雪域随笔

1995年春天,我奉调从红土高原的春城昆明来到了雪域高原的圣城拉萨,在拉萨动植物检疫局任职。斗转星移、岁月蹉跎,快两年的西藏经历虽然平淡无奇,却给了我全新的人生感受和体验。 西藏,一个千古难解之谜。在过客的眼里,她不仅有历史悠久、     

几种动物病毒的基因芯片检测技术

分别用水疱性口炎病毒、蓝舌病病毒、口蹄疫病毒、猪瘟病毒、牛病毒性腹泻病毒、鹿流行性出血热病毒和赤羽病病毒各一段高度保守的基因片段构建质粒，在此基础上制备了芯片探针。提取样品中的核酸，经反转录和荧光标记后滴加到芯片上进行特异性杂交，对杂交结果扫描检测，可同时对上述7种动物传染病进行快速、准确的诊断，此方法敏感性高，特异性强，适合于大批动物高通量检疫。     

应用聚合酶链反应检测蓝舌病病毒的研究

聚合酶链反应是体外扩增特异性DNA系列的一种有效方法。本研究以第10型蓝舌病病毒群特异性病毒抗原VP_7的编码基因S_7为模板,用禽类成髓细胞瘤病毒反转录酶将模板RNA反转录成cDNA,再应用聚合酶链反应对其进行扩增,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测,证明扩增物的大小与设计相符,将扩增物制备成探针后与第10型蓝舌病病毒核酸进行杂交,证明扩增物为病毒特异性核酸,同时设立的细胞核酸和鹿流行性出血病病毒核酸的扩增结果为阴性。本研究中所使用的引物还可用来扩增第1、11、13、15、17等型的蓝舌病病毒和一株分离的蓝舌病病毒以及直接扩增出动物血液内的蓝舌病病毒。     

两株狂犬病毒接种狗后病毒的外周分布

用Ethiopian株或Mexican株狂犬病毒接种47只警犬,来研究狂犬病的发病机制。经过9～69天的潜伏期,有39只狂犬病狗死亡,其中82％出现狂犬病的典型症状,18％无任何明显病状。其余的8只狗,经过两年多时间的观察,未检出狂犬病毒中和抗体,但改用大剂量的同株狂犬病毒接种后,检出的抗体滴度较高。在狂犬病症状出现之前,即从唾液和脑脊液内分离出病毒,但在发病前的血清与脑脊液内,却未检出狂犬病毒中和抗体。本研究发现狂犬病症状出现之前,活体皮肤标本内检不出病毒抗原,在尸检的39只狗中,大部份组织内检出了狂犬病毒。     

VSV的RT—PCR快速检测方法的建立

选取水泡性口炎病毒N基因序列，设计1对引物，建立检测水泡性口炎病毒的RT－PCR方法。对VSV各毒株进行检测，结果均为引性， 而对反刍动物病毒性疾病相关病毒进行检测，结果均为阴性。结果表明所建立的RT－PCR技术可用于水泡性口炎的诊断和流行病学调查。     

TaqMan~T-PCR对水疱性口炎病毒的鉴定检测

水疱性口炎分为印第安那型 ( Indiana)和新泽西型 ( New Jersey)。这两种血清型病毒的快速和可靠的鉴别对该病的诊断、检疫、分子流行病学调查和监测至关重要。文章按照 VSV核蛋白基因序列 ,设计了一对两型通用引物和两型各自特异性探针。研究建立了 VSV实时荧光定量 PCR检测方法 ,对 VSV细胞培养物、人工感染实验动物组织、血清样品 ,以及系列稀释的不同 TCID50 样品、其它相关或相似病毒进行鉴定 ,同时与常规 PCR、病毒分离试验作了比较。Taq Man○R RT-PCR的特异性和敏感性相当于或优于对照方法。重复性和稳定性试验证实 ,该方法可靠。每个试验中设立阳性、阴性对照和标准稀释度对照 ,使试验结果可对病毒 RNA作准确定量 ,并可在 4h内获得结果。研究结果表明 ,Taq Man○R RT-PCR方法是一种特异性强、敏感性高、快速安全的定量检测方法。因此 ,可以作为 VSV的快速检测和定型。     

水疱性口炎研究进展

水疱性口炎(VS)是由水疱性口炎病毒(VSV)引起的人畜共患的重大动物疫病.VS病毒生态学复杂,易感动物较多,传播媒介种类广,病毒可在一定区域内长期存在.VSV主要呈嗜上皮性,大量流涎是家畜感染最重要的临床症状,其特征为口腔黏膜、乳房皮肤及蹄冠部皮肤出现水泡及糜烂,人感染后出现类似流感的症状.由于其临床症状与口蹄疫不易区别,发病时容易引起国际贸易恐慌,因此,对VS诊断防治的研究有着重要的社会经济和公共卫生意义.文章从分子生物学特征、流行病学、诊断和防控4个方面对水疱性口炎的研究进行了综述.     

转基因动物产品-人乳铁蛋白与测定方法

乳铁蛋白是一种分子量为76.386kDa的结合性糖蛋白，在其多肽链上有两条碳水化合物侧链，乳铁蛋白存在于人乳及牛乳中，乳腺为主要分泌器官，乳铁蛋白具有多种重要的生理功能，在多种免疫细胞表面存在乳铁蛋白受体，编码人乳铁蛋白的基因全长2.358kb，由其释译的最初乳铁蛋白为711个氨基酸残基，成熟乳铁蛋白为692个氨基酸残基，人乳铁蛋白的转基因研究已获成功，获得表达，并初步应用于临床治疗，乳铁蛋白的检测方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA），放射免疫（RIA），免疫卵迹(Western-Blot)及免疫组化方法，还可应用PCR和核酸探针技术对人乳铁蛋白转基因肉品进行检测。     

羊痘诊断和预防的研究进展

羊痘又名羊“天花”,是所有动物痘病最为严重的一种,严重影响国际贸易和养羊业的发展。本文主要从羊痘的诊断和预防疫苗方面做一综述。现在已有了一组针对羊痘的简单而高效检测方法和诊断试剂用于实验室诊断,但各有千秋。目前控制该病最有效的方法还是使用高效疫苗对易感动物进行免疫接种。利用羊痘病毒基因组做载体构建重组疫苗来同时预防小反刍兽的其他疾病,具有很大的潜力。