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通过检测肺与肺微血管内皮细胞(PMVEC)Ⅳ型磷酸二酯酶(PDE4)的表达及其活性,探讨入肺经中药对PMVEC环腺苷酸(cAMP)磷酸二酯酶(PDE)活性的影响,为筛选作用于PMVEC的PDE4抑制剂类抗炎药积累资料。本试验采用RT-PCR测定PDE4的表达,应用高效液相色谱(HPLC)检测酶反应前后大鼠肺组织与PMVEC的cAMP变化,计算PDE活性。结果显示:PDE4A、4B、4C、4D在肺与PMVEC内均有表达;17味入肺经清热药均对肺组织cAMP-PDE酶活性有不同程度的抑制作用,其中黄芩、黄药子、青蒿抑制率较高对肺组织酶分别为:75.37%、72%、61.26%,对PMVEC分别为:66.1%、63.54%、59.39%。由此可见,PDE4所有亚型在肺与PMVEC内均有表达;黄芩、黄药子、青蒿等入肺经的清热药能够抑制肺组织和PMVEC内cAMP-PDE活性;以cAMP-PDE活性为指标,有望筛选出其特异性PDE4抑制剂,并揭示入肺经清热药的作用机制。 相似文献
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【目的】 研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)单独和联合脂多糖(LPS)刺激对肺脏募集中性粒细胞(Neu)的影响, 以及猪肺微血管内皮细胞(MVECs)在其中的作用。【方法】 取约10日龄仔猪的肺脏组织, 采用Ⅱ型胶原酶消化和差速贴壁法, 分离培养原代MVECs, 采用密度梯度离心法分离猪外周血Neu; 以PRRSV HN株或PRRSV-LPS刺激Neu和MVECs后, 将Neu加入培养MVECs的培养板, 孵育1 h, 4%多聚甲醛固定, 瑞氏染色, 观察并计数分析各组黏附的Neu数量; 采用免疫细胞化学染色法检测MVECs对P-选择素和E-选择素的表达; 采用虎红溶液染色法测定分析P-选择素和E-选择素抗体封闭MVECs时, PRRSV HN株或PRRSV-LPS刺激对Neu黏附于MVECs数量的影响。【结果】 分离培养的MVECs呈CD34免疫荧光染色阳性, 阳性率约为92%;PRRSV HN株刺激18 h, 黏附于MVECs的Neu数量显著增加(P<0.05);PRRSV-LPS联合刺激时, 黏附的Neu数量显著多于LPS单独刺激(P<0.05);PRRSV或PRRSV-LPS刺激Neu和MVECs二者时, 黏附Neu数量的增加比单独刺激MVECs或Neu更明显; 免疫细胞化学染色显示, MVECs强阳性表达P-选择素和E-选择素; 用P-选择素和E-选择素抗体封闭MVECs时, PRRSV或PRRSV-LPS刺激诱导的Neu黏附增加呈不同程度下降, E-选择素封闭时具有显著差异(P<0.05)。【结论】 PRRSV感染能促进Neu与MVECs黏附, 亦能增加后继LPS刺激时黏附的Neu数量, MVECs表达的E-选择素是介导PRRSV致Neu黏附增加的重要分子之一。 相似文献
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大肠杆菌中产肠毒素大肠杆菌(ETEC)对幼畜消化道有致病性,初生幼畜特别易感,1980年Bergland报道,从断乳前腹泻仔猪中分离到ETEC的几率为45.6%,其频度比球虫(23%)和轮状病毒(20.9%)感染的总和还多。所以对产肠毒素的研究是非常必要的。本文就产肠毒素对微循环和微血管内皮细胞功能的影响作以下综述。一产肠毒素简介产肠毒素是ETEC在体内或体外生长时产生并分泌到胞外的一种蛋白质性毒素,按其对热的耐受性还可分为热敏感肠毒素(heat-labiletoxinLT)和热稳定肠毒素(heatstabletoxinST)。LT对热敏感,65℃加热30min既被灭活。LT全毒素分… 相似文献
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<正>中医认为脾的主要生理功能是主运化,脾健运则饮食物精微物质消化旺盛,脾不健运,则消化、吸收、运输等功能失常。近几年来对脾实质的研究来看,认为脾概括了现代医学消化系统的大部分功能。现代医学认为胰腺是兼有内外分泌功能的腺体。 相似文献
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