精液中猪细小病毒DNA三种提取方法效果比较

猪精液中含有高浓度的蛋白质,因此提取高纯度DNA较为困难;试验分别用水煮法、异硫氰酸胍法和Trizol法三种方法对连续稀释梯度猪精液提取猪细小病毒DNA,应用Taqman荧光定量PCR技术评价提取效果并加以对比。结果发现Trizol法可以提取出高纯度的DNA,但因Trizol试剂价格昂贵,不适用临床检测;比较另外两种方法,水煮法较异硫氰酸胍抽提法更为有效,是一种迅速、简便、经济、高效的DNA提取方法,适合于临床大量样品的检测。     

浅谈非音乐专业音乐欣赏教学的几个过程

在非音乐专业开设音乐课程,其目的不是培养专业音乐人才,而是培养学生的审美情趣、提高其音乐欣赏能力、加强其艺术修养。音乐欣赏能力是指人们对音乐美的感受能力和对音乐作品内容的理解能力,在音乐欣赏教学过程中,如何引领学生徜徉在美妙的音响世界里,心灵受到撼动,实现理性思考,笔者认为音乐欣赏教学应注重四个教学过程:了解掌握基本的音乐语言,把音乐形象具体化,注重音乐作品中的"情",挖掘音乐作品中的"人文精神"。     

多元微肥浸种对马铃薯增产效应的试验

１ 前 言 马铃薯是陕北黄土高原丘陵沟壑区粮菜兼用型作物,其收获好坏对当地人民生活影响很大。延安市常年种植马铃薯面积达５万多ｈｍ~２,近年来已新建立许多马铃薯生产基地,取得了明显的经济效益和社会效益。为了探索简便有效的栽培增产措施,我们进行了马铃薯多元微肥浸种试验。２ 材料与方法 试验设在延安市农科所旱川地,供试土壤为黄绵土,有机质１．０５％,全氮０．０６７％,速效Ｎ、Ｐ、Ｋ分别为４８ｍｇ／ｋｇ、２０．８ｍｇ／ｋｇ、８８ｍｇ／ｋｇ。供试品种为脱毒克新１号,前茬作物玉米,每ｈｍ~２底肥用当地腐熟圈肥２２…     

复合RT-PCR检测猪乙脑病毒和猪流感病毒方法的建立

根据GenBank上已发表的猪乙脑病毒(JEV)的E基因序列和猪流感病毒(SIV)的NP基因序列,设计合成了2对特异引物,分别建立了JEV和SIV的单项RT-PCR诊断方法,通过对扩增条件的筛选,最终成功地建立了JEV和SIV的复合RT-PCR诊断方法,利用一次RT-PCR反应,即可同时扩增JEV的349 bp和SIV 155 bp的特异性片段,而猪瘟病毒(HCV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、正常细胞(PK-15)核酸扩增结果为阴性,对JEV和SIV的最低检出量分别为100和10 pg的cDNA. 该方法适合对JEV和SIV的联合检测和鉴别诊断.     

猪肺炎支原体诱导家蝇幼虫抑制性消减文库的构建

采用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)构建猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumonia,Mhp)诱导家蝇幼虫后产生差异表达基因的消减cDNA文库,并利用反向Northern杂交技术获得差异基因.结果表明,随机挑取的阳性克隆的大小均为200～750 bp,通过斑点杂交技术共筛选出186个差异基因片段,对其克隆、测序及同源性分析后鉴定出20种编码蛋白的基因片段和21个无同源序列.家蝇幼虫经猪肺炎支原体诱导后产生与抗病原体相关的基因及大量的未知基因.     

一例猪圆环病毒病的诊断

2007年4月洛阳市某猪场发生一例猪圆环病毒病.根据猪圆环病毒ORF2基因序列设计、合成1对引物,应用PCR技术对病死猪的血液和脾、肺、肾和淋巴结等内脏组织进行PCR扩增,均能扩增出预期大小的目的片段.结合流行病学调查、临床症状和病理剖检变化,确诊为猪群发生猪圆环病毒Ⅱ型感染.     

“施地佳”土壤改良剂对盐渍化土壤的改良效果

对含盐量为16.56 g/kg、pH值8.38的中度盐渍化棉田施用不同浓度的液体土壤改良剂,调查出苗情况、收获株数、单株成铃、单铃重、籽棉产量,同时化验分析了不同时期土壤0～40 cm深度混合土样的含盐量和pH值。结果表明:施用"施地佳"土壤改良剂,明显降低了土壤的pH值和含盐量,从出苗率、产量和经济效益等综合分析,施用量在1～2L/667 m2之间最适宜,施用量低于1 L/667 m2,土壤改良效果不明显,高于2 L/667 m2不仅影响出苗,还会抑制棉苗生长,影响出苗。     

马铃薯喷施丰产宝增产效应试验

888牌丰产宝是一种新型植物生长调节叶面肥，它含有植物所必需营养元素N、P、K微量元素、增效剂、助剂，经科学加工而成。适用于块根、块茎类作物，能促进发根，提高叶绿素含量，增强光合强度，加速光合产物向块根、块茎部位转移，从而提高产量。为探索丰产宝在我市薯类生产中的增产机理，我们于2002年对这种植物生长调节复合肥进行了试验。     

延安市整顿农药市场秩序措施得力

陕西省延安市植保植检站在对全市４个县９个乡（镇）１７家农药经营单位及摊点的１３６个农药产品抽查中 ,合格标签的合格率为１７．６% ,不合格标签占检查总数的８２．４%。其中假冒、伪造、盗用和无农药登记证号的标签占检查总数的２５ % ;商品名未登记、通用名未标明以及任意扩大适用作物和防治对象３种问题并存的不合格标签占抽查总数的５．９% ;毒性标志随意标低和不清的占检查总数的６．６%。在被抽查产品中 ,经目测、手感及简单仪器检定 ,初步认定产品质量合格率９１．２% ,在受检的１７家经营单位中 ,有上岗证的１４家 ,占检查总数…     

实际生产中化制法无害化处理病死猪的病毒杀灭效果

为评估实际生产应用中化制法无害化处理病死猪尸体杀灭病毒的效果,选取3个应用化制法工艺处理病死猪尸体的规模化猪场,采集无害化处理前和处理后的样品,利用实时荧光定量PCR（FQ-PCR）检测方法和病毒分离培养法,对无害化处理前后的样品进行非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒Ⅱ型、猪伪狂犬病毒、口蹄疫病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒等9种病毒的核酸检测,通过处理前后病原核酸检出情况的对比,评估该工艺在实际生产应用中病毒杀灭效果。结果显示：化制法处理前病死猪尸体样品中的部分病原可在细胞培养物中检出且可增殖传代,说明存在活病毒;而处理后样品的细胞培养物中均检不出病原核酸,说明病原均被彻底杀灭。结果表明,在实际生产应用中,化制法无害化处理病死猪尸体可彻底杀灭病毒,达到了无害化处理目标。