利用荧光定量PCR方法研究猪繁殖与呼吸综合征病毒在Marc-145细胞的增殖规律

摘要:猪繁殖与呼吸综合征病毒可以在原代猪肺泡巨噬细胞(PAM)、CL2621细胞系及Marc-145细胞系上生长繁殖,但对于其增殖规律不甚了解。试验利用实时荧光定量PCR技术,研究猪繁殖与呼吸综合征病毒在Marc-145细胞中的增殖规律;结果发现:病毒在接种后12 h开始大量增殖,在18-36 h增殖最为迅速,在36-48 h病毒增殖达到最高峰;研究还发现在18 h 时Marc-145细胞开始释放病毒,48 h达最高峰。该结果为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒的致病机理及利用细胞毒生产疫苗提供试验基础。     

猪细小病毒不同代次VP2基因序列差异分析

将猪细小病毒NJ-1株在PK-15细胞上传代到35代,利用PCR及序列测定对01代、07代、14代、21代、28代及35代的VP2序列进行了测定,并推导出相应的氨基酸序列;通过对不同代次的毒株核苷酸及氨基酸序列之间的差异性进行了分析。结果表明,不同代次之间具有高度的同源性,其中核苷酸及氨基酸序列同源性分别为99.7%-100.0%、99.2%-100.0%,核苷酸的差异呈现有一定的规律性,随着代次之间的间隔增大其差异也相应增加,但氨基酸序列差异不明显,猪细小病毒核酸呈现较强遗传稳定性。     

鸡IL-18重组真核表达载体的构建及其对ND灭活苗的佐剂作用

从pGEM-ChIL-18克隆质粒扩增获得鸡IL-18(ChIL-18)全基因片段,并将其重组到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1/ChIL-18(简称pChIL-18).经PCR、酶切和基因测序证实,所获重组质粒含有目的片段,且连接、构建正确.pChIL-18转染Cos7细胞,转染细胞中含ChIL-18基因的mRNA,表达产物对鸡淋巴细胞具有明显诱导转化作用.pChIL-18对ND灭活苗免疫增强作用的研究表明pChIL-18能够提高ND灭活苗诱发的细胞免疫应答,为后续基因疫苗的研究奠定基础.     

气候变暖背景下长治市极端降水变化趋势

为了研究气候变化背景下长治市极端降水的变化趋势,掌握其变化规律,本文使用1961—2015年长治市所属11个县站的逐日降水和气温资料,对降水极端气候事件的分析侧重于大雨、暴雨、大暴雨、大雪和暴雪的变化特征,研究不同级别频数的年际变化规律。利用降水要素倾向率计算、Morlet小波分析、Mann-Kendal突变分析等对长治气候变暖前后各级别降水频数进行分析。结果表明：1、长治市年平均气温增高背景下,各量级的降水日变化不尽相同,其中以小雪日的增加和小雨日的减少最为显著;有降水日（日降水量≥0.1 mm）呈减少趋势,同时大暴雨、大雪和暴雪日数呈不同程度的增加。2、暴雨、大暴雨和大雪、暴雪都有25～30年的低频振荡周期,在高频部分有准两年振荡周期,在整个时间序列中各级别降水还具有4年、6年和8年左右的周期。3、暴雨极端降水在1962年发生突变;大雪日数突变年份在1990年前后,2006年之后大雪日数增加趋势更加显著。其他级别降水日数无明显突变。     

以环境绿化改变矿区面貌 建形象工程展示企业风采

郑煤集团公司超化煤矿南倚龟山,东濒双洎河,是一个乌金遍地、淌金流银的风水宝地。超化矿于1983年12月破土动工,1993年12月8日建成投产,目前已具备生产150万吨以上的水平。全矿现有职工2500名,直通矿区的宋大铁路专线,把这里的一切与世界紧密连在了一起。 环境绿化工作是一项功在当今、泽及后代的大事。由于矿区偏僻,远离城市;矿工井下工作条件艰苦,劳动强度大,升井后迫切需要一个优美的优闲好去处。1993年以来,我们结合本矿实际,着力开展治理矿区小环境工作,大力营造形象工程,为美化矿区,改变煤矿在社会中的形象做出了贡献。     

华宁县造林成效显著

近三年来,华宁县通过开展“三长”绿化样板造林,推动和促进了全民植树造林活动。1989年以来,全县完成了111562亩的造林任务。经检查验收,成活率达85％以上的有92591亩,占计划的101％。其中:用材林70708亩,经济林19186亩,防护林1787亩,薪炭林910亩,四旁义务植树400多万株。1989年,华宁县被省     

一起猪伪狂犬病的诊治

1 流行病学调查。2003年10月我省新乡市某猪场发生一起猪伪狂犬病。该场有存栏母猪100头，商品猪700头，部分母猪于产前1个月接种过伪狂犬疫苗(华中农大gG基因缺失苗)。2003年9月份从外地引进后备母猪20头。10月份，该场部分母猪出现症状，2—3d内同栋的猪零星发病，病情逐渐向附近的保育舍、育肥舍和仔猪舍蔓延。与此同时妊娠舍母猪出现发热、咳嗽、呕吐并伴有母猪流产、死胎症状。初始发病仔猪病程5d左右，最快的1～2d内死亡。使用多种抗生素治疗无效。该病的发病率和病死率都很高。近期饲料正常，附近没有猪场。     

仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定

从济源、通许等7地采集的7份仔猪黄白痢和仔猪水肿病的病料,经麦康凯、伊红美蓝分离培养后,挑取红色或紫黑色带金属光泽的菌落,再经肉汤纯培养,然后采用生化试验、动物试验和血清学试验进行鉴定,结果显示均为致病性大肠杆菌。药敏试验结果表明,分离菌对来立信、杀菌王都敏感,而对复方新诺明产生耐药性。     

板蓝根、黄芪等中药活性提取物对猪繁殖与呼吸综合征病毒体外作用的研究

本试验利用Marc-145细胞体外培养系统，通过观察细胞病变效应（CPE）来评价板蓝根、黄芪等中药活性提取物成分体外抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）对细胞的感染作用，并通过改变加药方式（先加药物后接种病毒、先接种病毒后加药物、病毒和药物感作后同时加入），初步探讨中药活性提取物的抗病毒机制。结果表明。在安全浓度范围内，板蓝根水提物体外对PRRSV具有显著的直接杀灭作用；连翘、黄芪水提物和黄芪多糖体外对PRRSV均具有明显的阻断和抑制作用，为筛选抗PRRSV中药制剂提供了理论依据。     

自制黄芪多糖注射剂安全性检测

为检测自制黄芪多糖注射剂的安全性,试验采用异常毒性检查、热源检查、过敏反应检查及溶血和凝聚检查对黄芪多糖注射剂的安全性进行了研究.结果表明：5只小白鼠腹腔注射黄芪多糖注射剂0.5 ml/只,小白鼠未见毒性反应,异常毒性检查结果为阴性;豚鼠隔日腹腔注射黄芪多糖注射剂0.5 ml/只,未出现过敏反应;兔耳缘静脉注射黄芪多糖注射剂0.367 ml/kg,连续观察3h,一只家兔体温升高超出规定,需进一步研究;0.25 mg/ml黄芪多糖注射剂溶液对兔红细胞没有溶血和凝聚作用.通过以上试验证明自制的黄芪多糖注射剂可否用于静脉给药需进一步检测研究.