提取条件对复合酶制剂中糖化酶和纤维素酶活力测定的影响

提取条件对复合酶制剂中糖化酶和纤维素酶活力测定的影响济宁市化工研究所赵德英，张景宏，茌亚青，盛福全酶制剂是生物化学反应的催化剂，生物体内的大部分化学反应都是在酶的催化下进行的。大量研究表明，在动物饲料中添加酶制剂，可提高饲料消化率和饲料营养成分的利用...     

异淀粉酶在饲料工业中的应用价值

<正>在动物体内,营养物质的消化和吸收过程中,酶起着非常重要的促进作用。一般情况下,动物自身能分泌消化酶—蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶等,进入消化道,对其摄入的蛋白、脂肪和淀粉等营养物质进行降解,成为能被吸收的小分子,如:氨     

红曲菌固态发酵产消化酶生产工艺优化

【目的】红曲菌在生长代谢过程中会产生多种酶类物质,为优化红曲菌发酵产消化酶的生产工艺。【方法】研究7株红曲菌固态发酵产物中的液化酶、糖化酶及蛋白酶活性,筛选出酶活相对较高的菌株ZH6。分别研究发酵时间、基质加水量、接种量及培养温度对红曲菌ZH6固态发酵所产糖化酶、液化酶及蛋白酶活性的影响。在单因素试验基础上分别以加水量、接种量及培养温度作为自变量,以红曲菌ZH6固态发酵产物中糖化酶、液化酶及蛋白酶的活性为因变量进行响应面优化。【结果】经响应面优化生产工艺,当紫色红曲菌ZH6固态发酵的加水量为42 mL、接种量为20%、培养温度为33 ℃、发酵培养6 d时,所生产的液化酶活性达到119.27 U/g;当加水量为38 mL、接种量为20%、培养温度为30 ℃、发酵培养10 d时,所生产的糖化酶活性为614.32 U/g;当加水量为35 mL、接种量为20%、培养温度为31 ℃、发酵培养7 d时,所生产的酸性蛋白酶活性为1 194.21 U/g。【结论】响应面法优化生产工艺,能有效提高红曲菌ZH6产消化酶的能力。     

一株曲霉的一种中温糖化酶的纯化及其部分酶学特性

本研究从广西花坪自然保护区采集的土壤中筛选获得了一株产糖化酶丝状真菌菌株57-45,通过形态学观察和真菌内转录间隔区（internal transcribed spacer,ITS）序列比对分析,将其初步鉴定为曲霉属（Aspergillus sp.）的一个种。纯化真菌57-45所产的一种胞外糖化酶经过硫酸铵分级沉淀、疏水层析和阴离子交换层析三步蛋白质纯化步骤,得到在SDS-PAGE上约60kD的单一蛋白质条带,薄层层析分析表明该纯化的蛋白质水解可溶性淀粉的产物只有葡萄糖,证明该纯化的蛋白质为糖化酶。纯化的糖化酶Km值为1.9mg/mL,Vmax为4148μmol/（min·mg）,最适作用pH5.5,最适作用温度50℃,在同步糖化发酵中有应用的潜力。金属离子Fe3＋、Zn2＋、Cu2＋对酶活有较强的抑制作用,EDTA对酶活有较强的促进作用。本文结果将为进一步研究曲霉糖化酶的酶学特性提供新的材料。     

糖化酶工业株的鉴定及糖化酶基因的克隆

对4种糖化酶工业株的rDNA片段进行克隆,在对比其rDNA-ITS1序列与GenBank数据库的基础上,结合形态学观察对菌株进行了鉴定。结果显示,4种菌株分别为黑曲霉、无花果曲霉、米曲霉和灰色小克银汉霉。通过Me-gAlign得到的进化树表明,前3种菌株亲缘关系较近,三者与灰色小克银汉霉的亲缘关系较远。进一步克隆了黑曲霉、无花果曲霉和米曲霉的糖化酶基因,并在毕赤酵母中实现了分泌表达。     

酶法提取芦笋皮中高活性膳食纤维的研究

以芦笋皮为原料，采用酶法水解制备高活性膳食纤维。试验结果表明：用0.54%的脂肪酶(100 U/mg)、0.80%的淀粉酶(25 U/mg)和0.80%的糖化酶(20 U/mg)、1.20%的蛋白酶(100 U/mg)可提取出高活性的膳食纤维。所得膳食纤维纯度高，总膳食纤维含量达83.08%，其中水溶性膳食纤维17.02%，不溶性膳食纤维66.06%。而且生理活性好，持水性和溶胀性分别为886%和4.5 mL/g。     

醋曲菌的诱变选育及性能测定

以乌沙曲霉为出发菌，经紫外线（ｕ．ｖ）和亚硝酸复合因子诱变，筛选出一株糖化酶活性强的变异株，其液体曲和固体曲的糖化酶活力分别提高２８％和１５％以上。该菌生长快，产孢子多，产酸性能好，还具备分解淀粉的能力。     

一株降解生木薯淀粉的曲霉菌株的筛选、鉴定及其淀粉降解特性

本研究利用以生木薯淀粉为唯一碳源的筛选培养基,从腐烂木薯渣中分离筛选出一株可以降解生木薯淀粉的真菌菌株RSDF-7。根据RSDF-7形态和18SrDNA与28SrDNA之间的内转录间隔区（internal transcribed spacer,ITS）序列分析的结果,初步认定该菌株为曲霉属。菌株RSDF-7的粗酶液对多种不同的生淀粉底物均有水解效果;在以大米和玉米淀粉为底物时,其生淀粉分解活力比较高,分别为42%和40%。菌株RSDF-7的粗酶液具有良好的低pH稳定性,对生木薯淀粉的最适作用温度为50℃,最适作用pH为4.5。在30min的吸附后,RSDF-7的粗酶液对生木薯淀粉的吸附力高达60%。使用HPLC对粗酶液的酶解产物进行检测,结果发现酶解产物中仅存在葡萄糖,表明菌株RSDF-7所产的生淀粉降解酶主要为糖化酶。扫描电镜观察结果发现,经RSDF-7粗酶液酶解后的生木薯粉颗粒破裂,形成空洞,说明RSDF-7粗酶液对生淀粉有较强的水解作用。可以预见,经纯化后的曲霉菌株RSDF-7生淀粉酶将来可以用于基于酶解的木薯淀粉转化。     

双酶法分解怀山药的工艺研究

[目的]研究高温α-淀粉酶和糖化酶对怀山药的分解效果。[方法]利用高温α-淀粉酶和糖化酶对怀山药分步进行水解糖化以减小分散颗粒直径和沉淀率,在控制一定温度和时间的条件下,采用正交设计和因素分析来确定最适酶解条件,从而提高山药汁的可溶性固形物百分含量,降低其沉淀率和色泽。[结果]试验表明,双酶法分解怀山药的最适酶解条件为:高温α-淀粉酶添加量0.4%(20 000U),山药浓度10%,酶解温度85℃,时间2 h条件下酶解效果最佳;糖化酶添加量0.4%(10 000 U),糖化温度55℃,时间3 h,pH 5.0。[结论]研究可为怀山药的深度开发提供一定的理论依据。     

无蒸煮生淀粉糖化酶菌的选育

从２３份土样中筛选出１０５株野生型霉菌,其中有１０株具有较高的糖化淀粉的能力,尤以Ａ－４（Ⅱ）Ｃ和Ｅ６株菌酶活力最高,分别达１１２５．２８２５．１和８２５．１个酶活性单位;对Ｃ株菌进行紫外光诱变,从诱变后的菌株中筛选出有较大正向突变的２株菌株Ｃ（１）和Ｃ（５）,与诱变前相比,Ｃ（１）菌的生淀粉糖科活力提高了２７．３％,经生淀粉酒精发酵试验,相同条件一酒精度提高敢２２．４％;Ｃ（５）菌的生糖化酶活力