禽流感诊断研究进展

禽流感(Avian Influenza AI),是由A型流感病毒引起的一种禽类传染病,是目前危害养禽业最严重的疫病之一。特别是1997年香港发生禽流感病毒感染人的事件,更突出显示了其公共卫生意义。根据AIV的毒力将禽流感分为高致病性禽流感(HPAI)、低致病性禽流感(LPAI)和无致病性禽流感(NPAI)。各种亚型的AIV都可引发NPAI,而LPAI主要是由H9亚型流感病毒所     

重组牛IFN-γ蛋白在昆虫杆状病毒表达系统中的表达、纯化和鉴定

为合成与天然构象相似的干扰素γ蛋白,通过优化干扰素序列的密码子序列,利用杆状病毒表达系统合成真核重组牛IFN-γ蛋白。实验化学合成牛IFN-γ基因,并将该基因克隆至真核表达载体pFastBacHTA中,将构建成功的重组载体与DH10Bac感受态大肠杆菌进行转座形成穿梭载体,穿梭载体质粒瞬时转染至SF9昆虫细胞中,获得重组杆状病毒,最后利用SF9昆虫细胞悬浮培养大量表达目的蛋白。蛋白纯化后经Western Blotting和BOVIGAM牛分枝杆菌IFN-γELISA检测试剂盒检测分析,具有较好的免疫原性和反应原性。研究结果为牛IFN-γ的单克隆抗体制备以及牛结核病临床诊断奠定了基础。     

不同有机肥处理对黄冠梨生长及果园土壤性状的影响

为探明不同有机肥对梨树生长和果园土壤生物性状的影响,通过田间小区试验研究了不施肥处理(CK)、传统施肥(TF)、生物有机肥(BOF)、鸡粪堆肥(CM)及有机无机复混肥(CF)对黄冠梨树地上部生长、产量和品质、土壤微生物量碳氮和矿质态氮含量动态变化的影响.结果表明,(1)各处理均增加了叶面积、百叶重及新梢长度,果实可溶性固形物、可溶性糖含量和糖酸比也有不同程度提高,其中BOF处理效果最好,与CK相比BOF处理单果重和产量分别增加了17.4％和33.9％;(2)与CK和TF相比,其它有机肥处理在整个生育期均增加了土壤微生物数量及微生物量碳氮含量,且两者呈先增加后下降趋势;(3)梨园土壤中的矿质态氮以硝态氮为主,从萌芽期至二次膨大期各施肥处理矿质态氮含量逐渐下降,降幅为78.9％～88.7％,成熟期BOF处理的土壤矿质态氮含量高于其它处理.可见,施用有机肥可以促进树体生长,提高土壤微生物数量,改善土壤供氮特性.     

重大动物疫病应急管理

为建立适合我国实际的预案体系、技术准备、物资储备、工作机制,提高我国重大动物疫病应急管理和处置工作的科学性、时效性和针对性,本研究围绕我国重大动物疫情应急管理理论与实践问题进行深入探讨,系统地研究我国重大动物疫情应急管理的现状、存在的问题,在借鉴发达国家在重大动物疫情应急管理经验的基础上,提出了完善我国重大动物疫情应急管理的政策建议。     

海藻肥料的专利技术研究

本研究综述在专利中海藻用作肥料的处理技术,包括发酵工艺、化学提取工艺、酶解工艺、炭化工艺及包膜工艺,为海藻肥料的进一步发展提供理论基础,从而促进农业生产的环保、高效.     

改造的H5N1流感病毒：是希望还是恐惧

自1997年首次发生H5N1高致病性禽流感病毒感染人事件以来,禽流感病毒不断出现变异,新的流感病毒大流行的阴云一直笼罩着人们。虽然H5N1禽流感病毒感染人的事件时有发生,但这个病毒并没有获得在哺乳动物之间传播的能力。2011年11月,荷兰伊拉斯姆斯大学的Forchier教授和威斯康星大学麦迪逊分校的Kawaoka教授分别投稿Science和Nature杂志上,他们的研究团队分别用不同的试验方法获得了具有能在哺     

不同形态氮素对樱桃番茄果实发育和品质的影响

采用基质营养液共培养法,研究了不同形态氮素及配施对樱桃番茄果实解剖结构、果实生长以及发育过程中与品质有关的生理指标的影响。结果表明:1）与全硝（100% NO3-）处理相比,铵硝配施（75% NO3-∶25% NH4+）处理下果实表皮细胞形状更加规则,排列紧密,且角质层覆盖均匀;全铵（100% NH4+）处理的果实表皮细胞形状不规则,排列疏松,其角质层厚度在幼果期和绿熟期显著低于另两个处理,在成熟期显著增加。2）全硝和铵硝配施处理果实单果重变化一致,成熟期铵硝配施处理单果重略高。花后14 d全铵处理显著降低单果重,抑制植株生长,并缩短生育时期。3）氮素形态显著影响果实发育过程中氨基酸的变化:全硝呈持续下降趋势,铵硝配施先下降后升高又持续下降,全铵则呈W型。不同形态氮素处理下果实总糖含量均先升后降,于花后21 d达到高峰,此时全铵处理的总糖显著高于另两个处理。全硝及铵硝配施处理下可滴定酸度呈单峰曲线,花后28 d达到最高值;全铵处理在花后7 d含量最高,随后逐渐下降。     

牛种布鲁氏菌RpoE2蛋白部分生物学特性研究

为探讨牛种布鲁氏菌sigma因子RpoE2的功能,采用酵母双杂交技术对RpoE2蛋白与anti-sigma因子之间的互作进行研究;通过环境应激试验评价了rpoE2缺失株对强氧化环境、酸性pH、杀菌性阳离子多肽、铁缺乏环境的耐受能力;通过比较亲本菌株和缺失株在巨噬细胞感染模型和小鼠感染模型中的生存能力,研究了rpoE2基因是否与牛种布鲁氏菌毒力相关。结果显示:牛种布鲁氏菌的RpoE2蛋白可以与anti-sigma因子相互作用,牛种布鲁氏菌rpoE2基因缺失后,对各种应激环境的耐受能力均无影响,并且巨噬细胞和小鼠感染模型中毒力均不降低。牛种布鲁氏菌的RpoE2蛋白是一个ECF16家族的sigma因子,并且其与布鲁氏菌的毒力无关。     

腐败梭菌α毒素基因的克隆与序列分析

应用聚合酶链式反应(PCR)技术,从腐败梭菌强毒株C55-1中,扩增出大小为1327bp的腐败梭菌α毒素全基因(csa1327基因),并将其克隆入pMD18-T载体中.转化至受体菌DH5α后,经Amp/IPTG/X-Gal选择培养,提取质粒,PCR和EcoRⅠ/PstⅠ双酶切鉴定,筛选阳性重组克隆.核苷酸序列分析证实,csa1327基因开放阅读框架由1320bp组成,编码440个氨基酸残基.与GenBank中登录的国外Fukushima 5株、Kagoshima 1株、Mie株和44株的α毒素全基因相比,核苷酸同源率分别为100%、99.47%、99.25%和97.67%,推导氨基酸的同源率分别达100%、100%、99.7%和97.06%.表明本实验所克隆的csa1327基因即为腐败梭菌α毒素基因.     

禽流感病毒血凝素基因在大肠杆菌中的表达

采用RT-PCR技术扩增禽流感病毒HAI基因,将HAI结构基因克隆于pGEX-T载体上,测序结果表明插入的片段为HAI目的基因.切下目的基因HAI,重组到含有谷胱甘肽(GST)的融合蛋白原核表达载体PGEX-4T-2,获得的重组质粒经PCR、酶切以及序列分析鉴定,表明HAI基因插入的位置、大小和读码框架均正确.证明成功构建了融合表达载体pGEX-HAI.构建好的重组质粒,经1 mmol/LIPTG诱导,在大肠杆菌BL21中得到了大量表达,经过4 h表达量既达到高峰.融合蛋白GST-HAI的分子量为62KD,以包涵体形式存在.Western-Blot分析表明,融合蛋白能够与H5亚型AIV阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性.