棉花黄萎菌落叶型菌系毒素纯化及抗血清制备

用SephacrylS 200HR层析柱纯化了V991菌系毒素,经叶片针刺涂抹方法确认其致萎功能后,免疫大白兔制备了抗血清。用间接ELISA方法对强、中、弱3种不同致病力共10个菌株的培养液进行了特异性检测,结果表明:抗血清具备一定生理型特异性,能够准确检出全部强致病力落叶型菌系,可作为不同生理型划分的指标之一。用毛细管电泳、SDS PAGE和Western杂交方法检测了V991毒素的组分:在中性条件下,毒素在毛细管电泳时存在2个峰;SDS PAGE将毒素分为8条带,其中4条主带具有强烈的致萎性;Western点杂交的反应强度与相应蛋白回收带的致萎功能之间明显相关。     

黄萎病菌侵染对感病棉花品种叶片蛋白质组的影响

为进一步探索黄萎病菌与棉花的相互作用,以感黄萎病棉花品种冀棉11为实验材料,在接种大丽轮枝菌V991 3 d后提取叶片蛋白,运用双向电泳和质谱分析技术研究黄萎病菌侵染后叶片蛋白质组学的变化。分析发现,与对照相比差异表达量在2倍以上的蛋白点有22个,其中上调表达的蛋白点10个,下调表达的蛋白点12个。质谱鉴定发现,上调表达的蛋白包括ATP合成酶β亚基,Ru Bis CO活化酶1,Ru Bis CO活化酶α2以及果糖-1,6-二磷酸醛缩酶,下调表达的蛋白包括质体叶绿素AB结合蛋白,核酮糖二磷酸羧化酶大链以及核酮糖二磷酸羧化酶小链。分别对下调表达的蛋白rubisco小亚基基因(RBCS)和叶绿素AB结合蛋白基因(cab)、上调表达的蛋白Ru Bis CO活化酶1基因(RCA1)进行荧光定量PCR,发现接种黄萎病菌后3个基因在m RNA水平与蛋白水平上的变化是一致的。通过分析推测,黄萎病菌通过与参与光合能量代谢的蛋白相互作用,破坏植物的光合作用,近而引起棉花叶片的萎蔫与凋零。     

浅谈棉花种质抗枯、黄萎病鉴定

浅谈棉花种质抗枯、黄萎病鉴定孙文姬，陈其瑛，马存，石磊岩，简桂良，丁之栓（中国农业科学院植保所，北京１０００９４）国内外报道棉花病害有４０余种，其中枯萎病和黄萎病是防治难度最大的两种病害。自５０年代起陕西植保所、江苏植保所、四川棉花所、中国农科院棉花...     

不同超声条件下结冷胶酸性凝胶的凝胶特性研究

利用高能超声波处理低酰基结冷胶（Low acyl gellan gum,LA）水溶液,并以葡萄糖酸-δ-内酯（Glucono-δ-lactone,GDL）为酸诱导剂制备了结冷胶酸性凝胶,以不透明指数、断裂应力、断裂应变、杨氏模量、保水性指数为指标,考察了超声作用对结冷胶酸性凝胶凝胶特性的影响。结果表明,结冷胶浓度越高,断裂应力、杨氏模量、不透明指数和保水性越大,断裂应变则越小。超声时间越长,超声功率越大,凝胶的断裂应变越大,但断裂应力、杨氏模量则越小。断裂应力、杨氏模量随着GDL/LA质量比的增大出现了先增加后降低的变化趋势,当GDL/LA质量比为1时取得最大值。GDL/LA质量比增大,酸性凝胶的断裂应变和保水性减小,而不透明指数增大。保水性随着超声功率的增大而降低,但随着超声时间的延长,保水性出现了小幅提高,当超声时间为30min时,保水性最大。超声处理使结冷胶分子链断链,凝胶三维网络结构中形成了悬挂链,凝胶强度降低。结冷胶浓度越大,凝胶的微观结构越致密。超声处理可用于结冷胶改性以改善其凝胶特性。     

Plant MetGenMAP数据库分析水稻表达谱芯片数据的方法初探

基因芯片数据分析是利用基因芯片技术进行各项研究的关键。本文以水稻Affymetrix表达谱芯片的数据为例,利用Plant MetGenMAP数据库,对水稻受病原菌侵染后基因表达量及代谢途径的变化情况进行了初步分析,同时,提供了一种利用Plant MetGenMAP数据库分析水稻基因芯片数据的方法。     

转几丁质酶和(-1,3-葡聚糖酶基因提高棉花对枯萎病和黄萎病的抗性

枯、黄萎病是世界棉花生产中的两大重要病害.传统育种缺乏抗源,几丁质酶和(-1,3-葡聚糖酶是植物防御体系中的两种防卫因子,两者之间存在协同增效作用.据此构建了4个单价和2个双价基因(分别定位于细胞内或细胞外)的植物表达载体,通过花粉管通道法转化棉花,经PCR和Southern杂交检测以及1996(2000年温室及病圃多代筛选鉴定,已培育出对枯、黄萎病抗性提高的转基因棉花株系.将抗病基因导入国产抗虫棉品种GK19中,还获得了兼抗病、虫的转基因优系.     

GO基因导入对棉花农艺性状及抗病性的影响

通过对转葡萄糖氧化酶(GO)基因棉株系B99261(IV、Ⅷ代)和B99267(Ⅷ、Ⅳ代)与受体新陆早7号及耐黄萎病对照中棉所12农艺性状及抗病性比较。结果表明，转基因棉花株型变矮，果柄变长，单株成铃数和纤维品质有明显提高。B99261对苗期炭疽病、立枯病及铃疫病抗性有显著提高，但不抗红腐病；B99267对棉铃疫病抗性也显著增强。这两个品系对枯萎病和黄萎病抗性均有显著提高，其中第四代B99261．抗黄萎病性能最好,达到抗病水平。     

爱福丁（BA—1）乳油防治棉铃虫效果好

爱福丁（ＢＡ—１）乳油防治棉铃虫效果好１９９３年６月，北京农大微生物发酵实验工厂提供新型高效生物杀虫剂爱福丁（ＢＡ—１）乳油，经在山东、河南、辽宁进行田间防治第二代棉铃虫试验，防治效果突出；同年７月由中国农科院植保所主持在山东、河南进行大面积防治棉田...     

大丽轮枝菌外切葡聚糖酶VdCBH1在毕赤酵母中的表达与酶活分析

 为了探究大丽轮枝菌外切葡聚糖酶VdCBH1(exoglucanase)的酶活与催化机理,本研究在生物信息学分析的基础上,以大丽轮枝菌V991菌株为材料克隆了VdCBH1基因,进一步构建了pPIC9-VdCBH1重组质粒并转入毕赤酵母中进行表达,测定了重组VdCBH1蛋白的外切葡聚糖酶活性;将预测的VdCBH1催化残基位点进行突变,随后通过SDS-PAGE分析了重组VdCBH1蛋白及其催化残基位点突变蛋白的表达情况,并检测了VdCBH1催化残基位点突变前后的酶活变化。结果表明,VdCBH1基因编码区全长1 356 bp,编码451个氨基酸,蛋白理论分子量大小为48.574 kDa,理论等电点为4.29,N端前17个氨基酸为信号肽序列。保守结构域和进化树分析表明,VdCBH1蛋白含有GH7_CBH_EG保守结构域,该结构域是糖基水解酶7家族(Glycosyl hydrolase family 7,GH7)所特有的,与尖端赛多孢子菌(Scedosporium apiospermum)的外切葡聚糖酶蛋白亲缘关系最近。重组VdCBH1蛋白具有典型的外切葡聚糖酶活性,而Glu233催化残基单突变与Glu228、Asp230和Glu233催化残基三突变蛋白的酶活明显下降。这表明催化残基Glu233在外切葡聚糖酶活性中发挥更为重要的作用,Glu228、Asp230则可能在其中起协同作用。本研究为进一步揭示VdCBH1蛋白的催化机制奠定了理论基础。     

合肥环城公园绿地植物群落结构特征

在对合肥环城公园绿地实地调查的基础上,对绿地植物群落的组成、结构、特征及类型进行研究.结果表明:合肥环城公园绿地植物群落有145种,属于64科114属.乔木层树种有62种,木犀科、豆科、杉科、木兰科和松科等为优势科,刺槐、女贞、构树、枫杨、棕榈、水杉、黄山栾和广玉兰等为优势种.少数种占有较大比例,优势种群中常绿树种占有一定比例.群落类型中,常绿落叶阔叶林和落叶阔叶林占群落总数的87.04%.乔木层、灌木层优势种中,引种栽培植物占有相当比例,与城郊次生植被以地带性树种形成的森林群落有一定区别.应以地带性树种为主体,在遵从植物生态位的基础上,合理配置灌木和宿根地被植物,逐步形成稳定的复合植物群落.