银杏叶复方和四君子汤对脾虚证小鼠血清消化酶活性的影响

为了研究3种不同银杏叶复方制剂对脾虚证小鼠血清消化酶活性的影响,试验选择体重20~22 g雌性清洁级KM小鼠180只,随机分为10组,每组6个重复,每个重复3只。1~5组分别为空白组、四君子汤组、银杏叶复方Ⅰ组、银杏叶复方Ⅱ组和银杏叶复方Ⅲ组,用于比较四君子汤和3种银杏叶复方制剂对正常小鼠血清消化酶活性的影响;6~10组分别为脾虚证模型组、利血平+四君子汤组、利血平+银杏叶复方Ⅰ组、利血平+银杏叶复方Ⅱ组和利血平+银杏叶复方Ⅲ组,用于研究四君子汤和3种银杏叶复方制剂对利血平所致脾虚证小鼠血清消化酶活性的影响。适应性饲养3 d,试验期15 d,测定脾虚证小鼠血清中淀粉酶(AMS)、脂肪酶(LPS)和胰蛋白酶(TPS)的活性。结果表明:淀粉酶活性6组显著低于1组(P0.05),其他组与1组之间差异不显著(P0.05),6~10组之间差异不显著(P0.05),其中8,10组明显高于其他各组;脂肪酶活性7~10组均显著高于6组(P0.05),8,10组显著高于1组(P0.05);胰蛋白酶活性6~9组显著低于1组(P0.05),6~9组之间差异不显著(P0.05),10组低于1组,但差异不显著(P0.05)。说明3种银杏叶复方和四君子汤都可以在一定程度上提高脾虚证小鼠血清消化酶活性,其中银杏叶复方Ⅲ效果较优,甚至优于四君子汤,可以作为治疗脾虚证后续试验的研究对象。     

实验性脾虚证大鼠血浆胃泌素和胃动素含量变化及四君子汤对其调整作用

通过大鼠肌肉注射利血平的方法复制了脾虚证动物模型，并应用四君子汤治疗反证，研究了脾虚证大鼠血浆胃泌素（GAS）和胃动素（MOT）的含量变化。结果表明，脾虚证大鼠血浆GAS和MOT含量显著降低，与对照组和四君子汤治疗组比较差异极显著（P＜0．01），对照组与四君子汤治疗组之间GAS和MOT的变化无明显差异（P＜0．05）；脾虚时的消化吸收机能障碍和胃肠动力学的改变与GAS和MOT的分泌减少密切相关；四君子汤能够提高血浆GAS和MOT含量，有效地改善脾虚证的胃肠功能。     

实验性脾虚证大鼠免疫细胞因子变化及四君子汤对其影响

本文分别通过大鼠肌肉注射利血平和口服小承气汤两种方法复制脾虚证动物模型,比较研究了脾虚证大鼠细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子(TNF)的含量变化,并用四君子汤治疗以反证.结果表明,不论利血平法复制脾虚证动物模型,还是小承气汤复制脾虚证动物模型,均表现为外周血IL-2、IL-6和TNF含量明显低于正常对照组与四君子汤治疗组(P＜0.01),对照组与治疗组之间除利血平所致脾虚证动物模型用四君子汤治疗后TNF含量明显高于对照组(P＜0.05)以外,以上其它指标均无明显差异(P＞0.05).说明脾虚大鼠产生IL-2、IL-6和TNF等细胞因子能力下降,使免疫功能处于低下状态,四君子汤治疗能够提高脾虚证大鼠产生细胞因子的能力,从而达到健脾益气调整机体的免疫功能.     

脾虚证模型大鼠血浆中β-EP、CGRP、NPY含量的变化

为了阐明脾虚证模型大鼠血浆中β-endorphin，β-EP）、降钙素基因相关肽（calctonin gene related peptide，CGRP）和神经肽Y（neuropeptide Y，NPY）变化规律和健脾益气方剂四君子汤对其的调节作用以及对脾虚证病理过程的保护机制，应用利血平复制出脾虚证大鼠模型，以特异性放射免疫分析法捡测了血浆β-EP、CGRP和NPY的含量变化。结果显示．脾虚证模型大鼠血浆β-EP、CGRP比对照组显著升高（P〈0．01）．NPY比对照组显著降低（P〈0．01）．接近对照组水平。提示脾虚证的病理变化过程与β-EP、CGRP、NPY等神经肽类的失衡有一定的相关性，健脾益气方剂四君子汤对脾虚证模型大鼠血浆内β-EP、CGRP和NPY含量变化有较好的调节作用，推测这也许是四君子汤健脾益气能够治疗脾虚证的作用机制之一。     

四君子汤对实验性脾虚证模型大鼠血浆内几种神经肽含量的影响

为了阐明脾虚证模型大鼠血浆中部分神经肽的变化规律和健脾益气方剂四君子汤对神经肽的调节作用以及对脾虚证病理过程的保护机制，应用利血平和苦寒中药方剂小承气汤两种方法复制出脾虚证大鼠模型，以特异性放射免疫分析法检测了血浆β－内啡肽（β－endorphin,β-EF)、降钙素基因相关肽（Calcitonin gene related peptide,CGRP)和神经肽Y（Neuropeptide Y,NPY)的含量变化。结果表明：两种方法复制的大鼠脾虚证模型均表现为血浆β－EP、CGRP比对照组显著升高（P＜0.01)，NPY比对照组显著降低（P＜0.01)，以上变化经四君子汤治疗后都有不同程度的好转，与模型组比较差异极显著（P＜0.01)，接近对照组水平。提示脾虚证的病理变化过程与β－EP、CGRP、NPY等神经肽类的失衡有一定的相关性，而健脾益气方剂四君子汤对脾虚让模型大鼠血浆内神经肽含量有较好的调节作用，推测这也许是该方能够治疗脾虚证的作用机制之一。     

四君子汤对脾虚犬体重及部分血清生化指标的影响

通过皮下注射利血平复制犬脾虚证动物模型,观察犬临床体征、体重及部分血清生化指标变化情况,研究四君子汤对脾虚犬体重及血清生化水平的影响。结果显示,在犬出现脾虚证候后,体重与血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)水平均显著低于空白对照组(P0.05);用四君子汤治疗7 d后,脾虚犬体重与血清TP、ALB、GLO均恢复到与空白对照组水平接近,而未经治疗的脾虚试验组犬各项指标未恢复到与空白对照组接近,与空白对照组和四君子汤治疗组比较呈显著性差异(P0.05)。试验结果表明,通过皮下注射利血平可以复制犬脾虚证动物模型,用四君子汤治疗犬脾虚证具有明显的疗效。     

银杏叶复方对实验性脾虚证模型小鼠消化酶活性和抗氧化性能的影响

采用利血平复制脾虚证小鼠模型,观察银杏叶复方对脾虚证小鼠消化酶活性和抗氧化性能的影响。结果表明:与脾虚模型组相比,银杏叶复方能显著提高脾虚证小鼠小肠淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性(P0.05)和血清丙二醛(MDA)含量(P0.01),显著提高脾虚证小鼠血清和肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱肽过氧化物酶(GSH-Px)活性(P0.05);银杏叶复方组肝脏中总抗氧化能力(T-AOC)含量较脾虚模型组也显著提高(P0.05)。说明银杏叶复方对脾虚证小鼠的消化酶活性有保护作用,并通过降低血清中MDA含量,提高SOD和GSH-Px含量,达到清除自由基,维持膜功能稳定的作用。     

银杏叶复方对脾虚性断奶仔猪肠黏膜形态、上皮淋巴细胞和杯状细胞数量的影响

为研究银杏叶复方对脾虚性断奶仔猪肠黏膜形态、上皮淋巴细胞和杯状细胞数量的影响,试验选择25日龄健康断奶仔猪30头,随机分成3组,即银杏叶复方组、脾虚模型组和对照组,每组5个重复,每个重复2头。颈部注射利血平加饥饱失常法建立脾虚性腹泻模型,银杏叶复方进行治疗。预试7 d后进行正式试验,试验期为30 d。结果表明:银杏叶复方组回肠绒毛高度显著高于脾虚模型组(P0.05),十二指肠、回肠隐窝深度显著低于脾虚模型组(P0.05);银杏叶复方组十二指肠绒毛高度/隐窝深度(V/C)显著高于脾虚模型组(P0.05),回肠V/C极显著高于脾虚模型组(P0.01);银杏叶复方组十二指肠杯状细胞数、空肠和回肠上皮内淋巴细胞数目显著高于模型组(P0.05)。可知,银杏叶复方有修复脾虚性断奶仔猪的小肠组织的作用。     

实验性脾虚证大鼠肝脏和肌肉组织中糖原变化的组织学观察

将45只大白鼠随机分成对照组、脾虚模型组及治疗组,每组15只。以利血平(1mg/kg·d)复制大白鼠脾虚证模型,四君子汤辅助治疗,在实验进行至第7天和第14天分别捕杀各组大白鼠,取肝脏、肌肉组织,用组织化学方法测定在不同组间和不同实验阶段其中糖原的变化。结果,在第7天时,脾虚组和治疗组糖原含量明显低于正常对照组,第14天时,与正常对照组相比较,脾虚组和治疗组糖原含量显著升高,且脾虚组糖原含量较其它两组高,提示肝脏和肌肉组织中糖原的变化可能是脾虚证发生发展的重要指标。     

实验性脾虚证与自由基代谢的相关性及四君子汤对其的调整作用

分别用小承气汤和利血平复制大鼠脾虚证模型，通过检测血清和心、肝、脾、肾等组织中抗氧化酶SOD和GSHP－Px的活性及脂质过氧化反应终产物MDA含量，研究脾虚证与自由基代谢的相关性及四君子汤对其影响。结果表明：两种方法复制脾虚证模型与对照组比较均表现为SOD活性显著升高（P＜0．05），GSH－Px活性显著降低（P＜0．05）；四君子汤反证治疗组与脾虚证组比较表现为SOD活性显著下降（P＜0．05），GSH－Px活性显著升高（P＜0．05），MDA含量显著降低（P＜0．05），与正常对照组接近。表明大鼠虚证动物模型与体内自由基代谢紊乱，脂质过氧化作用增强存在一定关系，健脾益气方药四君子汤能够提高体内抗氧化酶活性，拮抗自由基对生物膜的过氧化损伤，具有抗脂质过氧化损伤的作用。     

大鼠实验性脾虚证动物模型糖原和琥珀酸脱氢酶的组织化学研究

为了研究脾虚证时组织化学的变化及四君子汤对其的影响,选用Wistar大鼠,以利血平复制脾虚证动物模型,实验设正常对照组、脾虚组、脾虚治疗组,每组15只,于第7d、第14d分别扑杀各组动物,取肝脏、十二指肠、胃和肌肉组织,分别应用PAS法和Lojda法染色,组织学半定量法观察糖原和琥珀酸脱氢酶的变化。实验结果表明:第7d时,脾虚组和脾虚治疗组肝脏和肌肉组织中的糖原含量显著低于对照组(P<0.01),各组织中琥珀酸脱氢酶含量则显著高于对照组(P<0.01);第14d时,脾虚组糖原含量反而显著高于对照组和脾虚治疗组(P<0.05～0.01),琥珀酸脱氢酶含量仍明显高于对照组和脾虚治疗组(P<0.050.01)。说明脾虚证的病理变化过程与机体糖原和琥珀酸脱氢酶等的组织化学变化有一定的联系,健脾益气方剂四君子汤对脾虚证模型大鼠的组织学变化有较好的调节作用。     

银杏叶复方对脾虚腹泻断奶仔猪肝脾组织形态的影响

为研究银杏叶复方对脾虚腹泻断奶仔猪肝脾组织形态的影响,将30头25日龄的断奶仔猪随机分为对照组、脾虚模型组和银杏叶复方组,每组5个重复,每个重复2头。利血平加饥饱失常法建立脾虚腹泻模型,银杏叶复方进行治疗。预试期7 d,试验期30 d。组织学观察可见,对照组肝板完整,肝索排列规则;脾虚模型组肝脏梗死严重,肝板结构破坏;银杏叶复方组保有完整肝板,肝细胞大而圆、胞核正常,部分有轻微出血,枯否氏细胞等形态和对照组接近。对照组和银杏叶复方组脾脏红髓和白髓界限清晰大小适中,小梁正常分布在脾中,动脉周围淋巴细胞数量正常,边缘区红白髓数量正常,未见明显病变;脾虚模型组白髓范围大且和红髓界限不清,小梁密集分布于脾中,动脉周围淋巴细胞数量增多,边缘区出现大量血细胞。试验结果表明,脾虚模型组的仔猪肝脾均有不同程度的损伤,而银杏叶复方组的损伤较小,形态与对照组较为接近,说明银杏叶复方对脾虚腹泻断奶仔猪的肝脾损伤具有修复作用。     

阿司匹林丁香酚酯在大鼠体内的代谢动力学研究

通过阿司匹林丁香酚酯(AEE)在大鼠体内代谢动力学的研究,探讨其在体内的代谢规律,为临床合理用药提供参考。选取12只SPF级SD大鼠,颈静脉插管后以20 mg/kg的剂量灌胃给药,采用LC-MS/MS法检测大鼠血浆中AEE及其代谢物的浓度,计算药动学参数。结果表明:AEE和代谢物阿司匹林在血浆中无法检出;代谢物丁香酚在血浆中浓度较低,未达到定量限;代谢物水杨酸血药浓度符合一室模型。水杨酸在大鼠体内的主要药代动力学参数C_(max)、T_(max)和CL分别为3356.90±1120.37 ng/mL、4.35±1.09 h、432.01±148.41 mL/h。该检测方法快捷、准确、灵敏度高,适用于大鼠血浆中AEE及其代谢物的血药浓度测定,为今后AEE在体内处置研究和给药间隔提供了技术参考和理论基础。     

脾虚大鼠胰岛胰多肽免疫阳性物质分布变化

脾虚证的临床表现以消化系统功能障碍为主,其中胰腺外分泌功能减退明显,且伴有食欲与体质量的显著下降.胰多肽(PP)是胰岛周边F细胞分泌的主要胃肠激素,对胰腺外分泌功能与食欲的调节有抑制作用,可导致氧化代谢增强,引起体质量下降.本试验旨在揭示大鼠胰岛胰多肽分泌变化与脾虚证发病之间的关系.笔者以利血平脾虚大鼠模型为研究对象,采用SP染色进行免疫组织化学研究,观察大鼠胰岛中胰多肽免疫阳性物质的分布情况.脾虚组与对照组的大鼠胰岛中胰多肽免疫阳性物质面积与胰岛面积百分比相比,胰头部分未见明显差异(P＞0.05);但脾虚组胰中、胰尾的PP免疫阳性物质所占面积极显著大于对照组(P＜0.01).结果表明,脾虚证大鼠胰岛中胰多肽总分泌量极显著增加.因此,胰多肽的分泌增加是导致脾虚证动物出现胰腺外分泌功能低下、食欲减退以及体质量下降的主要因素.     

不同加工工艺的四君子汤对脾虚小鼠GSH-PX和MDA的影响

目的:通过比较不同剂量的四君子汤超微粉混悬液和四君子汤水煎液对脾虚小鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和丙二醛(MDA)的作用,探讨超微粉碎对四君子汤生物学效应的影响.方法:选用健康昆明种小鼠,随机分为空白对照组、模型组、水煎液组、1/2混悬液组和1/4混悬液组,利用利血平复制脾虚模型,比较不同剂量水平的超微粉混悬液(1/2剂量:0.15ml和1/4剂量:0.075ml)和传统粉水煎液(0.3ml)对脾虚小鼠GSH-PX和MDA的影响.结论:1/2剂量的四君子汤混悬液和水煎液的药效相当,1/4剂量的四君子汤混悬液不能达到水煎液的药效.     

四君子汤对脾虚大鼠空肠黏膜损伤的修复作用及机制

通过检测脾虚大鼠空肠中PCNA和IGF-1的表达,探讨四君子汤对脾虚大鼠空肠黏膜修复的影响。试验分对照组、脾虚组、四君子颗粒治疗组和治疗对照组,每组采取空肠中段作样本;H.E.染色法观察空肠组织结构,免疫组织化学法检测PCNA和IGF-1的表达。脾虚组大鼠空肠绒毛长度、隐窝深度极显著降低(P<0.01);四君子颗粒治疗组大鼠绒毛长度、隐窝深度的显著高于治疗对照组(P<0.05)。脾虚组大鼠空肠中PCNA、IGF-1阳性细胞数极显著增加(P<0.01);四君子颗粒治疗组PCNA、IGF-1阳性细胞个数显著高于治疗对照组(P<0.05)。结果表明,四君子汤可以促进脾虚模型大鼠空肠的修复过程。     

四君子汤超微粉对脾虚小鼠总抗氧化能力和NO的影响

为测定四君子汤超微粉的作用效果,用利血平复制脾虚小鼠模型,比较分析了不同剂量水平的四君子汤超微粉混悬液和四君子汤传统水煎液对小鼠总抗氧化能力和一氧化氮(NO)的影响,以期为四君子汤超微粉的临床应用奠定基础。结果表明,在总抗氧化能力方面,2个剂量水平(0.15 mL,0.075 mL)超微粉混悬液的作用效果不及传统水煎液;在NO方面,2个剂量水平(0.15mL,0.075 mL)的超微粉混悬液,其作用效果明显优于传统水煎液。     

口服百草枯建立帕金森病模型及其评价研究

通过模拟人类经消化道长期慢性暴露于百草枯的方式,建立大鼠帕金森病模型及对其进行评价。将大鼠随机分为高剂量组(20mg/kg百草枯)、中剂量组(10mg/kg百草枯)、低剂量组(5mg/kg百草枯)和对照组(生理盐水),每组16只,连续灌胃4个月后运用行为学检测系统、中脑黑质部及肺部病理学观察、高效液相色谱法检测纹状体多巴胺及其代谢物含量等进行分析及评价。给药4个月后,与对照组相比,中剂量组大鼠反应迟钝、动作僵硬、四肢震颤、学习记忆能力减退(P0.01),中脑黑质神经元细胞明显萎缩,纹状体中的多巴胺及高香草酸含量分别下降了20.0%(P0.01)和11.3%(P0.01),且肺组织有明显损伤;低剂量组与对照组相比上述变化不明显。通过口服百草枯可建立具典型行为学变化和大脑黑质纹状体多巴胺能神经系统受损的大鼠帕金森病模型,这将为帕金森病的机制及防治研究提供理想的模型动物。     

加味四君子汤对脾虚犬部分血常规及生化指标的影响

为了观察加味四君子汤对脾虚犬的治疗效果,将24只试验犬随机分为正常对照组、脾虚对照组、自然恢复组和加味四君子汤治疗组,采用利血平皮下注射的方法制造脾虚模型,分别检测部分血常规及血生化指标。结果表明:造模后,试验犬血液一些生理生化指标发生明显改变,WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、LYM、MON、LY%、MO%、TP、CREA、ALB、GLU、TG、CHO、LDH、Ca、P、Cl均降低,其中LYM、MON、MO%、WBC、TP、GLU、TG、LDH、CL下降显著(P0.05);同时GRA、GR%、RDWc、PLT、MPV、PCT、PDWC、AST、ALT、ALP、GGT、UA、CK均升高,其中GRA、PLT、AST、ALP、GGT、CK升高显著(P0.05);经加味四君子汤治疗后,均可得到较好的恢复,而自然恢复组各指标稍有恢复,但明显不如加味四君子汤治疗组的恢复程度。     

银杏叶复方对LPS应激断奶仔猪小肠黏膜形态及上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量的影响

为探讨银杏叶复方对免疫应激断奶仔猪小肠黏膜形态及其上皮内淋巴细胞和杯状细胞数目的影响,本试验将36头断奶仔猪随机分为对照组(灌服110 mL生理盐水)、大肠杆菌脂多糖(LPS)应激组(灌服110 mL生理盐水)、银杏叶复方组(灌服110 mL银杏叶复方制剂),每组4个重复,每个重复3头。预试期7 d,正试期27 d。试验第23天采用腹膜注射LPS刺激断奶仔猪建立免疫应激模型。结果表明:与对照组及LPS应激组相比,银杏叶复方显著提高了断奶仔猪十二指肠、空肠及回肠段的小肠绒毛高度/隐窝深度(P0.05);银杏叶复方组小肠各段上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量均显著高于LPS应激组(P0.05)。综上,银杏叶复方可维持和修复由免疫应激引起的断奶仔猪肠道损伤并能增强肠道黏膜的免疫功能。