应用SYBR Green I的Real-time PCR方法定量检测空肠弯曲杆菌

空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)被认为是人类主要食源性病原菌之一。由于空肠弯曲杆菌特殊的生长条件和容易进入不可培养但存活的状态(Viablebutnonculturable,VNC),所以传统的生化鉴定结果不一定可靠,并且是一项费时而繁琐的工作。核酸检测方法的出现为空肠弯曲杆菌的检测带来了方便。本文基于LightCycler为平台,利用SYBRGreenI染料能特异与双链DNA结合而发荧光的特性,建立一种Real-timePCR方法来定量检测空肠弯曲杆菌。用该方法检测时,发现所有空肠弯曲杆菌(11株)都呈阳性,所有其它弯曲菌(3株)和其它菌株(5株)都是阴性。整个检测过程60min内可以完成,检测限度为5CFU,标准曲线的相关系数为1。结果表明基于SYBRGreenI的定量PCR方法既为空肠弯曲杆菌提供了一种特异、敏感、快速和简洁的定量检测方法,又为研究空肠弯曲杆菌致病机理提供了一种重要方法。     

多重PCR检测猪瘟病毒、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒

根据猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)3种病原体的基因保守序列，分别设计了与CSFV的E2基因、PPV的VP2基因和PRV的gⅡ基因序列互补的3对引物。用这3对引物对人为混合的样品中的PPV和PRV的DNA模板及CSFV反转录后的cDNA模板进行多重PCR扩增和多重PCR反应奈件的优化，结果同时得到3务与试验设计相符的288bp(CSFV)、575bp(PPV)700bp(PRV)特异性条带；敏感性检测结果表明，该多重PCR可以检测到14．5ng／L的CSFV、27．1pg／L的PPV、31．4ng／L的PRV的核酸模板。     

预应力薄腹梁质量事故的分析及鉴定

阐述了某工程由于施工原因，导致预应力混凝土工字形屋面梁强度不足的预制构件的检验鉴定过程和方法。采用回弹法推定混凝土实际强度；通过静载试验测试构件的实际挠度、抗裂和承载能力。分析了导致混凝土强度不足的原因。     

甜荞产量性状相关性分析

研究表明:提高甜荞产量的关键在于提高甜荞的结实率;在选育甜荞新品种时,不宜选择高秆品种;选择当地最适宜的品种,既要注意品种的产量稳定性,又要考虑品种的结实特性。     

树木挥发物对植食性昆虫的诱导抗性

树木挥发物质对植食性昆虫取食，产卵所产生的诱导抗性是树木与昆虫的长期协同进化过程中的必然结果，树木与植食性昆虫之间发展了一套互相调节，自身开拓资源，产生生存对策的复杂相互关系，本文着重阐明了树木与植食性昆虫的互相策略，诱导抗性的生物化学基础以及诱导抗性在调节植食性昆虫种群中的重要性。     

猫鼻气管炎病毒、怀状病毒、泛白细胞减少症病毒的分离及其其形态学观察

根据病毒的理化特性，从猫三联活疫苗中分离出猫鼻气管炎、猫西洋太和猫泛白细胞减少症病毒；筛选出每种病毒敏感的细胞，并将该3种病毒分别分别在其中传代与扩增；通过电镜观察此3种病毒的形态学特征及其在宿主细胞内增殖部位、分布情况等，并以此对猫3种病毒进行了初步鉴定。     

Genotype evaluation,muscle histopathology and ultrastructure in a Duchenne muscular dystrophy animal model

AIM: To evaluate the genotype , muscle histopathology and ultrastructure in dko mice. METHODS: Dystrophin/Utrophin-deficient double knockouts (dko) mice were obtained from university of Oxford, UK. Genotype of filial generation of heterozygote was evaluated by PCR-SSP. HE staining and fluorescent immunohistochemistry by SABC-Cy3 were used to detect striated muscle of dko mouse, and the muscle ultrastructure was observed by transmission electron microscope(TEM). RESULTS: In 112 filial generation mice, there were 28 mdx (25.0%), 26 dko (23.2%) and 58 heterozygote (51.8%), which coincided with the law of Mendelian inheritance. HE staining showed that the myocytes were not very uniform, there were phenomenon of round outline, centrally nucleated fibers, widening interspace, inflammatory cell infiltration and connective tissue proliferation in dko mice. There were no any immunofluorescent expression of dystrophin and utrophin in sarcolemma in dko mice. TEM showed sarcolemma breakage, separation and edema, and loose myofibril texture, inflammatory cell infiltration and connective tissue proliferation in dko mice. CONCLUSION: PCR-SSP is a very quick and accurate way for genotype evaluation of filial generation. The pathophysiology of dko mouse was very similar to Duchenne muscular dystrophy (DMD), and dko mouse is an ideal animal model for study of DMD clinical therapy.     

秦安大地湾遗址骨器研究

一、遗址概况、研究材料与方法大地湾遗址位于甘肃省秦安县城东北45公里处的五营乡邵店村东南,地处北纬35°～35°0'04",东经105°54'～105°55'06".     

试论农村家庭养老的可持续发展

家庭养老是目前农村的主要养老方式。相关的研究主要集中在家庭养老弱化的争论和原因分析以及家庭养老向社会养老过渡的必要。无人提出家庭养老的可持续发展问题。家庭养老长期存在具有客观性,保持其可持续发展具有重要的实践意义。本文在分析家庭养老可持续发展的必要性和可行性基础上,提出了具体的促进策略。