微生物抑制法检测饲料中盐霉素含量的研究

从几种标准工作菌株中筛选出对盐霉素敏感的菌株,以敏感菌株为工作菌株测定饲料中盐霉素的含量。结果显示:枯草芽孢杆菌、藤黄微球菌对盐霉素不敏感,地衣芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌对盐霉素敏感。以嗜热脂肪芽孢杆菌敏感菌株为工作菌株测定饲料中盐霉素含量,最低检出浓度为0.25μg/ml,饲料中最低检出限为1.0mg/kg,标准曲线相关系数为0.99,回收率在60%～80%,均高于标准中规定的参数。试验结果表明:微生物抑制法检测饲料中盐霉素含量,灵敏度高,快速,简便。     

饲料中添加安来霉素对异育银鲫生长性能的影响

通过在饲料中添加安来霉素饲养异育银鲫 ,研究了不同安来霉素对异育银鲫生长速度和饲料系数的影响 ,找到了饲料中添加安来霉素的适宜量 ,为安来霉素在水产养殖中的应用提供指导。1　材料与方法1 .1　材料试验用异育银鲫购自华中农业大学水产试验站。放入室外水泥池 (2m× 2m×     

液相色谱-串联质谱法测定奶牛用饲料中盐酸吡利霉素

以高效液相色谱-串联质谱法测定奶牛用饲料中的盐酸吡利霉素,饲料中的盐酸吡利霉素经酸性乙腈提取,MCX净化小柱净化后,甲醇溶液复溶,注入到高效液相色谱-串联质谱仪测定;以盐酸吡利霉素标准工作溶液的质量浓度为横坐标,色谱峰面积值为纵坐标绘制标准曲线,试样中盐酸吡利霉素的含量与液相色谱串联质谱仪的色谱峰面积值成正比。结果表明:0.1~5.0 mg/kg的平均回收率在80.2%~105.6%;批内变异系数2.3%~3.5%;批间变异系数3.1%~8.5%。标准曲线中盐酸吡利霉素在0.1~10μg/mL线性关系良好,标准曲线相关系数r≥0.999 98;奶牛用饲料中盐酸吡利霉素的检测限:10μg/kg,定量限:50μg/kg。     

肉鸡组织中环丙沙星残留的微生物学检测方法的建立

以藤黄微球菌为工作菌,用杯碟法测定环丙沙星在鸡组织中的残留。结果表明,环丙沙星在磷酸盐缓冲液、肌肉、肝脏和肾脏中的最低检测限分别为0.025μg/mL,0.05μg/g和0.075μg/g。标准曲线的工作范围为0.025μg/mL~0.4μg/mL。在肌肉、肝脏和肾脏中分别添加环丙沙星0.100μg/g和0.150μg/g的回收率分别为73.68%±10.01%和76.25%±9.45%。表明该方法灵敏度和回收率高,操作简便,不需特殊设备,样品用量少,易于推广,适用于环丙沙星的定量分析。     

鸡肌肉组织中盐霉素残留的微生物法检测研究

建立了鸡肌肉组织中盐霉素残留的微生物检测方法。采用枯草芽孢杆菌作为工作菌摸索条件,制备标准曲线,测定最低检测限以及回收率。结果表明:在磷酸盐缓冲液中制备五组工作曲线,其变异系数为5.1%,相关系数为0.9923,最低检测限为0.25μg/ml;在肌肉组织中制备五组工作曲线,其变异系数为6.0%,说明本方法重现性较好,相关系数为0.9981,说明本实验有良好的线形关系,最低检测限为0.4μg/g,低于国标规定的肌肉组织中盐霉素的最高残留限量0.6μg/g;方法平均回收率为75.9%。研究表明采用枯草芽孢杆菌检测肌肉组织中盐霉素残留,其灵敏度高、可靠、快速、简便、易推广。     

RP-HPLC测定甲砜霉素原料及其片剂的含量

采用反相高效液相色谱法测定甲砜霉素及其片剂的含量。色谱柱为shimpac ODS C18柱(250 mm×4.0 mm,5μm);流动相为乙腈-水(1∶4);检测波长为225 nm;柱温30℃;流速为1.2mL/m in;进样量10μL。甲砜霉素标准曲线的线性范围为25~250μg/mL,R2=0.999 8,回收率为99.5%。     

快速测定预混合饲料中维生素B2的含量

试验采用荧光标准曲线法对预混合饲料中维生素B2进行测定。该法测定线性范围较宽,在0-1.0μg/mL范围内,其相关系数为0.99998,平均回收率为94.55%-102.86%。这种方法简单快捷,能满足预混合饲料中维生素B2的分析要求。     

多肽类抗生素饲料添加剂——安来霉素

安来霉素(Enramycin,又名恩来霉素、恩霉素。它是由先灵保雅动物保健品公司(scheringPloughAnimalHealthCorp)生产的一种多肤类抗生素,由微生物发酵产生。安来霉素在20世纪60年代首次由日本武田公司研究所开发生产,并因其强大的杀菌作用而被命名为Endodin,之后世界卫生组织(WHQ)确定其通用名为安来霉素。1993年该药在中国登记注册。多肽类抗生素饲料添加剂——安来霉素     

高效液相色谱法检测饲料中替米考星

替米考星对猪蓝耳病有一定的抑制与预防作用,因此常被添加到饲料中使用。它属于抗生素类药品,像大多数抗生素一样,长期在饲料中添加,会残留在被饲喂动物的肌肉组织中,引起心动过速和收缩力减弱。动物性产品中的残留会对人类造成过敏反应、毒性反应,长期食用还会造成人类肠道菌群失调,产生细菌耐药性。所以对饲料中替米考星的监测目的是保障人类的饮食卫生与安全。文章以高效液相色谱法检测饲料中的替米考星,经乙腈-磷酸盐缓冲溶液将饲料中的替米考星提取出来,再通过C18固相萃取柱净化,收集洗脱液,氮气吹干,经流动相溶液复溶,再注入高效液相色谱仪检测。紫外检测器290nm波长处检测其吸光度,同等条件下绘制工作曲线,替米考星含量与吸光度值在一定浓度范围内成正比,试样与工作曲线比较定量。经试验,用流动相将替米考星标准品分别配制成浓度为1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、500μg/mL的系列标准,相关系数r≥0.99995,添加量为10μg/g、50μg/g、100μg/g、200μg/g、400μg/g时,平均回收率在78.9%～93.8%之间,变异系数分别为3.9～6.6%,替米考星的最低检测浓度为10mg/kg。     

生鲜乳中L-羟脯氨酸测定方法的研究

建立UV法测定生鲜乳中L-羟脯氨酸的量,浓度0μg/mL～2.0μg/mL范围呈良好的线性关系,R=0.9998。回收率为87.3%～106.6%,批内变异系数≤5.9%,批间变异系数≤5.6%。该方法回收率高,检出限低,工作曲线稳定,重复性好。     

不同抗生素对产气荚膜梭菌的抑菌效果研究

本文旨在研究不同抗生素对产气荚膜梭菌的抑菌试验,筛选出对产气荚膜梭菌抑菌敏感性强的药物,帮助饲料、养殖企业选择抗生素控制产气荚膜梭菌提供理论依据。试验选择恩拉霉素、维吉尼亚霉素、杆菌肽锌、金霉素、阿维拉霉素、那西肽、林可霉素等7种生产中较常用的抗生素,采用试管稀释法对鸡源产气荚膜梭菌CVCC52标准株和猪源产气荚膜梭菌CVCC2038标准株进行抑菌试验。试验结果表明：（1）除金霉素外,其他药物对鸡源和猪源产气荚膜梭菌均有不同程度的抑制作用。（2）恩拉霉素的抑制作用最强,对CVCC52的MIC为0.6μg/mL,对CVCC2038的MIC为0.2μg/mL;（3）其次为阿维拉霉素,对CVCC2038的MIC为0.25μg/mL;（4）维吉尼亚霉素次之,对CVCC52的MIC为0.8μg/mL,对CVCC2038的MIC为0.8μg/mL。通过对以上7中抗生素对产气荚膜梭菌的抑菌试验结果表明,恩拉霉素对产气荚膜梭菌的抑菌效果最佳。     

液质联用法测定饲料中的安定

安定被应用于家畜生产中来提高其生长速度,在家畜中过量残留安定可能会对消费者造成危害,为此安定已经被禁止添加到饲料中使用。采用液相色谱-串联质谱法检测饲料中安定含量具有操作简便、灵敏度高,检测时间短等优点;用乙腈将饲料中的安定提取出来,再经HLB固相萃取净化柱净化,净化液氮气吹干后甲醇复溶,注入高效液相色谱-串联质谱仪进行测定;同等条件下绘制工作曲线,安定含量与离子质量色谱峰面积值在一定浓度范围内成正比,试样与工作曲线比较定量。经试验,安定标准曲线相关系数r=0.99965,安定浓度在0.01～2.0μg/mL范围内线性关系良好。添加1～100μg/kg的安定时,检测回收率可达到72.5%～95.2%,批内变异系数≤9.6%,批间变异系数≤12.5%。     

蜂蜜中聚醚类抗生素的一次性快速检测方法研究

研究建立了高效液相色谱串联荧光检测器和二极管阵列紫外可见检测器,并配置柱后衍生系统,一次性快速测定蜂蜜样品中莫能菌素、盐霉素、甲基盐霉素和拉沙洛菌素药物残留。在各聚醚类抗生素浓度5~100(拉沙洛菌素:80)μg/mL范围内,检测峰面积和浓度呈良好线性关系。回收率试验:在空白蜂蜜中添加莫能菌素、盐霉素、甲基盐霉素和拉沙洛菌素浓度分别为5、20、60μg/mL时,总体平均回收率为73%~99%,变异系数为0.2%~1.52%。最低检测限为2.5μg/mL。方法简单、快速、准确。     

微生物浊度法测定硫酸安普霉素效价的研究

通过线性范围考察、准确度、精密度试验以及与管碟法的比较验证方法的可行性。在4.0～9.5u/ml的浓度范围内,安普霉素浓度的对数与吸光度值呈线性相关,相关系数r=0.9996,经t检验回归效果显著;该方法平均回收率为100.53%,用于重复测定同一样品时结果的RSD为0.8%,且与管碟法比较结果一致。浊度法测量安普霉素效价,快速准确、精密度高、人为影响因素小,该方法可以用于安普霉素的效价测定。     

生鲜乳中添加皮革水解蛋白的测定方法研究

L-羟脯氨酸是皮革水解蛋白构成的特征氨基酸,因此鉴定L-羟脯氨酸就是鉴定皮革水解蛋白。建立UV法测定生鲜乳中皮革水解蛋白,L-羟脯氨酸浓度在0μg/mL～2.0μg/mL范围呈良好的线性关系,R=0.9998。L-羟脯氨酸平均回收率为100.2%,猪皮粉平均回收率为98.1%,皮革粉平均回收率为99.9%。该方法回收率高,检出限低,工作曲线稳定,重复性好。     

快速测定预混合饲料中维生素B2的含量

采用荧光标准曲线法对预混合饲料中维生素B2进行测定.本法测定线性范围较宽,在0.0～1.0 μg/mL相关系数为0.99998, 平均回收率为94.55%～102.86%.本法简单快捷,能满足预混合饲料中维生素B2的分析要求.     

水产品中甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺酶联免疫多残留测定

将氟苯尼考胺与载体蛋白相连作为抗原免疫动物,获得抗甲砜霉素等药物的抗体,建立了水产品中甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺残留的ELISA检测方法。结果显示,人工抗原中氟苯尼考胺与蛋白质分子的结合比约为12∶1,血清效价达到1∶2000倍以上,50%抑制浓度(IC50)为3μg/L左右,3种酰胺醇类药物交叉反应率在30%～156%之间,鱼和虾肌肉组织中的检测限分别为6.3μg/kg和6.1μg/kg,在鱼和虾肌肉组织中三种药物的回收率在40%～120%之间,检测范围为0.2～125μg/L。该方法可同时测定甲砜霉素、氟苯尼考及其标示残留物氟苯尼考胺等3种化合物残留量。方法灵敏度、精密度和准确度均能满足兽药残留筛选检测要求。     

优环霉素对体外鸡毒支原体的抑菌试验和对鸡毒支原体病的治疗试验

用优环霉素原粉对鸡毒支原体(病)进行了体内外的治疗、抑菌试验。体外试验结果表明：当优环霉素在培养基中有效药物浓度达到0．0625μg/mL时，能有效地抑制试管中鸡毒支原体的生长繁殖。体内试验结果显示：当饮水中药物浓度达到250μg／mL时，能一定程度上减少由于鸡毒支原体病引起的死亡，较明显地提高鸡体增重，随着药物浓度的加大这种作用更加明显；当药物浓度达到500μg／mL时，能较大幅度地降低气囊损伤。然而，所有药物治疗组均不能彻底抑制体内人工感染的鸡毒支原体而使血清学变为阴性反应。     

一种检测饲料中聚醚类抗生素的液相色谱-串联质谱方法

本研究基于液相色谱-串联质谱建立了一种高精密度检测饲料中聚醚类抗生素的方法，并对所建立的方法进行了方法学的考察与验证，参考已有的标准，对标准的相关处理步骤进行优化，采用液相色谱-串联质谱法进行分析。马杜霉素、莫能菌素、盐霉素和甲基盐霉素的标准曲线相关系数分别为0.999 79、0.999 71、0.998 52、0.999 38，方法检出限分别为3.58μg/kg、2.47μg/kg、3.32μg/kg、2.82μg/kg，回收率范围为90.4%～101.5%、89.2%～102.0%、90.5%～101.0%、88.3%～103.0%，相对标准偏差为1.2%～1.3%、1.4%～2.2%、1.5%～3.2%、1.9%～3.8%。所得结果表明，该方法具有检出限低、回收率较好、精准度高、重复性好的优点，可以为检测饲料中聚醚类抗生素提供有力的方法支撑。     

进出口动物中新霉素ELISA检测方法的建立

应用碳二亚胺法合成人工抗原得到卵清蛋白偶联新霉素,通过方阵试验确定最佳抗原包被浓度与抗体稀释倍数,以新霉素质量浓度对数为横坐标、抗体抑制率为纵坐标绘制标准曲线,建立了进出口食用动物中新霉素ELISA快速检测技术,并对建立的方法进行了回收率和特异性试验。结果表明,建立的检测方法包被人工合成抗原的最适稀释度为1：200,抗体的最佳稀释度为1：2 000,半数抑制浓度（IC₅₀）为6.99 ng/mL;该方法的最低检测限达40 ng/mL,与庆大霉素、卡那霉素、链霉素、托普霉素、阿米卡星、双氢链霉素的交叉反应率均小于0.1%,平均加标回收率83.77%。标准曲线在1.5~40 ng/mL范围内是线性的,相关系数为0.987,标准曲线方程为y=-37.66x+94.592;与常规液相检测方法相比操作简单、快速。本研究建立了一种快速、高效、特异的新霉素ELISA检测方法。