TaqMan(R) RT-PCR对水疱性口炎病毒的鉴定检测

水疱性口炎分为印第安那型(Indiana)和新泽西型(New Jersey)。这两种血清型病毒的快速和可靠的鉴别对该病的诊断、检疫、分子流行病学调查和监测至关重要。文章按照VSV核蛋白基因序列,设计了一对两型通用引物和两型各自特异性探针。研究建立了VSV实时荧光定量PCR检测方法,对VSV细胞培养物、人工感染实验动物组织、血清样品,以及系列稀释的不同TCID50样品、其它相关或相似病毒进行鉴定,同时与常规PCR、病毒分离试验作了比较。TaqMan RT-PCR的特异性和敏感性相当于或优于对照方法。重复性和稳定性试验证实,该方法可靠。每个试验中设立阳性、阴性对照和标准稀释度对照,使试验结果可对病毒RNA作准确定量,并可在4h内获得结果。研究结果表明,TaqMan RT-PCR方法是一种特异性强、敏感性高、快速安全的定量检测方法。因此,可以作为VSV的快速检测和定型。     

猪源致病性大肠杆菌的分离鉴定及多价油苗的研制

从我省滇中地区11个县区所送检的66份可疑猪大肠杆菌病病料中分离到35株致病菌株。采用24种主要引起致病性大肠杆菌因子血清作平板凝集试验后鉴定出29株，其中O107 19株（1株含K88抗原）、O149 9株（4株含K88抗原）、O2 1株，占所分离致病菌株数百分比分别为54．0％（19／35）、25．7％（9／35）、2．9％（1／35）。从中挑战出含K88抗原菌株O107：K88、O149：K88与标准菌株K88、K99、F41、987P混合制备多价油苗，在以上分离地区应用1万头份，效果显著，平均保护率达70％以上，且免疫后猪只无不良反应。     

TaqMan~T-PCR对水疱性口炎病毒的鉴定检测

水疱性口炎分为印第安那型 ( Indiana)和新泽西型 ( New Jersey)。这两种血清型病毒的快速和可靠的鉴别对该病的诊断、检疫、分子流行病学调查和监测至关重要。文章按照 VSV核蛋白基因序列 ,设计了一对两型通用引物和两型各自特异性探针。研究建立了 VSV实时荧光定量 PCR检测方法 ,对 VSV细胞培养物、人工感染实验动物组织、血清样品 ,以及系列稀释的不同 TCID50 样品、其它相关或相似病毒进行鉴定 ,同时与常规 PCR、病毒分离试验作了比较。Taq Man○R RT-PCR的特异性和敏感性相当于或优于对照方法。重复性和稳定性试验证实 ,该方法可靠。每个试验中设立阳性、阴性对照和标准稀释度对照 ,使试验结果可对病毒 RNA作准确定量 ,并可在 4h内获得结果。研究结果表明 ,Taq Man○R RT-PCR方法是一种特异性强、敏感性高、快速安全的定量检测方法。因此 ,可以作为 VSV的快速检测和定型。