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以牛支原体p80基因为靶基因,设计特异性引物与探针,优化反应体系,建立了牛支原体TaqMan探针实时荧光定量PCR(TaqMan real-time PCR)检测方法,并对该方法进行了特异性、敏感性、重复性评估以及临床样本检测。结果显示,特异性试验中,牛支原体2个菌株Cq值均小于18,其余13个非牛支原体菌株Cq值均大于36;敏感性试验中,最低可检3.89拷贝/μL靶DNA,是普通PCR的10~4倍(普通PCR 3.89×10~4拷贝/μL);重复性试验中,组内、组间重复的变异系数均小于1%;44份牛的临床样品利用TaqMan real time PCR检出6份阳性(阳性率为13.64%),分离培养鉴定检出7份阳性,普通PCR检测全部阴性。本研究建立了一种敏感、特异、稳定的牛支原体TaqMan real time PCR检测方法,可用于牛支原体的快速诊断和核酸定量检测。 相似文献
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牛支原体疫苗的研究进展 总被引:2,自引:2,他引:0
牛支原体(Mycoplasma bovis,M.bovis)是一种造成全世界范围内育肥牛和奶牛多种疾病综合征的重要病原体。临床症状主要包括长期性肺炎及多发性关节炎(CPPS)、呼吸道疾病综合征(BRD)、乳腺炎及生殖器官疾病。牛支原体能感染多种组织和器官,也能从健康的牛体内分离,是威胁畜牧业生产的主要病原体。由于临床上抗生素治疗效果不佳,预防或控制牛支原体感染最好的选择是研发有效的商业可用的疫苗。牛支原体疫苗的研究已历经多年,虽然存在很多问题,但也取得了一定进展。文章对牛支原体弱毒疫苗、灭活疫苗及亚单位疫苗的研究进展进行了总结,并讨论了疫苗设计的优化方案,为合理设计和研发有效的牛支原体防控技术提供参考。 相似文献
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牛支原体致病机理的研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
正支原体(Mycoplasma)是最小、最简单的能够自我复制的原核生物,在自然界中分布广泛,其中一些种属是许多动物、植物以及人类的病原体~[1]。支原体是由有细胞壁的细菌(更确切地说是真细菌中的革兰氏阳性菌)进化而来。至今被确定的支原体已超过200种,至少有20种可以感染牛~[2]。牛支原体是能够感染牛的一种非常重要的病原体,1961年在美国首次被分离~[3]。相较于其它支原体,牛支原体具有很高的宿主特异性,目前在养殖牛、北美野牛 相似文献
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9种中药成分对小鼠免疫细胞活性的影响 总被引:28,自引:5,他引:28
测定了淫羊藿多糖、黄芪多糖、当归多糖、蜂胶多糖、板蓝根多糖、淫羊藿黄酮、蜂胶黄酮、人参皂甙和黄芪皂甙9种中药成分对小鼠外周血和脾脏淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞和脾脏NK细胞活性以及抗体生成细胞数量的影响。结果表明,黄芪多糖、淫羊藿多糖、当归多糖、板蓝根多糖、蜂胶黄酮、人参皂甙均能显著或极显著促进ConA(刀豆蛋白A)和LPS(脂多糖)诱导的小鼠外周血和脾脏淋巴细胞增殖,黄芪多糖、淫羊藿多糖、当归多糖、蜂胶黄酮、淫羊藿黄酮和人参皂甙均能极显著或显著提高小鼠腹腔巨噬细胞和NK细胞活性,黄芪多糖、蜂胶黄酮、淫羊藿黄酮、人参皂甙和淫羊藿多糖、黄芪皂甙极显著或显著增加小鼠的抗体生成细胞数。结果表明,9种中药成分对小鼠免疫细胞具有不同的刺激能力,这种刺激能力可以作为筛选免疫增强剂的指标。 相似文献
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绵羊和山羊霉形体病研究概述 总被引:7,自引:0,他引:7
绵羊和山羊霉形体病(Mycoplasmal diseases of sheepandgoats),是一类疾病的总标,泛指由霉形体侵入机体引起的绵羊和山羊的多种急性或慢性、传染性疾病。世界上所有养羊国家和地区都有不同种类的羊霉形体病发生,临床表现包括乳房炎、肺炎、胸膜炎、关节炎、角膜结膜炎、败血症甚至怀孕羊流产等,有些羊霉形体病可以导致重大的经济损失,严重危害养羊业的发展,如山羊传染性胸膜肺炎(Contagious Caprine pleuropneumonia,CCPP)和传染性无乳症(Contagious agalactia,CA)。在我国,羊霉形体病的发生也比较普遍,尤其绵羊和山羊的霉形体性肺炎,已成为影响我国养羊业发展的重要疾病之一。 相似文献
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应用质粒图谱分析大肠埃希氏菌毒力差异的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
对1株无致病性鸡源大肠埃希氏菌(O21)和5株已知毒力强弱的大肠埃希氏菌(O2、O1、X2、148和O78)进行质粒图谱(PP)分析。结果表明这6个菌株属于不同的6种质粒谱型,其毒力的强弱与其所携带质粒的数量和大小有关,但不同毒力株间也有少数几条相同大小的谱带,试验结果表明PP图谱法可作为大肠埃希氏菌分型和鉴别其毒力的间接分子生物学方法。 相似文献
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九种中药成分对体外培养小鼠淋巴细胞功能的影响 总被引:7,自引:0,他引:7
为进一步探索黄芪多糖等9种中药成分免疫增强活性的作用机理并比较各成分之间免疫增强活性的强弱,在体内试验的基础上,用脾淋巴细胞增殖反应和抗体夹心酶联免疫吸附试验测定了它们对体外培养的小鼠淋巴细胞功能的影响。结果表明,人参皂甙、蜂胶黄酮、黄芪多糖、淫羊藿黄酮、淫羊藿多糖都能显著地直接或协同ConA刺激脾和外周血淋巴细胞增殖,也能显著增加LPS诱导的脾淋巴细胞增殖活性和显著升高体外培养的小鼠脾淋巴细胞产生的IgG水平;当归多糖能协同ConA和LPS的诱导活性,提高小鼠脾淋巴细胞体外培养系统的IgG水平;黄芪皂甙能直接和协同LPS刺激淋巴细胞增殖,板蓝根多糖则仅能促进LPS的诱导活性,蜂胶多糖的作用则均不明显。 相似文献
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山羊传染性胸膜肺炎(contagious caprine pleuropneumonia,CCPP)是由山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,MCCP)引起的山羊急性或慢性呼吸道传染病,其病原MCCP的分离培养困难,同丝状支原体簇其他成员之间具有相似的生化和血清学性质,因此用传统的病原学和血清学方法无法对其进行准确鉴定。而基于PCR的分子检测技术,凭借其特异性高和敏感性强等诸多优点已被广泛应用于疾病的早期临床诊断。本文综述了CCPP的分子诊断方法,以期为该病的防治提供技术参考。 相似文献