禽类Toll样受体的分子进化与作用机制研究进展

Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是先天免疫系统重要的模式识别受体(pattern recognition receptors,PRR).TLRs通过与病原微生物的病原相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns,PAMPs)相结合,活化相关信号途径,引发抗病原体防御反应、炎症反应以及活化T细胞等免疫效应.目前已经识别了10个禽类Toll样受体,包括与其它脊椎动物在结构上具有高度同源以及作用模式相对保守的TLR1\6\10、2、3、4、5、7和21,以及禽类所特有的chTLR15.本文主要阐述有关禽类Toll样受体的分子进化以及独特的作用方式研究的最新进展.     

超滤膜分离纯化花生壳中水溶性膳食纤维

为探索花生壳中水溶性膳食纤维(SDF)的有效分离纯化方法和效果,选择适宜的膜组件,采用不同截留分子量的超滤膜以及优化膜分离过程的操作条件,对SDF提取液进行超滤分离,试验结果表明:选用PS-30聚砜膜,在压力为0.08MPa、料液比为1:75g/mL、温度为30℃时,分离纯化效果最为显著。其中,膜通量达到127.2L/(m2·h)、SDF的得率达到67.56%,非淀粉多糖(NSP)的质量分数由49.85%提高到92.36%,蛋白质量分数从5.53%降到0.92%。与传统的提取法比较,超滤膜分离纯化花生壳水溶性膳食纤维具有生产周期短,成本低,产品纯度高等优点。     

花生△12-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及序列分析

根据已报道的△12-脂肪酸脱氢酶基因(FAD)的氨基酸保守序列设计引物进行RT-PCR扩增,得到花生△12-脂肪酸脱氢酶基因881bp部分cDNA序列,然后通过快速扩增cDNA末端技术(RACE),向两端延伸得到1410bp的花生△12-脂肪酸脱氢酶基因全长cDNA序列。序列分析表明有一个长1140bp、编码379个氨基酸残基的开放阅读框,所编码蛋白质的大小约为43kDa。推测的氨基酸序列具有膜整合蛋白酶特异性的3个组氨酸保守区;氨基酸疏水性分析结果表明,所编码的氨基酸序列存在2个具有膜固定蛋白(membrance-anchored protein)重要特征的疏水结构,2个疏水区共跨膜4次,这些特性表明所获得的序列为△12-脂肪酸脱氢酶基因。     

花生种子总RNA提取的一种有效方法

从植物中提取RNA的方法有多种,由于花生种子富含脂肪、蛋白质、多糖和酚类化合物,有些方法并不适于花生种子RNA的提取.本文设计了一种从花生种子中分离高质量总RNA的方法,并提取了花生的根、茎、叶、种子等不同器官的RNA.结果证明,利用该方法提取的花生种子总RNA质量较高,完全能满足后续的分子生物学研究.同样也适于花生根、茎、叶总RNA的提取.     

虾青素合成关键酶基因bkt植物表达载体的构建 及对玉米的遗传转化

虾青素是一种具有极强抗氧化活性的类胡萝卜素，具有广泛的应用价值。β-胡萝卜素酮化酶（Bkt）是由玉米黄素合成虾青素生物合成途径中的关键酶。采用La Taq DNA聚合酶用PCR的方法从pET-28a（+）bkt中扩增得到bkt基因，用bkt基因替换pBI221中的GUS基因形成含有CaMV 35S启动子和NOS终止子的bkt基因表达盒，然后插入植物表达载体pCAMBIA1301的多克隆位点，最终获得带有选择标记和报告基因的植物表达载体pCAMBIA1301-bkt。通过农杆菌LBA4404介导将其转化进入玉米自交系齐319，转化后的愈伤经GUS组织化学染色分析表明bkt基因已经转入玉米胚性愈伤组织     

利用花生油下脚料生产生物柴油关键技术研究获得突破

当前国家面临的人口、资源和环境压力越皋越大。时于国家而言，能源安全是仅次于国土安全但又同样极为重要的国家战略安全问题，由于石油、天然气等石化燃料资源短缺导致的液体燃料供应紧张，以及石化燃料大量消费导致的生态环境污染的重大问题，已引起世界各国政府、社会各界的广泛关注。新型、清洁能源的开发与利用，一直是各国政府极为关注的重大战略问题，许多国家都制定了相应的研究开发计划：如日本的阳光计划、印度的绿色能源工程、美国的能源农场、巴西的酒精能源计划，直至近期美国的联邦生物能源与生物质材料战略框架等。     

7个水稻品种苗期耐盐性的遗传分析

采用完全双列杂交设计研究了 7个耐盐性不同的水稻品种苗期耐盐性遗传机制。在水培条件下 ,将亲本和F1世代的 3～ 4叶期幼苗用 8g·L-1的NaCl胁迫处理 10d后 ,测定根系Na+ /K+ 和盐害级别 ,利用主位点组加性显性模型 ,采用向前逐步回归方法对 2个耐盐指标进行遗传分析。结果表明 ,根系Na+ /K+ 的遗传变异符合 2个主位点组 +微位点组的遗传控制模型 ,盐害级别的遗传变异符合 3个主位点组 +微位点组的遗传控制模型。在决定水稻根系Na+ /K+ 和盐害级别的遗传变异中 ,主位点组的加性效应和显性效应共同起作用。     

虾青素合成关键酶基因bkt植物表达载体的构建 及对玉米的遗传转化

虾青素是一种具有极强抗氧化活性的类胡萝卜素,具有广泛的应用价值。β-胡萝卜素酮化酶(Bkt)是由玉米黄素合成虾青素生物合成途径中的关键酶。采用LaTaqDNA聚合酶用PCR的方法从pET-28a( )bkt中扩增得到bkt基因,用bkt基因替换pBI221中的GUS基因形成含有CaMV35S启动子和NOS终止子的bkt基因表达盒,然后插入植物表达载体pCAMBIA1301的多克隆位点,最终获得带有选择标记和报告基因的植物表达载体pCAMBIA1301-bkt。通过农杆菌LBA4404介导将其转化进入玉米自交系齐319,转化后的愈伤经GUS组织化学染色分析表明bkt基因已经转入玉米胚性愈伤组织。     

盐胁迫浓度和胁迫时的温度对水稻耐盐性的影响

 在水培条件下，用5种不同浓度的NaCl溶液对20个水稻品种的3~4叶期幼苗进行盐胁迫处理，10 d后考查不同品种单株盐害级别、苗高、茎叶干重和根系Na[sup]+[/sup]/K[sup]+[/sup]含量比等性状。结果表明，0.5%的NaCl胁迫下，品种间的盐害级别和根系Na[sup]+[/sup]/K[sup]+[/sup]含量比差异最大；0.8%的NaCl胁迫下，品种间的相对苗高和相对茎叶干重差异最大。其中韭菜青、农林72、80 85、洞庭晚籼和丁旭稻为强耐盐水稻品种；Pokkali、IR26、小白芒、勐旺谷、明恢63为耐盐或中度耐盐品种。进一步选择8个耐盐性不同的水稻品种，在3种温度条件下进行苗期耐盐性鉴定，发现在相对低温[昼/夜为(23±3)℃/(15±1)℃\]时，水稻生长缓慢，不同品种的盐害级别和根系Na[sup]+[/sup]/K[sup]+[/sup]含量比均较低；在温度较高[昼/夜为(36±1)℃/(26±2)℃\]时，水稻生长加快，不同品种的盐害级别和根系Na[sup]+[/sup]/K[sup]+[/sup]含量比均增高；只有在适温条件[昼/夜为(30±2)℃/(24±2)℃\]下，水稻生长较快，品种间的盐害级别和根系Na[sup]+[/sup]/K[sup]+[/sup]含量比差别最明显。提出在适温条件下，以0.5%或0.8%的NaCl浓度进行水稻品种耐盐性的筛选和耐盐特性的遗传研究比较合适。     

花生抗氧化水解产物制备及其抗氧化活性研究

研究花生抗氧化水解产物,为进一步研究花生抗氧化肽提供理论基础。本研究运用Box-Behnken设计的响应面试验方法对花生抗氧化水解产物的制备工艺条件进行优化,其最佳制备工艺条件为:经复合多糖酶(Viscozyme L)预处理的花生粕粉,调节pH值8.2,加入4000U·g-1底物的碱性蛋白酶(Alcalase),在50.0℃下酶解94.0min。此工艺下制备的花生抗氧化水解产物对1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)清除率为77.38%。花生抗氧化水解产物的抗氧化活性结果显示,对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除率的IC₅₀值分别为6.65、0.56和7.67mg·mL-1,对铁离子和铜离子螯合率的IC₅₀值分别为8.02和12.39mg·mL-1,对脂质过氧化的抑制率的IC₅₀值为8.45mg·mL-1,铁还原力和钼还原力吸光值为0.5时,所需抗氧化水解产物浓度分别为26.40和4.59mg·mL-1。