贡水白柚病毒病感染鉴定与脱毒情况简报

贡水白柚(原名宣恩白柚)是湖北省宣恩县的地方良种,是当地的重要农产品之一。生产中存在树势弱、产量低和品质下降等现象,果农的经济效益不高。笔者在田间调查中发现,柚矮化病为害可能是造成树势衰弱的重要原因,因此,通过病害鉴定和脱毒获得无病毒母树应是防治病害的必要步骤。     

叶片微形态结构特征与柑桔溃疡病抗性的关系

为了研究叶片微结构特征与柑桔溃疡病抗性的关系,选择对柑桔溃疡病具有高抗(罗浮金柑)、抗(新生系3号椪柑)、耐(纽荷尔脐橙)和高感(星路比葡萄柚)特性的4个品种为试材,在室内涂抹接种验证抗病性的基础上,采用扫描电镜及树脂包埋半薄切片等技术对成熟叶片的解剖结构及下表皮进行观测,并采用细菌分离法测检各品种健康叶片浸泡接种病菌侵入数量.结果表明:4个品种对柑桔溃疡病抗性差异明显;叶片浸泡接种病菌侵入数量与品种抗性密切相关,依次为星路比葡萄柚＞纽荷尔脐橙＞新生系3号椪柑＞罗浮金柑;不同品种的气孔密度、气孔大小、叶片厚度、栅栏组织厚度、海绵组织厚度和下皮层厚度存在差异,但是只有气孔密度与抗性之间能呈现出有规律的对应关系;气孔密度可作为柑桔植株抗柑桔溃疡病早期选择的辅助形态指标.     

我国柑桔病毒病发生和防控进展

果树在长期无性繁殖过程中,往往积累感染1种至多种病毒,其侵染常具隐蔽性,初期症状不显,易被忽视;当病毒积累到一定水平、环境或砧穗组合发生改变,可致树体快速衰退或死亡,严重制约水果业可持续发展。针对当前果树病毒病为害严重这一瓶颈问题,在国家公益性行业（农业）科研专项“果树病毒病防控技术研究与示范”（项目编号：2（11203076）支持下,     

褐色橘蚜全蛋白双向电泳体系条件优化

为优化有效分离褐色橘蚜Toxoptera citricida全蛋白的双向电泳体系,比较了饱和酚抽提法、三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)/丙酮沉淀法、直接裂解液法和Tris-HCl法4种蛋白提取方法,以及蛋白上样量、聚焦条件和固相p H梯度(immobilized p H gradient,IPG)胶条对褐色橘蚜全蛋白双向电泳的影响。结果表明,TCA/丙酮沉淀法和直接裂解液法获得的全蛋白浓度分别为4.25、4.03μg/μL,显著高于饱和酚抽提法和Tris-HCl法,且TCA/丙酮沉淀法所提取的蛋白种类丰富度最高。采用TCA/丙酮沉淀法获得全蛋白,当上样量为100μg时,所得蛋白质点多、分辨率高、背景清晰,除盐3 h,等电聚焦量45 000 V·h,并选用p H 3~10非线性IPG胶条时,双向电泳图谱中横向拖尾现象少,蛋白点相对清晰,分布均匀。表明所建立的双向电泳体系,结合银染,可从褐色橘蚜全蛋白中识别出1 264个蛋白点,且重复性研究匹配率高,可用于褐色橘蚜蛋白质组学研究。     

土霉素处理对柑橘黄龙病的防治效果及PP2基因表达的影响

【目的】评价土霉素(oxytetracycline,OTC)药剂对不同发病程度柑橘黄龙病（Huanglongbing,HLB）的防治效果,并检测OTC处理后韧皮部关键基因——韧皮部蛋白2（PP2）的表达量变化,为HLB的有效防控提供科学依据,也为OTC作用机理研究提供参考。【方法】应用可有效抑制、杀死病原菌的OTC,树干定量注射0.1 g/树于不同发病程度HLB（初感染、轻度发病和重度发病3组）的4年生Valencia夏橙,注射后7、30、60、90 d定期采集Valencia叶片样品监测HLB致病菌Cadidatus Liberibacter asiaticus(Las)含量、淀粉含量及PP2基因表达量变化。树干注射OTC后90 d采集不同处理Valencia的嫩叶、成熟叶片及茎,进行淀粉染色光学显微观察（LM）,直观反映植株累积淀粉的变化。树干注射OTC后80 d调查柑橘嫩叶抽发的情况,综合一系列指标评价OTC对HLB的防治效果。【结果】注射OTC 0.1 g/树对初感染HLB的4年生Valencia植株治疗作用最明显,7 d后检测即为阴性,并可保持90 d,其成熟叶片的淀粉含量明显减少,但茎内仍有淀粉粒富集;轻度发病夏橙注射90 d后叶片内的Las含量从（1.68×10 ⁶±858884）cells/g叶片减至（7.21×10 ⁴±30981）cells/g叶片,下降幅度极为明显,其成熟叶片内的淀粉含量在90 d内一直呈下降趋势;重度发病植株注射后叶片内的Las含量从（4.10×10 ⁸±3.04×10 ⁸）cells/g叶片减至（2.80×10 ⁷±2.70×10 ⁷）cells/g叶片,但从数量而言仍然有较多分布,除了新长出的秋梢,其成熟叶及茎内的淀粉粒含量仍旧很大,说明0.1 g/株OTC不足以治愈4年生重度发病Valencia夏橙。对PP2基因表达分析结果显示,注射OTC后30 d,Valencia夏橙体内的PP2基因表达量大幅度下降,随后90 d内表达量稳定,与注射后30 d的表达量较为一致。 【结论】OTC可以用于HLB的防控,对初感染（Las含量为<9.00×10 ⁵cells/g叶片）及轻度发病（Las含量为9.00×10 ⁵—9.00×10 ⁷ cells/g叶片）的柑橘植株治疗作用较好,不适用于重度发病植株（Las含量为>9.00×10 ⁷ cells/g叶片）的治疗。注射OTC后,PP2基因表达量下降明显,说明OTC可有效减少韧皮部病菌等的胁迫压力。     

柑桔衰退病毒分离株分子特征初步研究

柑桔衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)广泛分布于世界各柑桔产区,迄今已经摧毁了一亿株柑桔,目前仍然严重威胁着以酸橙作砧木的柑桔产区和对茎陷点型CTV敏感的葡萄柚、柚类和某些甜橙的安全。我国广泛分布着CTV的多种强毒株,随着近年来柑桔产业结构调整的深入,茎陷点型CTV对柚类和某些甜橙的危害正变得日益严峻。国外的经验表明,弱毒株交叉保护(MSCP) 是目前防治茎陷点型CTV最有效手段。 CTV属于长线形病毒属(Closterovirus),基因组为19 296个核苷酸组成的正义单链RNA,具有 12个开放读码框(ORF),可以编码17种蛋白质, 其中25 kDa和27 kDa外壳蛋白分别包裹着约     

毒源和寄主对褐色桔蚜传播柑桔衰退病毒效率的影响

褐色桔蚜是柑桔衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)最有效的传播媒介,为了解不同柑桔寄主种类和毒源对褐色桔蚜传播CTV效率的影响,检测在以锦橙、凤凰柚和墨西哥来檬作毒源植株时,褐色桔蚜对10个CTV分离株的单蚜传毒率,以及蚜传前后CTV分离株p25/HinfⅠRFLP组群构成的变化,并对其中5个分离株与2个国外分离株进行了p20和p25基因相应氨基酸序列的比对分析。结果表明:褐色桔蚜传播CTV的能力受柑桔寄主种类的影响较大,以锦橙作毒源植株可以获得最高的传毒率;CTV毒株强弱以及褐色桔蚜虫态(有翅或无翅蚜)对单蚜传毒率影响不明显;褐色桔蚜传播具有p25/HinfⅠRFLP第3组群构成的CTV分离株的能力较强。     

苹果茎沟病毒柑橘碎叶株系的分布与序列分析

为明确苹果茎沟病毒(apple stem grooving virus,ASGV)柑橘碎叶株系(citrus tatter leaf virus,CTLV)在中国柑橘产区的发生分布及其分子特性,于2017—2021年对我国12个柑橘主产区开展系统调查,并采用多重比对以及系统发育分析法对CTLV的全序列进行分析。结果表明,从12个柑橘主产区采集的2 012份疑似样品中检测出413份感CTLV阳性样品。除陕西省外,其余11个柑橘主产区样品中均检测出CTLV,并且柚类样品中CTLV的检出率最高,达到32.31%。对分离获得的22株CTLV毒株和已知的7株CTLV以及5株ASGV毒株进行全序列分析,发现所有34株毒株的核苷酸序列相似性为78.6%～99.8%,且CTLV序列的保守性较高。此外,与其他4株ASGV毒株相比,本研究中22株CTLV毒株与ASGV-MK毒株(GenBank登录号为MZ127820.1)具有更近的亲缘关系。推测CTLV中国毒株间的亲缘关系可能与其采样地和寄主品种有关。     

几种药物对猪肺疫的治疗效果比较

为选择治疗猪细菌性呼吸道疾病-猪巴氏杆菌病的有效药物,分别用庆大霉素、头孢畜健(国产)、速解灵(进口)对90头临床症状相同、体重相近、发生猪巴氏杆菌疾病的仔猪进行了药物疗效对比试验.结果表明,头孢畜健和速解灵对猪巴氏杆菌病的治愈率为百分之百,效果显著优于庆大霉素,头孢畜健和速解灵的疗效相当,说明国产头孢菌素在治疗仔猪巴氏杆菌病时完全可代替进口的速解灵.     

柑橘黄脉病毒侵染对柠檬光合特性和叶绿体超微结构的影响

以3年生尤力克柠檬实生苗为试验材料,嫁接柑橘黄脉病毒(CYVCV)现症后,测定叶片的叶绿素含量、叶绿素荧光参数、光合参数和酶活性.与健康植株相比,病株中叶绿素含量(Chl)、净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、潜在光化学效率(Fv/Fo)和最大光化学效率(Fv/Fm)较对照植株显著降低,初始荧光(Fo)、过氧化氢酶(...