黄瓜幼叶细胞中钙调素的免疫胶体金定位

 采用免疫胶体金电镜技术对黄瓜幼叶叶肉细胞中的钙调素(CaM)进行定位。结果表明：适温下生长的黄瓜幼苗叶肉细胞中的CaM主要分布于细胞核和叶绿体内，细胞核中CaM主要存在于染色质和核仁上，叶绿体中CaM主要存在于类囊体膜上；线粒体中也有一定量的CaM分布；细胞质、液泡、液泡膜及质膜上只有少量CaM存在；而细胞壁和细胞间隙却很难发现显示CaM存在的金颗粒。     

Expression of cyclooxygenase-2 in IL-1β-stimulated mesangial cells is medicated by NF-κB/IκB signal pathway

AIM: To investigate the role of NF-κB/IκB signal pathway in the regulation of cyclooxygenase-2 (COX-2) expression in human mesangial cells (HMC). METHODS: The PGE₂ concentration in supernatants of HMC was measured by radioimmunoassay. COX-2 mRNA and protein expression were determined by RT-PCR and Western blot. Electrophoretic mobility shift assay (EMSA) and Western blot were used to detect the activity of NF-κB and degradation of IκB. RESULTS: IL-1β significantly upregulated COX-2 expression and PGE₂ production in HMC. Significant up-regulation of NF-κB activation, nuclear translocation of p65 subunit, and degradation of IκB α and IκB β were observed in IL-1β-induced HMC. CONCLUSION: Expression of COX-2 in IL-1β-induced HMC is mediated by NF-κB/IκB signal pathway.     

抗鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗同居感染试验

疫苗的接触传播是疫苗免疫接种需要考虑的重要因素,为了检测重组鸡痘病毒载体疫苗水平传播的能力,对隔离条件下饲养的SPF鸡用重组鸡痘病毒基因工程疫苗接种,同时设立非免疫对照鸡,饲养期间特意延长清粪时间以增加感染的机会,1个月之后攻击传染性喉气管炎WG株强毒和鸡痘102株强毒,疫苗免疫鸡全部获得保护,而非免疫鸡则全部发病.在试验动物饲养场的自然条件下,将免疫鸡和试验对照两组鸡饲养在同一个鸡舍内,让疫苗毒的传播更接近自然条件.在每个月的攻毒试验中,对照鸡都没有获得对鸡痘和传染性喉气管炎强毒的保护.在疫苗免疫期间进行连续5个月的跟踪检测,同居未免疫鸡没有检测到抗传染性喉气管炎病毒gB抗体.这些实验结果表明抗鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗不能通过接触传播.     

禽流感病毒夹心ELISA快速检测方法的研究

以禽流感病毒(AIV)湖北分离株(H9N2亚型)提纯物为免疫原，制备出鸡抗AIV和兔抗AIV抗体，经用琼脂扩散法测得效价分别为1:32和1:16。以纯化的鸡抗AIVIgG为包被抗体，兔抗AIVIgG为第二抗体，建立了检测AIV抗原的夹心ELISA法。结果表明，鸡抗AIVIgG的最佳包被浓度为1μg/mL，兔抗AIV IgG的最适工作浓度为5μg/mL；对已知的阳性样品，用夹心ELISA法测得的病毒滴度比血球凝集滴度高16倍以上，且能检出其它亚型的禽流感病毒；与新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、减蛋综合征病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊病病毒、鸡痘病毒、马立克氏病病毒等无交叉反应，说明本方法有很高的特异性及敏感性。对14个鸡场送检的、患有呼吸道疾病或有腹膜炎、眼炎、产蛋下降、怀疑为禽流感感染的病鸡进行了检测，结果有7个鸡场为阳性。本方法的建立为禽流感病鸡群的临床检验提供了一种方便、敏感、快速的检测方法。     

多拉菌素在猪体内的药代动力学

对多拉菌素在猪体内进行为期45d的药代动力学研究。长白×杜洛克杂交猪10头,临床健康,驱净寄生虫,体重36～50kg,以300μg/kg体重剂量分别通过静脉和肌肉注射给药。动物给药后在不同时间内分点经颈静脉采血。血浆样品用乙腈沉淀处理,上清液过C18富集柱,用甲醇提取多拉菌素并进行衍生化反应,以反向HPLC测定猪血清中的药物浓度。药代动力学参数用计算机程序MCPKP进行处理。结果表明,动物经静脉和肌肉注射给药后,血浆药物浓度分别可测至30d和25d,2种途径的药物浓度时间曲线均符合二室开放模型。主要药代动力学参数为:静脉注射T1/2α(1.092±0.66)d,T1/2β(6.11±2.73)d,AUC(274.19±119.89)μg/(L·d);肌肉注射T1/2α(0.056±0.022)d,T1/2β(3.20±1.34)d,AUC(223.51±65.20)μg/(L·d),CMAX(28.99±10.69)μg/L,Tp(1.24±0.87)d。多拉菌素肌肉注射的生物利用度为81.5%。结果显示多拉菌素在猪体内具有吸收分布较迅速、体内分布容积大、消除缓慢和生物利用度相对较高的特点,提示多拉菌素在猪体内作用的长效性主要由该化合物的自身特性所决定,而与给药途径和使用的溶剂关系不大,研究结果对指导临床正确用药具有重要意义。     

鸡传染性支气管炎病毒S1基因和鸡Ⅱ型干扰素基因在重组鸡痘病毒中的共表达

将鸡Ⅱ型干扰素（ChIFNγ）基因和鸡传染性支气管炎病毒S1基因同时插人到鸡痘病毒转移载体中，构建含有这2个基因的鸡痘病毒转移载体pSY—ChIFNγS1。采用脂质体法将该质粒转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞（CEF），经过8轮蓝斑筛选，得到纯化的能够同时表达鸡Ⅱ型干扰素和鸡传染性支气管炎病毒S1基因的重组鸡痘病毒rFPV—ChIFNγS1。rFPV—ChIFNγS1接种28日龄的SPF鸡1周后，可以检测到针对传染性支气管炎病毒S1基因的ELISA抗体，重组病毒接种鸡的CD4^＋、CD8^＋和γδTCR阳性T淋巴细胞的百分比含量显著高于非免疫对照鸡（P％0．05）；免疫4周后用传染性支气管炎LX4强毒株攻击，rFPV—ChIFNγS1免疫组仅有1只出现轻微的呼吸道症状（1／16），而非免疫对照组则有16只发病（16／16），并有2只出现死亡（2／16），表明rFPV—ChIFNγS1对接种鸡可以产生良好的保护效果。     

水貂铜绿假单胞菌检测方法研究进展

水貂出血性肺炎是由铜绿假单胞菌引起的威胁养貂业的重要疾病之一。为了解该病相关检测方法的最新研究进展,本文从病原学和分子生物学方面,介绍了细菌分离培养、生化试验、特异性抗原及其抗体检测、PCR技术和LAMP技术等。通过比较各种方法的优缺点和实用性,为临床兽医科技工作者快速、简便、准确、实用地诊断提供参考。     

北京市部分地区城镇居民狂犬病认知情况初步调查

为了解北京市部分地区城镇居民对狂犬病的认知情况及其影响因素,随机选取海淀区、怀柔区、延庆区9个居民区的160名当地居民开展问卷调查,得到有效问卷112份;采用单因素分析方法对调查数据进行统计分析。结果显示,83.92%(94/112)的居民对狂犬病知识认知程度一般,15.18%(17/112)的居民部分了解,而仅0.89%(1/112)的居民非常了解。其中,居民对狂犬病易感动物、传播途径和被犬咬伤后正确处理方法等问题回答正确率低于40%。单因素分析发现,文化程度对北京地区城镇居民狂犬病认知水平有较大影响(P0.05),随着文化程度的提高,回答正确率不断提高。另外,当地居民希望通过微信、微博等新媒体(80.36%)、电视(78.57%)、社区宣传(72.32%)等方式获取狂犬病知识。以上结果表明,北京市城镇居民对狂犬病认知程度一般,对狂犬病易感动物、传播途径和被犬咬伤后正确处理等方面认知水平较低。因此,应选择微信、微博等新媒体,结合电视、社区宣传等方式,开展狂犬病流行病学等方面的宣传,以此提升北京市城镇居民的狂犬病认知水平。     

2017年北京市猪伪狂犬病血清学调查

为了解北京市猪伪狂犬病野毒感染情况,2017年从北京市7个区157个养猪场（户）,采集5 469份猪血清样品,采用猪伪狂犬病病毒（PRV）gE抗体酶联免疫检测试剂盒进行血清学调查。结果显示：北京市7个区均有不同程度的PRV野毒感染,平均样品阳性率为53.36%。其中：经产母猪阳性率最高（58.28%）,其次是育成猪（57.55%）、育肥猪（54.49%）,后备母猪阳性率最低（37.46%）;散养户的样品阳性率较高,为66.42%,规模猪场的阳性率较低,为47.71%。调查结果表明,北京市PRV野毒感染较为严重,对猪场采取伪狂犬病净化和综合防控措施势在必行。     

紫花苜蓿土壤浸提液对蜀葵的化感作用

为探究紫花苜蓿对蜀葵种子萌发和生长的化感作用，采取了紫花苜蓿根际及距离根际20、40、60 cm处表层5~10 cm的土壤，采用高效液相色谱法（HPLC）检测土壤浸提液（分别表示为R、D20、D40、D60）中5种有机酸类化感物质的含量。采用生物检测方法分析测定了土壤浸提液对蜀葵种子萌发的影响，并通过盆栽试验测定了紫花苜蓿与蜀葵间作条件下蜀葵叶绿素、丙二醛（MDA）、可溶性蛋白及生物量等生理生态学指标。结果表明： 5种有机酸在紫花苜蓿根际的含量最高，随着与根际距离的增加有机酸含量逐渐减少；R处理下，蜀葵发芽率和发芽指数比对照（蒸馏水）分别降低6.23%和31.32%，根长和苗长则与对照相比分别显著减少了56.11%和48.94%。盆栽实验结果表明，紫花苜蓿和蜀葵间作对蜀葵地上和地下生物量均产生明显抑制作用，与单种时相比分别减少8.01%和23.99%；间作使蜀葵叶绿素含量降低、MDA和可溶性蛋白含量升高。研究表明，紫花苜蓿对蜀葵有明显的化感作用，种植时不宜过密，应至少保持间距60 cm。