安哥拉山羊胚胎冷冻试验

对安哥拉山羊用总量350IUFSH按递减法处理,配种结束后第6天经子宫手术回收桑椹胚和囊胚供冷冻试验.选用1.4mol/L甘油、1.2mol/L和1.5mol/L乙二醇做防冻保护剂,快速冷冻,-36℃投入液氮保存.采用直接水浴或在空气中停留6～10s使胚胎温度回升,再水浴解冻.胚胎解冻后,用0.5mol/L蔗糖PBSS脱除保护剂,移入2%PBSS中,手术移植于发情后6d的适移受体.结果表明,1.5mol/L乙二醇具有良好的冷冻保护作用.在18～20℃空气中使胚胎温度稍回升,再水浴解冻,可降低胚胎解冻过程中热应激导致的透明带破损,移植于适移受体的妊娠率达45.5%.     

SAHA处理供体细胞对山羊克隆胚胎早期发育的影响

为探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂羟肟酸(SAHA)对体细胞和山羊核移植胚胎早期发育的影响,采用不同浓度SAHA处理山羊胎儿成纤维细胞(Goat embryonic fibroblasts,GEFs),并检测其AcH3K9水平、细胞增殖能力、细胞周期及胚胎发育情况、乙酰化水平、多能性基因的表达水平。结果显示,SAHA处理后GEFs的AcH3K9水平显著上升(P0.05),2.5μmol/L SAHA处理浓度即可显著提高GEFs组蛋白H3K9的乙酰化水平;浓度≤2.5μmol/L时,对细胞增殖能力无明显影响;浓度为5.0μmol/L和10.0μmol/L时,细胞活力显著下降(P0.05)。AcH3K9上调会引起G0/G1和S期的细胞比例下降(P0.05)。因此,选择经2.5μmol/L SAHA处理的供体细胞进行核移植。试验组的胚胎卵裂率和囊胚率显著高于对照组(P0.05),其卵裂率接近于卵胞质单精子注射(ICSI)组。试验组的囊胚率乙酰化水平显著高于对照组,且低于ICSI组(P0.05)。与对照组相比,试验组囊胚的Oct4、Sox2和Nanog的mRNA表达水平均上升(P0.05),且均接近于ICSI组。说明,选用2.5μmol/L SAHA处理供体细胞可提高体细胞核移植效率和胚胎品质。     

除去精浆、添加维生素E及水浴平衡对莎能奶山羊精液冷冻效果的影响

主要探讨精液离心、添加VE及平衡方法对山羊细管冻精冷冻-解冻后活力、顶体完整率等的影响,为提高山羊精液冷冻保存效果提供依据.试验1:将鲜精稀释后分为3组,第1组为稀释精液1 000 r/min离心6 min,去掉一半的上清液;第2组用相同的方法反复离心3次,完全去掉精浆;第3组不离心,做为对照.试验2:在稀释液中添加15 g/L VE,以不添加组作为对照.试验3:采用纱布包裹和水浴平衡两种方法.试验结果表明,离心去掉部分精浆组和离心去精浆组精子冷冻-解冻后的活力比不离心组高,差异显著(P＜0.05).精子顶体完整率和畸形率有所下降,但与对照组相比较差异不显著(P＞0.05).离心去掉部分精浆组和离心完全去精浆组相比,精子冷冻一解冻后的活力、顶体完整率和畸形率差异不显著(P＞0.05).冷冻稀释液中添加VE组的顶体完整率显著提高(P＜0.05),畸形率变化与对照组无差异(P＞0.05),精子活力提高效果也不明显(P＞0.05).精液冷冻前平衡方法以水浴法为好,与纱布包裹平衡组相比,水浴平衡组的活力和顶体完整率高(P＜0.05),精子畸形率较低(P＜0.05).可见,精液离心后去掉适量精浆可显著提高冷冻后精子的活力;添加VE可显著提高精液冷冻后精子的顶体完整率;与纱布包裹平衡法相比,水浴平衡法可显著提高精液冷冻后精子的品质.     

重组腺病毒介导的猪瘟 E0基因在山羊乳腺中的表达

为使猪温病毒(CSFV)E0蛋白在奶山羊乳腺中得以合成和分泌,一段上游带有信号肽和His标签序列的CSFVE0基因通过腺病毒穿梭载体被插入到腺病毒质粒中,将此重组质粒转染293A细胞包装得到重组腺病毒Ad-hisE0。为证明其有效性,用Ad-hisE0感染293A细胞,实时定量PCR检测显示E0基因的表达显著提高。用Ad-hisE0分别感染牛乳腺上皮细胞和泌乳期山羊乳腺,SDS-PAGE和Western blot分析结果显示出E0蛋白分别位于26ku和48ku处的2条特异性条带。证实构建的腺病毒Ad-hisE0可以介导重组融合蛋白CSFV E0在山羊乳腺中的表达和分泌。     

山羊重复手术收集胚胎防止粘连方法比较

山、绵羊重复超排和重复手术收集胚胎后生殖系统等易发生粘连,影响供体重复利用率和胚胎移植效率。本研究以波尔山羊作为供体,应用不同的防粘连方案进行供体重复超排采卵后预防粘连效果的比较,以筛选有效的预防粘连方法。采用32%右旋糖酐+肝素(试验组1)和医用几丁糖(试验组2)作为两个试验组,生理盐水冲洗法作为对照组。波尔山羊供体母羊连续超排4次,并重复手术采卵,用不同的防粘连剂进行术后处理比较。结果表明,试验组2使用几丁糖防粘连处理后,供体母羊第4次手术收集胚胎后粘连率只有37.5%,而试验组1和对照组粘连率为100%。使用防粘连剂对于供体母羊的超排效果及可用母羊的胚胎回收率无影响,但是显著提高了供体母羊的超排利用率。应用医用几丁糖防粘连的方法可以有效减少供体母羊的术后粘连率及有效提高供体母羊重复利用率。     

提高养羊企业羊只繁殖效率的技术措施

本文根据生产实践，提出了企业在养羊生产中提高羊只繁殖效率所遵循的原则和综合事措施。从公羊方面、母羊方面、饲养管理等多个层面对提高养羊繁殖效率的途经和技术进行了详细论着重介绍了胚胎移植、诱产双羔、频密繁殖、同期发情处理等提高母羊繁殖产羔率的方法和技术，同时对提高羔羊成活率技术也进行了论述。指出企业提高羊只繁殖效率要从饲养管理和繁殖技术两方面着手，同时应综合考虑企业实际，投资回报等，以取得理想的产羔收获和经济效益。     

哺乳动物配子冷冻保存并应用于珍稀濒危动物保护的技术策略

配子（精子和卵子）冷冻保存是将配子在超低温条件下冷冻,可进行优秀家畜个体和珍稀濒危动物种质资源的长期保存。配子冷冻是珍稀濒危动物种质资源保护、保存和利用的一项重要内容,也是动物种质资源库建设的一项关键技术。本文对国内外精子和卵母细胞冷冻保存利用技术的研究现状进行了详细论述,同时介绍了配子冷冻-解冻后的损伤评估研究,提出了未来我国在濒危珍稀动物配子冷冻保存方面的应用策略和保种建议,以期为我国家畜生物种质资源库建设、家畜种质资源保护和开发利用以及珍稀濒危动物保护提供参考。     

陕北丘陵沟壑区畜牧业发展问题研究

陕北丘陵沟壑区是陕北水土流失最严重的区域,也是国家黄土高原综合治理的主要区域.由于生态建设的需要,以放牧为主的畜牧业面临挑战.本文在对陕北丘陵沟壑区言牧业发展现状和存在问题调查研究的基础上,分析了该区粮食生产对畜牧业的影响,提出了陕北丘陵沟壑区不同种类家畜发展的方向及畜牧业发展总体思路:陕北丘陵沟壑区应以舍饲养羊为主,全面发展各种适宜舍饲的言禽品种;以生态建设和经济发展为目标,促进陕北畜牧业可持续发展.     

陕西省榆林市口蹄疫免疫抗体检测

为评估陕西省榆林市O型、AsiaI型和A型口蹄疫的免疫抗体水平,比较单次免疫和加强免疫后的抗体水平和变化趋势,在陕西省榆林市采集55个规模场和120个散养户强制免疫后的猪、牛、羊血清共计2310份,用液相阻断ELISA法检测口蹄疫免疫抗体。结果显示:羊O型、Asia?型,猪O型,牛O型、AsiaI型和A型口蹄疫平均免疫抗体合格率分别为(57.12±4.8)%、(64.66±4.2)%、(66.46±2.02)%、(56±5.98)%、(57.9±1.66)%和(64.29±4.26)%;规模场中,只有羊AsiaI型和猪O型口蹄疫抗体合格率达到70%以上,而散养户的全部口蹄疫抗体合格率均低于70%,差异极显著(P≤0.01);规模场首免1个月后进行加强免疫,发现抗体合格率全部由低于70%升高至80%以上,差异显著(P≤0.01)。结果表明,榆林市的整体口蹄疫免疫效果较差,只有规模场的羊AsiaI型和猪O型口蹄疫抗体合格率达到70%以上,因此需要对这些免疫不合格畜群进行加强免疫,只有这样方能实现有效的免疫保护。本研究为了解本地区口蹄疫免疫效果,以及免疫程序制定和进一步做好口蹄疫防控工作提供了参考。