利用单根肌纤维法分离和培养猪骨骼肌卫星细胞及其成肌诱导分化

建立单根肌纤维法体外培养猪骨骼肌卫星细胞的体系,了解其增殖和成肌特性。通过Ⅰ型胶原酶消化,从猪骨骼肌中分离完整的单根肌纤维并培养,用细胞免疫荧光鉴定肌纤维上的卫星细胞,随后对从单根肌纤维上游离出来的卫星细胞进行细胞免疫荧光染色,传代培养,成肌诱导分化和Western blot分析骨骼肌卫星细胞成肌特异性蛋白的表达。结果显示:分离并培养的单根肌纤维上附着有卵圆形的细胞,并随时间的推移,细胞缓慢向外迁移并增殖,卫星细胞特异性标志基因对盒转录因子(Paired protein box,Pax7)和成肌分化抗原(Myogenic Differentiation Antigen,MyoD)免疫荧光染色呈阳性,且阳性率达到90%以上。成肌诱导分化后,细胞开始汇合,并呈方向性生长,最终形成多核肌管,且成肌特异性标志基因Myogenin和myosin heavy chain(MyHC)表达呈阳性。MyoD蛋白高表达于增殖期,而Myogenin和MyHC在进入分化期才表达。该实验成功建立了猪骨骼肌单根肌纤维的体外培养方法并获得了高纯度的卫星细胞,为骨骼肌卫星细胞进行活体移植治疗相关疾病研究提供了实验材料。     

我们是怎样把盐碱滩改造过来的

我们新潮九队地处黄海之滨,东边离海只六、七十里。全队共有52户,262人,108个整半劳动力。在382亩耕地中,棉田占260亩,旱粮田110亩,果树蔬菜12亩,是一个粮棉夹种区。     

微量元素对花生的增产作用

江苏省徐州、淮阴地区大部分为黄河淮河冲积物发育的石灰性土壤,土壤质地较轻,通透性良好,呈碱性反应,微量元素的供给可能不足。     

脂肪组织RNA提取的三种方法比较与改进

脂肪组织单位体积细胞数少,且单位细胞富含脂类RNA含量相对较少（Mersmann,2002）,这增加了从脂肪组织提取RNA的难度.本研究以脂肪组织为材料,比较了几种商品化的总RNA提取试剂盒,优化和改进某些提取步骤,从而得到了符合实验要求的总RNA.     

沿海大队改造利用滨海盐碱地经验

沿海大队地处渤海之滨,与塘沽盐场仅一埝之隔,地势低洼(地下水位一米左右),地下水矿化度30-60克/升,土壤质地为重壤-轻粘土,盐分主要为氯化物,是我市郊区耕地盐碱最重的大队之一。     

Leptin对猪成肌细胞中PGC-1α和UCPs mRNA表达的影响

采用链酶蛋白酶消化法获得猪成肌细胞、肌细胞生成素(MyoG)和生肌决定因子(MyoD)的RT-PCR和Desmin免疫组化染色鉴定猪成肌细胞后,分别研究外源Leptin对猪成肌细胞产热相关基因过氧化体增殖活化受体gamma辅助活化因子α(PGC-1α)和解偶联蛋白家族(UCPs)mRNA表达的影响。对产热相关基因的RT-PCR检测结果表明,30和100nmol/L Leptin均可促进成肌细胞中PGC-1α mRNA表达,100 nmol/L Leptin作用效果显著高于30 nmol/L,且作用24h促进效果明显优于12h作用效果(P<0.05)。30 nmol/L Leptin可明显提高成肌细胞中UCP2 mRNA的表达,且作用24h促进效果明显优于12h处理效果(P<0.05),100 nmol/L Leptin作用效果显著低于30n mol/L Leptin作用效果,但显著高于对照组(P<0.05)。30和100 nmol/L Leptin均不影响UCP3 mRNA的表达(P<0.05)。结果提示,Leptin可能通过上调PGC-1α和UCP2转录,促进成肌细胞能量消耗。     

自拟毛扫荡治疗肺气肿

肺气肿是马属动物常见病之一 ,多由于剧烈奔跑、使役过重、久咳均能引起 ,笔者用自拟“毛扫荡”治疗肺气肿疗效显著。1　病例及治疗 .乐都县马厂乡鲍家村村民张某某饲养的一头骡子前来我站治疗 ,主诉发病一年多 ,经用青霉素、链霉素、中药清肺止咳散、伤力散、理肺散等治疗无效。病畜呼吸困难 ,加快 ,呈二重性呼吸 ,在肋骨弓后形成明显的“息劳沟” ,吸气时鼻孔张开如喇叭状 ,咳嗽频繁 ,第 2心音增强 ,肺部听诊有明显的干罗音 ,诊断为肺气肿 ,笔者用自拟“毛扫荡”治疗 ,第 2天呼吸基本正常 ,看不见“息劳沟” ,咳嗽症状大减 ,笔者用伤力散…     

单核苷酸多态性(SNP)的研究进展和应用

单棱苷酸多态性(SNP)是最新发展起来的第三代分子标记，具有密度高、双等位基因、易实现自动化检测等优点。本文重点介绍了SNP的概念、特点、分析检测技术以及SNP的应用。     

胚胎干细胞研究进展及其应用

胚胎干细胞 (ＥｍｂｒｙｏｎｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌＥＳ细胞 )是从早期胚胎内细胞团 (ＩｎｎｅｒｃｅｌｌｍａｓｓＩＣＭ )或原始生殖细胞 (Ｐｒｉｍｏｒｄｉａｌ ｇｅｒｍｃｅｌｌｓＰＧＣＳ)分离和克隆的具有全能性的细胞[1] 。它具有无限增殖和多向分化的潜能。ＥＳ细胞研究与动物克隆、转基因动物技术相结合可使动物育种发生革命性的变革[2 ] ;更为重要的是ＥＳ细胞研究与组织工程等相结合 ,可以修复人体坏损组织或进行器官移植 ,从而使糖尿病、帕金森、心血管等当今严重威胁人类健康的疾病得到有效治疗[3] 。笔者就ＥＳ细胞的建系、鉴定…