猪脑心肌炎病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒二重RT-PCR检测方法的建立

根据猪脑心肌炎病毒(EMCV)3D基因和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白基因序列设计合成了两对特异性引物,经过PCR反应条件的优化,建立了EMCV和PRRSV二重RT-PCR方法,其PCR产物大小分别为286 bp和390 bp,并具有EMCV和PRRSV特征序列。该方法对EMCV和PRRSV的最低检测量分别为10×TC ID50和1×TC ID50;而对乙型脑炎病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒的PCR检测结果均为阴性;20份临床发病仔猪样品检测结果为PRRSV阳性者15份,EMCV阳性者3份,证明我国存在EMCV感染。该方法敏感、特异,可用于EMCV和PRRSV感染的检测。     

副猪嗜血杆菌tbpA基因PCR—RFLP分型

副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis,HPs）是目前影响世界养猪业的重要病原之一。本试验利用针对HPs转铁蛋白基因tbpA的PCR—RFLP分型方法,对2003-2008年分离自江苏、上海、广西、浙江、江西和安徽等6省市的57个HPs分离株及15个参考菌株进行PCR—RFLP分析。结果显示,15个血清型参考菌株分为9种基因型,57个HPs流行分离株分为15种基因型,其中在我国最为流行的基因型分别为DBN（38％）,ABN（18％）与DBP（12％）。本研究表明副猪嗜血杆菌在我国猪群中普遍存在,并至少有15个RFLP基因亚型,从而为我国HPs病的防治提供了重要理论依据。     

华东某猪场猪繁殖与呼吸综合征的诊断与防制

华东区某猪场暴发以妊娠母猪繁殖障碍为特征的传染病。在该场采集可疑病例血样 62份进行检测 ,其中 53份血清为猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)阳性 ,阳性率高达 85 4 %。结合病毒分离鉴定确诊为PRRS病毒 (PRRSV)感染 ,RT PCR试验证实分离毒属美洲型PRRSV ,且与ATCC VR2 332株属同一基因亚型。确诊后采取隔离、消毒及采用当地病猪肺组织灭活苗紧急接种等措施 ,取得了较满意的效果。跟踪血清学调查显示 ,1年后该场抽检血样PRRS阳性率仍达 80 %     

单抗捕获ELISA检测PRRSV抗体的方法的建立

以国内刚刚研制出的ＰＲＲＳＶ单克隆抗体为基础，建立了检测ＰＲＲＳ病毒抗体的单克隆抗体辅获抗原的ＥＬＩＳＡ法，其单抗包被浓度为１．１６μｇ／ｍＬ，粗提病毒反应浓度为１６．５０μｇ／ｍＬ，血清稀释度为１：４０。经与中和试验以及进口ＥＬＩＳＡ试剂盒比较，证明该法敏感性高，特异性良好，是一种有应用前景的方法。     

一例PEDV S-INDEL重组毒案例的复盘分析

山东省烟台市某规模化猪场哺乳仔猪发生以水样腹泻为主要症状的临床案例,采集腹泻病料,荧光定量PCR检测流行性腹泻抗原阳性,阳性样品进行测序分析,遗传进化分析位于新型PEDV毒株中的G1b亚型,首次发现PEDV S-INDEL重组毒。通过紧急防控措施,疫情未发生扩散,通过复盘分析,确定此次疫情来源于引种所致。     

榆树食叶害虫榆蓝叶甲综合防治技术初步研究

通过对榆蓝叶甲成、幼虫无公害农药防治试验研究,结果表明:灭幼脲-Ⅲ号、阿维菌素、B t剂和杀虫环4种无公害农药防治榆蓝叶甲效果理想。杀虫率均在95%以上。同时提出了营林措施、药物防治、机械防治、保护利用天敌等综合防治技术。     

猪繁殖与呼吸综合征弱毒苗阴道免疫对母猪子宫IgA和IgG分泌细胞的影响

用猪繁殖与呼吸综合征 (PRRS) 弱毒苗分别通过生殖道黏膜免疫和肌肉注射免疫母猪 (各 4头 ), 另 4头经生殖道接种生理盐水作为对照, 运用免疫组化技术显示子宫局部IgA分泌细胞和IgG分泌细胞的分布。结果表明, 对照组子宫中IgA分泌细胞和IgG分泌细胞主要分布于黏膜固有层浅层, 子宫颈中的IgA分泌细胞数量多于子宫角, 而子宫角中IgG分泌细胞数量多于子宫颈。生殖道免疫后, 与对照组相比, 子宫角IgA分泌细胞数量极显著增多 (P<0 01), 子宫颈IgA分泌细胞数量无显著增加; 子宫角IgG分泌细胞数量有所增加, 但差异不显著, 子宫颈IgG分泌细胞数量无显著变化。肌肉注射后, 子宫中IgA和IgG抗体分泌细胞数量与对照组间无明显变化。表明用PRRS弱毒苗经生殖道黏膜免疫可增加子宫局部抗体分泌细胞数量, 而全身免疫对子宫抗体分泌细胞无显著影响。     

某猪场非洲猪瘟临床病理变化及病毒组织分布观察

选择某疑似非洲猪瘟(African swine fever, ASF)临床发病猪场3头病死仔猪，系统观察其眼观病变、组织病理学变化，检测非洲猪瘟病毒(ASFV)及其在不同组织中的分布。结果显示：发病死亡仔猪内脏器官广泛出血与肿大，其中以淋巴结与脾脏病变最为显著。内脏器官组织学病理变化以广泛性的充血、出血及炎性细胞浸润为主。实时荧光定量PCR与免疫组化显示脾脏、淋巴结、肝脏和肺脏中病毒载量较大，心脏、肾脏和脑次之。组织中的病毒载量与组织病变程度具有一定相关性，证明ASFV感染猪体全身组织，可造成严重的血液循环障碍与炎症反应，为该病发病机理研究提供了理论依据。     

四川牦牛UCP1基因遗传多态性及其与肉品质性状的关联分析

四川牦牛(Bos grunniens,yak)主要分布于我国海拔3 000～5 000 m的高原地区，以肉质细嫩、味美可口、低脂肪、高蛋白而受到国内外消费者的欢迎。牦牛全身都是宝，藏族人民的衣食住行都离不开它。解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)是棕色和米色脂肪细胞特异性表达的一种产热线粒体蛋白，通过线粒体中的电子传递链参与底物氧化和ATP分解进程，从而产生热量并为机体供能。本课题组前期通过组学分析发现：UCP1基因可能对脂质代谢具有重要调控作用。因此，本试验拟以四川牦牛为研究对象，探讨UCP1基因在四川牦牛群体中的遗传多态性，分析四川牦牛肉品质性状相关的潜在遗传标记位点。结果显示，UCP1基因的内含子4和外显子5中共发现4个SNPs位点，其中I4-769 G>A位点的AA型的背最长肌红度显著高于GG型；在I4-836 C>T位点中CC型的背最长肌红度和黄度显著高于CT型；E5-26 C>G位点的CC型的背最长肌亮度显著低于CG型，而CC型背最长肌红度和黄度显著高于CG型；E5-59 A>G位点的GA型的背最长肌24 h时的pH值显...     

基于马尔科夫的城市道路行驶工况构建方法

将汽车行驶工况看作一个随时间变化的马尔科夫过程,利用最大似然估计法,将行驶工况分成6个不同状态,而每个行驶片段作为反映加速度变化的模型事件,更好地保持了车辆行驶过程中微小时间段内的速度变化特性.在此基础上提出了状态转移概率与相似性检验相结合的候选工况选择方法,建立了具有13个特征参数的评价准则.以合肥市典型道路为例进行了实际应用分析,并通过独立性检验,验证了马尔科夫方法应用于行驶工况的合理性.结果表明,在与试验数据进行模型事件加速度分布的K-S检验上,马尔科夫方法相似性水平为0.998、0.989和0.994,而传统方法的相似性水平则为0.788、0.036和0.992.因此其更符合实际道路的行驶工况.