSR反应的5个因素,即DNA模板浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶浓度在4个水平上进行优化试验,通过不同反应体系扩增效果比较,建立优化的芒果ISSR反应体系,即25μL的PCR体系中含有DNA模板25 ng、Mg2+浓度为1.5 mmol/L、dNTPs 0.3 mmol/L、引物0.32μmol/L、Taq DNA聚合酶1.25 U。这为进一步运用ISSR标记在DNA分子水平上对芒果种质资源进行分析奠定基础。     

"吉夫纳"番荔枝在贵州地区的引种表现

2018—2020年连续3年对"吉夫纳"番荔枝在贵州兴义和贞丰地区的引种表现进行观察及总结,为其在贵州地区推广提供依据.结果表明:1)贞丰地区的抽梢期、花期及坐果期开始时间较兴义地区提早10～20 d,落叶期开始时间晚10～20 d;2)贞丰地区植株生长较兴义地区旺盛,但两地间无显著性差异;3)两地间果实性状、种子性状...     

芒果(Mangifera indica)RCCR基因的克隆及其基因沉默载体的构建

红色叶绿素降解产物还原酶(red chlorophyll catabolite reductase,RCCR)是叶绿素降解过程的关键酶,能将叶绿素降解过程中产生的红色叶绿素代谢物(Red chl catabolit)分解代谢为原初荧光叶绿素降解产物(Primary fluorescent chl catabolite)。本研究根据转录组测序得到RCCR部分片段信息设计简并引物,采取3'和5'cDNA末端快速克隆(RACE)的技术方法,分别在三个不同着色芒果品种(红色‘贵妃’品种,黄色‘金煌’品种,绿色‘桂七’品种)中进行RCCR基因全长cDNA序列的扩增克隆得到了芒果果皮RCCR基因的全长cDNA序列。结果发现三个着色品种cDNA序列只有几个碱基的差异,以黄色金煌品种为例分析可得全长cDNA序列为1 134 bp,开放阅读框为975 bp,编码324个氨基酸,分子重量为36.21 k D,等电点为5.13。通过生物软件预测得到了三种三级蛋白结构图。对NCBI上刊载的30种不同植物构建系统发育树发现该基因编码的蛋白与橙子、克莱门柚等水果植物的亲缘关系比其他植物物种的亲缘关系近。近年来,病毒诱导的基因沉默(VIGS)是研究植物基因功能的有力工具,为深入探究RCCR基因在叶绿素降解中的作用,本研究成功构建出RCCR-pTRV2基因沉默载体,为后续研究RCCR基因在芒果果实成熟及果皮着色过程中的作用机理提供理论依据。     

食用菌净化车间的使用和维护

正随着社会经济的发展和其他行业资本的大量涌入,食用菌规模化生产发展迅速,随着食用菌规模化生产的发展,不同规模和级别的净化车间(洁净室),在整个食用菌行业得到了广泛应用。由于很多单位和公司缺乏全面地了解专业的净化知识,只注重高大上的前期投入,而忽视净化车间后期的管理和维护,使其在使用过程中达不到预期效果,最后成为一种摆设。实践证明洁净室的使用能否达到预期设计的效果,不但和洁净室的选址、设计、施工有关,而且