黄皮胚培养研究

对黄皮[Clausenalansium(Lour.)Skeels.]3个品种(郁南无核黄皮、鸡心黄皮和甜黄皮)开花后10～60d的幼胚进行了离体培养。结果表明,在WPM+CH0.50g/L+PVP1g/L(或AC0.3%)+AgNO310mg/L+GA30.25mg/L+BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L上,花后10～23d的幼胚只形成愈伤组织,但以花后20d的幼胚愈伤组织形成率最高、褐化率低、生长较旺盛;花后30d的幼胚有11%～26%已能发育成苗,此后幼胚的成苗率随胚龄增加而升高,花后60d幼胚的成苗率在50%～73%。鸡心黄皮的愈伤组织诱导率最高,其次是甜黄皮,无核黄皮最低;无核黄皮愈伤组织褐化率最高,其次是鸡心黄皮,而甜黄皮的最低。在适宜的培养基(WPM+CH0.50g/L+AC0.3%+AgNO310mg/L+GA30.25mg/L+BA1.5mg/L+NAA或IBA1mg/L)上,黄皮愈伤组织能正常继代和增殖,生长调节剂是促进增殖的主要因素,但褐化、生长缓慢、很难分化仍是黄皮组织培养的主要难题。     

5个黄皮品种实生苗倍性鉴定

酸解去壁及低渗处理后,对根尖细胞进行压片,对从城黄皮、岐山屈督黄皮、甜黄皮、鸡心黄皮和郁南无核黄皮等5个品种的实生苗进行倍性鉴定,结果显示,它们均为二倍体,2n=2x=18,未发现随体、多倍和混倍现象。     

3个也门铁品种高效离体繁殖体系的建立

以3个也门铁(Dracaena fragrans)品种(金心也门铁、金边也门铁和普通也门铁)茎段为材料,研究了植物生长调节物质、基本培养种类、AgNO3、栽培基质等因素对其离体再生的影响.结果表明:茎段在MS 3.0 mg/L BA 0.3 mg/L IAA 2.0 mg/L AD上,腋芽萌发生长的同时也部分启动腋芽基部周围茎段组织的分化;在MS 3.0 mg/L BA 0.3 mg/L IAA上培养1代,每外植体平均分化出长1 mm以上的不定芽5～6个.不定芽在MS 1.0 mg/L BA 0.1 mg/L IAA 3.0 mg/L AgNO3上的增殖率在390%以上.将高度1.2 cm以上的不定芽转至MS 0.05 mg/L BA 0.05 mg/L IAA 1.0?上壮苗培养1代,芽的高度和粗度增加1.5倍以上,平均株高约3.5 cm.将高度3 cm以上的不定芽转入1/2MS 0.5mg/L IBA上诱导生根,最后将幼苗移至等质量的椰糠、泥炭土、珍珠岩上生长45 d,3个品种苗高分别在15,16,10 cm以上.由此建立的也门铁离体繁殖体系,通过2年多的生产实践检验,其启动率、不定芽分化率、生根率、移栽成活率均能稳定在98%以上.3个品种在启动、不定芽分化、增殖、生根、移栽等过程中表现出相似的规律,尤其以金心也门铁和普通也门铁比较接近,但金边也门铁分化率较高而苗生长势差.避免脱分化形成愈伤组织以及减少或阻止愈伤组织再分化是减少金心也门铁和金边也门铁这类嵌合体品种发生变异的关键之一.     

经济林木离体培养研究进展

为了全面了解经济林木离体培养现状和找出离体培养的规律,概述了经济林木胚胎培养,器官培养,愈伤组织培养,细胞悬浮培养、原生质体培养,原生质体融合和人工种子等方面的研究现状,到目前为止,已离体培养成功的经济林木种类有５０余种,其中,原生质体培养成功的种类不足１０种,并指出,经济林木愈伤组织再生体系的建立是细胞培养、原生质体培养和原生质体融合的基础,原生质体培养体系的建立对各种遗传操作和利用生物技术培育     

枣树原生质体分离条件的研究

枣树原生质体分离研究是其原生质体培养与融合、外源遗传物质转化等研究的基础工作。用胚性悬浮培养细胞、细粒状胚性愈伤组织、未细切愈伤组织和已细切愈伤组织等４种材料进行原生质体分离。结果表明,枣树胚性悬浮培养细胞是最佳起邕材料,用浓度为１０ｇ／Ｌ纤维素酶＋１ｇ／Ｌ离析酶＋ＣＰＷ盐（１３２０ｍｇ／Ｌ ＣａＣｌ２·２Ｈ２Ｏ和１００ｍｇ／Ｌ ＫＨ２ＰＯ４·Ｈ２Ｏ组成的混合液）＋０．７ｍｏｌ／Ｌ甘露醇组成的混合     

根癌农杆菌介导反义ACC合成酶基因对枣树的转化

以枣树鲜食品种鸡蛋枣为材料,通过根癌农杆菌介导ACC合成酶反义基因转化．得到了转基因植株．预培养1d的枣树幼嫩茎段经根癌农杆菌感染后共培养3d．转移至分化选择培养基MS(1／2NO3) 0．15mg／L NAA 1．75mg／L．ZT 10mg／L Km 500mg／L Carb上诱导产生不定芽,将抗Km不定芽先后在15mg／L Km的生长、增殖和生根培养基上继续选择．诱导成完整植株．经PCR检测从抗Km植株中选择到7株阳性植株．进一步经Southern杂交证实有6株外源基因已整合到了枣树基因组中．Real—time PCR定量检测表明,ACC合成酶反义基因在5株转基因植株中得到表达．