应用鸡毒霉原体PCR试剂盒对人工感染鸡的检测

应用鸡毒霉原体(MG)聚合酶链式反应(PCR)试剂盒对人工感染鸡的样品进行检测，结果 人工感染后第1—24天，所采集喉头及腭裂处粘液、喉气管组织、肺组织均可检出MG，阳性检出率要比传统分离鉴定方法高，试验结果表明了MG—PCR试剂盒对MG的检测不仅特异、敏感、快速，而且操作简便，适合在临床上推广应用。     

应用半套式聚合酶链反应检测禽呼肠孤病毒S1基因的研究

根据离呼肠孤病毒S1133毒株S1基因序列，设计合成XZ11、XZ12和XZ11、XZ33两对引物，用半套式PCR对6株禽呼肠孤病毒标准毒株的核酸进行了检测。结果6株ARV均可扩增出和预期大小相符392bp的PCR产物，而对其他6种禽病病原核酸的扩增结果均为阴性；该半套式PCR比RT-PCR更加敏感，这种方法可以检测出Ifg的ARV RNA模板。     

亲油亲水平衡值对鸡新城疫油苗免疫力影响的研究

制备出HLB值从4．3－14之间的新城疫（ND）油苗10组，分别免疫3月龄易感来航鸡，每隔1－2周采血直至第8周，进行HI抗体测定，HLB值为7．0时ND油苗产生的抗体水平最高。HLB值为7．0的油苗油相中乳化剂含量为10％，油水比例为4：1时，其产生的HI抗体最高。试验结果表明油苗的HLB值、乳化剂含量、油相水相之间比例对油苗效果起关键性作用。     

牛分支杆菌广西分离株Hsp 65基因的克隆及序列分析

利用牛分支杆菌Hsp 65基因特异性引物,对2株牛分支杆菌广西分离菌株进行PCR扩增,产物经纯化后与载体pMD-18连接,然后转染大肠埃希菌DH5α。提取转染后大肠埃希菌的质粒进行双酶切和PCR鉴定,鉴定为阳性的质粒进行序列测定。测序后通过序列分析软件DNA Star MegAlign对Hsp 65基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行分析,并与GenBank上已发表的牛分支杆菌的Hsp 65基因进行比较。结果显示,广西分离株mt359、mt370与已发表的7株参考株序列,其核苷酸序列同源性在98.7%～100%之间,推导的氨基酸序列同源性在98.4%～100%之间。表明广西分离的菌株与参考的其他牛分支杆菌菌株的Hsp 65基因差异不大,说明牛分支杆菌分泌蛋白Hsp 65基因十分保守,从而为检测跟踪菌株的变异,研制牛分支杆菌亚单位基因疫苗奠定基础。     

用不同鸡新城疫病毒株制备油乳剂苗的研究

应用４种鸡新城疫病毒Ｌａ－Ｓｏｔａ，Ｕｌｓｔｅｒ，Ｂ１和ＰＭＶ－Ⅰ分别作为抗原，制备ＮＤ油苗。每组苗颈部皮下接种非免疫来航鸡，每隔１～２周采血检测ＨＩ抗体一次，直至免疫后第８周。用同源抗原检测ＮＤ苗免疫的ＨＩ抗体滴度普遍高于非同源抗原检测的ＨＩ抗体滴度（Ｌａ－Ｓｏｔａ油苗除外），不同ＮＤ毒株油苗中，Ｕｌｓｔｅｒ油苗和Ｂ１油苗的ＨＩ抗体水平最高，其次是Ｌａ－Ｓｏｔａ油苗，ＰＭＶ－Ⅰ油苗ＨＩ抗体水平最     

广西高致病性 PRRSV Nsp2基因的克隆、序列分析和抗原表位预测

根据猪繁殖与吸吸综合征病毒(PRRSV)VR2332 Nsp2基因序列合成特异性引物,对广西分离的高致病性PRRSV进行RT-PCR扩增,将扩增出的796 bp片段插入pMD18-T载体中进行序列测定和分析,并用DNA Star软件对Nsp2基因推导的氨基酸序列进行了表位分析。结果显示,广西3个县、市的PRRSV分离株Nsp2基因第483位和第532位~第560位氨基酸发生缺失,核苷酸序列之间的同源性为97.0%~97.4%,推导编码的氨基酸序列之间的同源性为93.6%~94.7%;与PRRSV VR2332株、MLV株和CH-1a株核苷酸之间的同源性分别为79.0%~79.2%、78.8%~78.9%和88.2%~89.3%;氨基酸之间的同源性分别为59.4%~60.2%、59.4%~60.2%和70.9%~81.6%,表明广西3个县、市的PRRSV分离株Nsp2基因与VR2332株、MLV株和CH-1a株比较变异较大。表位分析表明,由于博白株的Nsp2基因的第532位~560位氨基酸的缺失,与VR2332株比较,其亲水性、抗原指数均发生了大的变化。     

鸡病毒性关节炎血清学调查

鸡病毒性关节炎是由禽呼肠孤病毒引起的一种传染病。该病１９５７年发生于美国，１９８４年我国有该病发生的报道，世界主要养禽国家都有该病的报道，近年来越来越严重，并已成为养鸡业，尤其肉鸡业重要传染病之一。为了搞清广西不同地区感染情况，为我国该病防治提供科学...     

广西鸡毒支原体的分子流行病学研究的概述

研究分别建立了鸡毒支原体（MG）、滑液霉形体（MS）、禽衣阿华支原体（MI）、火鸡支原体（MM）及鉴别MG强毒株和弱毒疫苗株单一PCR和多重PCR检测鉴定技术,以及核酸探针检测MG的技术。应用多种分子生物学技术即SDS—PAGE、PCR—RFLP、RAPD和29KD多肽基因序列分析等方法对广西MG流行株的分子病原学进行研究,摸清了广西MG流行野毒株之问以及与现用疫苗株和国际参考株之间的差异和遗传相关性;在此基础上制定的综合防制措施经生产的实施与应用,取得了显著的效果。     

广西奶水牛结核病三种检测方法的比较

应用牛结核变态反应、PCR和分离培养3种方法,对奶水牛进行牛结核病检测,比较3种检测方法的符合率。结果表明,1850头奶水牛中有78头奶水牛的皮内变态反应结果为阳性,而对变态反应阳性的牛样品进行PCR检测和分离鉴定,分别鉴定出4份和2份牛分枝杆菌。阳性检出率以变态反应为最高(4.22%),PCR和分离鉴定的较低,分别为0.21%和0.11%。变态反应与PCR检测、分离鉴定的符合率较差,而PCR检测与分离鉴定的符合率相对较接近。因此建议,在对奶水牛群进行结核病检测时,应先以变态反应检疫牛群,再结合PCR检测进行综合诊断,更有利于奶水牛结核病的检测与净化。     

BVDV与BRV二温式多重PCR检测方法的建立

根据牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛轮状病毒(BRV)的保守基因设计了两对特异引物,并将三温式PCR扩增程序简化为2个温度梯度,建立了用于同时检测BVDV和BRV的二温武多重PCR方法,扩增长度分别为244和385 bp.特异性试验和敏感性试验结果表明,该方法只对BVDV和BRV模板进行扩增,而对其他对照病毒的检测均为阴性;检测灵敏度高,最低能检测到BVDV和RBV各1 pg病毒RNA.建立的BVDV和BRV二温武多重PCR方法,是一种快速、特异、敏感的检测方法.