小春花木犀草素提取工艺优化及其抗氧化活性研究

为优化小春花木犀草素提取工艺，并探讨其抗氧化活性。以小春花为试材，采用单因素和正交试验对小春花中天然产物木犀草素的提取工艺进行优化，得到最佳提取条件，并通过测定小春花提取物对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐（ABTS+）自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（DPPH·）、羟基自由基（·OH）的清除能力及总还原力，研究其抗氧化活性。结果表明，最佳提取工艺条件为：超声时间25 min，液料比25∶1（mL/g），乙醇体积分数60%，超声温度85 ℃，通过验证试验得到该条件下木犀草素提取量为4.88 mg/g。抗氧化试验结果表明，小春花提取物对DPPH·、·OH和ABTS+自由基清除率的IC50分别为14.9、78.6、80.2 mg/L，是一种潜在的天然抗氧化剂。优化的小春花中木犀草素提取工艺合理可行，且提取物具有较强的抗氧化活性。     

广陈皮中黄酮类化合物提取物对t-BHP诱导HepG2细胞氧化损伤保护作用机制

为了研究陈化对于广陈皮抗氧化活性的影响，以新鲜干燥果皮、贮藏1 a和10 a广陈皮（Pericarpium Citri Reticulatae ‘Chachi’，PCR-C）为研究对象，提取纯化得到广陈皮黄酮类化合物提取物（PCR-CF），以叔丁基过氧化氢（t-BHP）诱导HepG2 细胞作为氧化应激损伤模型，评价陈皮的抗氧化活性，同时利用qRT-PCR和Western blot技术进一步探究其抗氧化活性作用分子机制。结果显示，广陈皮陈化过程中，橙皮苷含量呈现波动，但总体上是下降趋势；而多甲氧基黄酮及其总含量呈增加趋势，其中PCR-C10F中含量最高，PMFs总含量达到（98.66±0.56） mg/g。而且，不同贮藏年份PCR-CF可明显提高SOD、GSH水平和降低MDA含量，且不同年份间差异显著，PCR-C10F抗氧化活性最强，SOD、GSH、MDA水平分别达到（139.38±17.38） U/mg和（117.81±3.22） μmol/g、（0.39±0.03） nmol/mg。相关性分析表明，川陈皮素的积累是PCR-C10F维持氧化还原平衡的主要活性成分。此外，PCR-C10F显著上调Nrf2 mRNA以及其在胞核蛋白中的表达；从而激活抗氧化酶的mRNA和蛋白表达水平，HO-1的mRNA表达水平和蛋白表达水平显著降低。研究表明，陈皮在陈化过程中，多甲氧基黄酮含量呈现增加趋势，抗氧化活性不断增强，PCR-C10F能够通过调控Nrf2-ARE抗氧化信号通路起到氧化应激抵御保护作用。     

生姜提取物缓解秀丽隐杆线虫热胁迫的研究

为研究生姜提取物（ginger extract，GE）对高温胁迫的影响及机制，建立秀丽隐杆线虫急性热应激（37 ℃）模型，测定了生姜对热应激下野生型线虫的寿命及运动状态、基因缺失株系的热应激寿命以及不同热应激程度下野生型线虫中与热休克反应相关基因的mRNA表达量。结果显示，相比于对照组（CK），30、60、120 μg/mL的GE处理组分别显著延长野生型线虫热应激寿命16.96%、18.73%、14.44%，显著改善热应激过程中（1 h、2 h、3 h）线虫的运动状态。GE介导的野生型线虫热应激寿命的延长依赖调控热休克反应（heat shock response，HSR）的转录因子hsf-1。GE的干预显著上调常温（20 ℃）下野生型线虫HSR相关基因hsf-1、hsp-90和hsp-16.2的mRNA表达水平以及HSP-16.2的蛋白表达水平。此外，在不同程度热应激（短暂热应激、持续热应激）状态下，GE对野生型线虫体内参与HSR相关基因的mRNA表达水平都具有调节作用。相比于常温（20 ℃），短暂热应激使野生型线虫hsf-1、hsp-16.2、hsp-70和hsp-90显著上调，而GE处理后显著下调；相比于常温（20 ℃），持续热应激使线虫HSR相关基因下调，而GE处理后hsp-16.2显著上调，并且hsf-1和hsp-90具有上调趋势，表明膳食补充GE在一定程度上可以使参与HSR相关基因的mRNA表达恢复至常态水平。以上结果表明，生姜提取物可通过调节HSR缓解秀丽隐杆线虫热胁迫。