鸡滑液囊支原体致病模型建立与灭活疫苗免疫效果评价

为科学评价鸡滑液囊支原体(MS)灭活疫苗的免疫效果，本试验选用3株田间流行的MS菌株(LHMS07、LHMS105和LHMS106),通过爪垫、静脉、气囊注射3种途径和不同攻毒剂量摸索建立SPF鸡攻毒致病模型的方法，并以建立的模型为基础，于攻毒后21 d根据临床病变评分和爪垫肿胀鸡只比例综合评价A和B两种商品化灭活疫苗的免疫效果。结果显示，本试验所建立的攻毒模型为SPF鸡爪垫注射0.2×10⁵CCU的LHMS106菌株，该模型可致试验鸡爪垫肿胀率达100%;疫苗效果评价试验中，攻毒对照鸡只临床病变评分均值为3.4分，爪垫肿胀鸡只比例高达100%;A疫苗和B疫苗免疫后，鸡只临床病变评分均值分别降低至0.5分和1.0分，爪垫肿胀鸡只比例分别降低至12.5%和37.5%。结果表明，养殖场需要科学选择MS灭活疫苗，尤其需要以流行的强菌株建立相对稳定可靠的攻毒模型进行免疫保护效果评价。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白单克隆抗体制备及抗原表位鉴定

为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白单克隆抗体，将PRRSV类NADC30毒株FJ1402的M蛋白胞外区基因与TAT穿膜肽基因融合，密码子按大肠杆菌偏嗜性优化，构建了大肠杆菌表达质粒，制备获得重组M蛋白。取6周龄雌性BALB/c小鼠免疫重组蛋白，将脾脏淋巴细胞和SP2/0细胞融合，用间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞株，获得4株分泌M蛋白抗体的杂交瘤细胞株。其中1E7、2F7、3A12的细胞上清液抗体效价为1∶3 200,3G7的细胞上清液抗体效价为1∶800,传至第15代均能稳定分泌抗体。单抗经亚型鉴定可知1E7、2F7、3A12的重链类型为Ig2a, 3G7的重链类型为IgG1,轻链类型都为κ型。经间接免疫荧光试验(IFA)和Western blot鉴定，4株单克隆抗体均可与PRRSV产生特异性反应，鉴定出2个抗原表位，为PRRSV诊断和疫苗研制奠定了基础。     

雷州黑鸭TGF-β1基因遗传多态性及其与产蛋性能的相关性分析

转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)基因是本课题组前期在高产和低产雷州黑鸭群体中通过转录组学测序分析筛选出的可能对雷州黑鸭繁殖性能有重要调控作用的候选基因。为进一步探究TGF-β1基因的遗传多态性，分析其产蛋性能的相关的遗传分子标记，本试验采用PCR扩增技术和直接测序法，检测100只雷州黑鸭群体中的TGF-β1基因的SNP位点，使用SPSS 26.0软件分析TGF-β1基因的遗传多态性位点基因型与雷州黑鸭产蛋性能的相关性。结果显示，在TGF-β1基因的第6个内含子中发现3个SNPs位点与雷州黑鸭的开产蛋重显著相关，分别为I6-2188 C>T、I6-2220 T>C和I6-2235 A>C;I6-2188 C>T位点与开产日龄显著相关；使用Haploview软件对SNPs位点进行连锁分析发现，H1H1单倍型的开产蛋重显著高于H2H2单倍型。综上所述，TGF-β1基因的3个SNPs位点可作为雷州黑鸭繁殖性能的遗传标记。