皱纹盘鲍脏器多糖的分离纯化及鉴定

利用碱性蛋白酶从皱纹盘鲍脏器中提取多糖,采用胃蛋白酶和Sevag相结合的方法脱除蛋白质;经Sephadex G-100凝胶柱层析和DEAE-cellu lose 52离子交换层析分离纯化得到AHP-2;AHP-2经高效液相色谱和比旋光度法鉴定其为均一性多糖;紫外扫描无蛋白质的特征吸收峰;红外光谱分析,AHP-2具有典型的多糖吸收峰和硫酸基吸收峰;凝胶色谱法测定其分子量为10 000~15 000;化学组成分析表明,AHP-2是硫酸酯多糖,硫酸根含量11.55%;气相色谱测定单糖组成为鼠李糖、岩藻糖、木糖、半乳糖和葡萄糖,其摩尔比Rha∶Fuc∶Xyl∶Gal∶G lu=6.7∶2.0∶3.9∶7.4∶1.0。     

刺五加多糖的提取工艺研究

试验比较了水提和碱水提、分步醇沉和分级醇沉提取刺五加多糖的工艺差异。采用水提醇沉的方法提取、分离刺五加多糖,采用Segav法脱蛋白,苯酚-硫酸法测定总糖含量,柱前衍生化GC-MS法测单糖组成。结果显示,水提法的多糖得率较高,但是总糖含量较低;碱提法的多糖得率略低,但是总糖含量较高;分步醇沉操作繁琐,但是多糖得率和总糖含量最高。提取溶剂和醇沉浓度不同,单糖组成比例有所变化。木糖和半乳糖在刺五加多糖中比例高于阿拉伯糖和葡萄糖比例。综合考虑,用碱水提取刺五加多糖,采用分步醇沉的方法,可以得到较多和较高含量的多糖。     

黑荆胶的化学组成及其应用研究(Ⅰ)——黑荆胶化学组分的研究

通过对福建南部地区黑荆胶的单糖组分定性检验及化学成分的系列分析研究 ,发现黑荆胶与阿拉伯胶具有相同的单糖组分 ,均含有D 半乳糖 ,L 阿拉伯糖及L 鼠李糖 ;黑荆胶化学成分除残余不溶物略超过外 ,其余指标符合美国药典XV中对阿拉伯胶的要求 ;二者均含有钙盐 ,不含淀粉、糊精、单宁、果胶、蔗糖及铜、铁、钾离子。     

平菇等六种食用真菌糖蛋白的理化性质及对顺铂诱导肾细胞损伤恢复的作用

采用水提醇沉法提取6种真菌中的糖蛋白,通过苯酚—硫酸法、间羟基联苯法、BCA法测定其总糖、酸性糖和蛋白质含量,采用PMP柱前衍生化法和HPGPC法测定其单糖组成及分子量分布,采用顺铂建立受损肾细胞模型,研究6种食用真菌糖蛋白的恢复作用。结果表明,香菇糖蛋白的总糖含量最高,为38.11%,口蘑糖蛋白中蛋白质含量最高,为34.21%,各糖蛋白中酸性糖含量均较低且相差不大;6种食用真菌糖蛋白中均含有甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其分子量在500~20 000 u之间,在质量浓度为12.5~50 μg·mL^-1时6种多糖对受损肾细胞具有一定的恢复作用。理化性质测定结果表明,这6种食用真菌糖蛋白均含有较高的多糖成分,且均对顺铂诱导的肾细胞损伤具有一定的恢复能力。     

不同品种竹叶多糖的化学特征及其含量研究

通过对17个品种竹叶多糖酸水解、衍生化和气相色谱分析,研究其单糖的物化特征;以硫酸 - 蒽酮法,研究不同品种竹叶多糖的含量差异.结果表明:不同品种竹叶多糖主要由阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、半乳糖组成,其中木糖占43.9% ～ 65.5%,阿拉伯糖占11.7% ~ 19.6%,葡萄糖占7.2% ～ 20.8%,半乳糖占7.7% ～ 14.1%;不同单糖间的比例存在明显差异,部分品种竹叶含5.0% ～ 6.9%未知单糖.不同品种竹叶多糖质量分数在1.9% ～ 5.7%之间,其中鹅毛竹含糖量最高(5.7%),长叶苦竹含糖量最低(1.9%).本研究从17个品种竹叶中筛选出多糖含量在4%以上的有鹅毛竹、矮箬竹、巴山木竹下部、铺地竹、毛竹、百夹竹、唐竹和金丝慈竹下部,淡竹来源广泛,可成为提取竹叶多糖的最佳原料.     

大枣多糖的研究进展

大枣多糖具有多种生理功效,然而目前国内外对大枣多糖的研究比较少。综述了大枣多糖的组成、提取分离工艺,以及生理功效的研究现状,指出了研究大枣多糖的现实意义,对大枣多糖的研究有待于进一步展开。     

川芎多糖的分离纯化及其单糖组成测定

为了解川芎多糖的分子量和单糖组成,为药量学研究和中成药加工奠定基础,采用水提醇沉法提取川芎多糖,DEAE-纤维素柱层析法纯化,高效凝胶渗透色谱法测定分子量。然后用硫酸水解,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生水解后的单糖,衍生物采用高效液相色谱法测定多糖的单糖组成。结果表明,DEAE-纤维素柱层析获得3个川芎多糖组分LCXP-1、LCXP-2和LCXP-3,分子量分别为11.916、20.793和701.875kDa。LCXP-1和LCXP-2均由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,摩尔比分别为1:495:3.7:1.2和1:632:4.3:1.2;LCXP-3由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,摩尔比为1:6.5:1.5:248:50:14。该方法准确、灵敏度高,适用于川芎多糖中单糖组成的测定。     

白茶多糖的提取与结构初探

白茶经热水浸提、浓缩、醇沉、透析等工序制得一种白茶多糖,这种多糖采用saveg法处理前后的IR谱图和单糖组成均无变化。结果表明,白茶多糖是一种由8个单糖组成的寡糖,分子量为1453～1468,其结构中含有1个鼠李糖基、2个阿拉伯糖基、1个未知单糖A基、1个葡萄糖基和3个半乳糖基,单糖通过苷键结合。白茶多糖结构中不含氨基酸或其他酸性基团。     

Saccharides of ectomycorrhizal fungal sclerotia as sources of forest soil polysaccharides

ABSTRACT

The neutral monosaccharide composition of forest soils differs from that of non-forest soils suggesting there is an accumulation of microbial saccharides. Ectomycorrhizal (ECM) fungi can be responsible as the fungi are typical in forest soils. We investigated neutral saccharides of ECM fungal sclerotia to determine what part it might play in the origin of forest soil polysaccarides. Sclerotial grain (SG) was collected from the O, A1 and A2 horizons of a soil of subalpine forest of Mt. Ontake, central Japan. Neutral saccharides in soil and SG were analyzed by two step hydrolysis with sulfuric acid and gas-chromatography of alditol acetate derivatives. Saccharides accounted for 6.0?16% of the SG by carbon content. The SG contained predominantly easily hydrolysable (EH)-glucose, which accounted for 75–85% of the composition depending on grain size and the soil horizon, followed by mannose (7.7?15%), galactose (2.2?4.8%) and non-easily hydrolysable (NEH)-glucose (1.7?6.1%). The SG contained all of these sugars irrespective of its size. The SG collected from the A1 and A2 horizons contained all sugar components found in that from the O horizon, except for fucose in that from A2 horizon. The monosaccharide composition of SG indicates that accumulation of ECM fungal sclerotial polysaccharides might have been responsible for enlarging the molar ratios of (galactose + mannose) /(arabinose + xylose) and EH-glucose/NEH-glucose of forest soils. The proportions of SG saccharides relative to soil saccharides were 3.6, 1.2, and 0.83% for the O, A1 and A2 horizons, respectively. These levels of the proportion are considerable as ECM fugal sclerotia are the products of a limited species among hundreds and thousands of microbial species inhabiting forest soils. The sclerotia forming ECM fungal species such as Cenococcum geophilum may be key sources of forest soil polysaccharides.     

梨糖转运相关基因PbTMT4启动子克隆及功能分析

以‘砀山酥梨’(Pyrus bretschneideri‘Dangshan Suli’)为材料,利用梨基因组数据库,通过PCR获得了糖转运相关基因PbTMT4(Pbr032130.1)2 211 bp的CDS序列及其编码起始位点上游长度为1 220 bp的启动子序列。使用农杆菌介导法将PbTMT4导入拟南芥,与野生型对照植株相比,转基因拟南芥植株的生长速度更快,抽薹、开花时间更早,叶片糖积累量更高。生物信息学分析表明,该启动子中含有多个与逆境应答、激素信号和光信号相关的顺式作用元件。为进一步分析PbTMT4启动子功能,构建了该启动子与GUS基因融合的植物表达载体并转化拟南芥。对T_3代转基因拟南芥各组织进行GUS活性染色和半定量分析,发现GUS基因在根、茎、叶、花和果荚中均有表达,NaCl、干旱、GA_3、MeJA以及光照处理均能一定程度上提高转基因拟南芥中GUS基因的转录水平。逆境处理发现,PbTMT4转基因株系较野生型植株受到的伤害小。研究结果初步表明,PbTMT4可促进转基因拟南芥发育并提高糖积累量,可能在抗非生物胁迫中起重要的调控作用。