菜籽粕固体发酵及其理化性质的研究

为改善发酵菜籽粕的营养价值,提高在动物饲料中的使用量。以菜籽粕为原料,选用枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌等菌种,通过单菌株与混菌株固体发酵试验,研究菜籽粕发酵产品的理化性质。结果表明,枯草芽孢杆菌、酿酒酵母发酵菜籽粕的效果显著优于其他单菌,明显提高了真蛋白质量分数和氨基酸含量,植物乳杆菌的效果最差。混菌株发酵中枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、粪链球菌、黑曲霉四菌种组合发酵明显高于其他组合,发酵菜籽粕中有益活菌总数为4.35×107cfu/g、真蛋白质量分数为45.69%、氨基酸含量为331.48 mg/g、多肽得率为18.31%、硫苷含量为10.32μmol/g、单宁含量为5.61μg/g。结果提示,混菌株发酵效果明显优于单菌株发酵,混菌株发酵中以枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、粪链球菌、黑曲霉四菌种组合发酵效果最好,提高了菜籽粕作为饲料蛋白的品质。     

犊牛固态发酵微生态制剂的试验研究

研究旨在研制一种犊牛微生物发酵饲料,并确定其发酵培养条件。以前期试验筛选的益生酵母菌、枯草芽孢杆菌和乳酸菌为协同发酵菌株,选取麸皮、玉米粉、豆粕等为发酵饲料原辅料,采用DPS软件对原料进行均匀混料设计,通过对固体发酵条件下各菌株生长情况的测定,将高活菌数的菌株进行配伍组合,确定了其最佳组合及接种比例,通过测定发酵饲料中的活菌数β-葡聚糖,柠檬酸、多肽等营养活性物质的含量,结合DPS软件中的Topsis法综合评价筛选出最优复合微生态制剂的发酵组方以及发酵模式。结果表明,复合菌最佳配伍组合为酿酒酵母、东方伊萨酵母、枯草芽孢杆菌、乳酸菌,接种比例为2:3:1:1,优化的固态发酵配方为麸皮63.84%,玉米粉27.44%,豆粕6.41%,无机盐2.31%。结合发酵饲料的芳香气味,在先进行36 h有O_2发酵,再进行12 h无O_2发酵条件下,可使发酵产物活菌数达到5.3×10~(11)CFU/g,β-葡聚糖为10.515 mg/g,柠檬酸为164.508 mg/ml,多肽为160.55 mg/g,乳酸的含量为427.344μg/g。     

枯草芽孢杆菌发酵黄芪提取液培养基优化研究

为了研究枯草芽孢杆菌发酵黄芪提取物的最佳培养基以及防腐剂对枯草芽孢杆菌存活率的影响,试验采用正交设计对培养基配方进行优化,并进行了扩大培养试验;用单因子试验法测定了枯草芽孢杆菌存活率。结果表明:培养基黄芪生药含量为0.5 g/mL,每100 mL培养基中含豆粕2.0 g、玉米2.0 g、麸皮2.5 g时枯草芽孢杆菌活菌数最多,可达到8.34×10~8cfu/mL,芽孢率大于90%。与摇瓶培养相比,发酵罐培养可以明显提高枯草芽孢杆菌的活菌数,为1.86×10~9cfu/mL。发酵液中添加一定量的防腐剂,经长时间保存后枯草芽孢杆菌的存活率均较高,约为95%。     

饲用枯草芽孢杆菌SR096产孢培养基及培养条件的优化

试验旨在为了降低枯草芽孢杆菌SR096的工业生产成本和提高发酵液的芽孢含量,采用单因素试验和响应面法试验设计对菌株SR096的培养条件和发酵培养基组分优化,优化后的培养基组分为:葡萄糖7.5 g/L、玉米粉15.7 g/L、黄豆粉45.0 g/L、柠檬酸钠4.5 g/L、碳酸钙2.0 g/L、硫酸镁1.0 g/L,经验证在5 L发酵罐中以接种量3%、37℃、250 r/min条件下培养30 h,枯草芽孢杆菌SR096发酵液的活菌含量为1.67×10^10 CFU/mL,芽孢含量为1.56×10^10 CFU/mL,芽孢率为93.3%,为枯草芽孢杆菌SR096后期的产业化放大和推广应用奠定基础。     

枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis BS1发酵培养基的优化

为提高枯草芽孢杆菌BS1发酵液中芽孢含量,通过单因素试验、正交试验及回归正交组合试验优化其发酵培养基,最终确定培养基配方为:麦芽浸粉1 g/l、黄豆粉15 g/l、CaCO36.68 g/l、MnSO40.4 g/l、MgCl22 g/l,初始pH值7.0。使用该配方,在37℃、180 r/min条件下于恒温摇床中振荡培养48 h,枯草芽孢杆菌BS1菌株发酵液中芽孢含量可达8.55×1010cfu/ml。     

抗水产病原菌乳酸菌的筛选及其发酵饲料的制备

为筛选具有拮抗水产病原菌特性的乳酸菌并制备发酵饲料,本试验从各类生境分离和收集乳酸菌33株,考察各菌株发酵上清液对革兰氏阴性水产病原菌的抑制作用。选用抑菌性能优良的菌株制备发酵饲料,优化发酵条件,并测定发酵饲料对水产病原菌及益生菌生长的影响。结果表明：33株乳酸菌的发酵上清液对6株病原菌有不同程度的抑制作用,其中屎肠球菌（Enterococcus faecium）7-1抑菌能力最强,以其制备发酵饲料的最佳条件为：发酵接种量4.53 Log10 cfu/g,发酵时间12.5 h以及加水量0.784 mL/g干饲料,发酵后活菌数可达到（7.47±0.02）Log10 cfu/g,饲料稳定性86.89%。发酵好的饲料浸提液对水产病原菌有生长抑制作用,对水产益生菌有生长促进作用。 [关键词] 乳酸菌|屎肠球菌|发酵饲料|病原菌     

饲用枯草芽孢杆菌高产芽孢工艺优化及菌剂制备

为提高枯草芽孢杆菌SR096发酵液中芽孢含量,本研究通过单因素试验和响应面法试验对SR096发酵培养基中的碳源、氮源以及无机盐体系等组分进行了优化。最终确定发酵培养基组成为:葡萄糖7.5 g/L、玉米粉12.69 g/L、酵母粉10.66 g/L、黄豆粉20 g/L、柠檬酸钠4.46 g/L、碳酸钙1.5 g/L、硫酸镁2 g/L,优化后的发酵培养基在37℃、180 r/min条件下摇瓶培养48 h,枯草芽孢杆菌SR096菌株发酵液中芽孢含量可达7.978×10~9 cfu/mL,制备的益生菌剂具有耐热、耐酸、耐胆盐的优点并能在常温下长期贮存。     

双菌混合发酵过程中营养物质变化的研究

为研究益生茵双茵混合发酵过程中营养物质的变化,本研究以麦麸、豆粕、玉米粉为基质,纳豆芽孢杆菌和啤酒酵母为试验菌株,采用固态发酵的技术,对其发酵过程中的活茵数和营养物质进行分析测定.结果表明:发酵后纳豆芽孢杆茵数为1.74×1010cfu/g,啤酒酵母数为1.76×109 cfu/g,蛋白酶活力达到3361.3 U/g,α-淀粉酶活力达到200 U/g,粗蛋白质含量比发酵前增加了2.6%,肽和氨基酸舍量均为发酵前的2倍.     

多菌种发酵豆粕的筛选试验

试验旨在通过乳酸杆菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌的配合发酵筛选出三种菌的最佳比例以达到最好的发酵豆粕制作效果。采用正交试验设计,按正交L_(16)(4~3)设计试验发酵豆粕,通过前期探索试验得出适宜的发酵参数为:温度28℃、水分35.3%、厌氧条件、时间2 d。通过测定发酵后豆粕的p H值、酸溶蛋白的量、蛋白酶酶活,从中选出最优组合及其最佳比例。发酵后结果表明,当3种菌的添加量为乳酸杆菌44×10~9U/kg、酵母菌80×10~9U/kg、枯草芽孢杆菌260×10~9U/kg时,发酵豆粕的粗蛋白、酸溶性蛋白的含量最高,蛋白酶酶活最高。     

枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶发酵条件的优化

通过单因素试验和正交优化试验,对枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶的发酵条件进行优化。通过单因素试验表明,枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶的最佳碳源、氮源、无机盐种类、碳源添加量、氮源添加量、发酵温度和初始pH值分别为麦芽糖、蛋白胨、氯化钙、麦芽糖添加量8%、蛋白胨添加量4%、发酵温度37℃、初始pH值7.0。在单因素试验的基础上进行正交优化试验得到了枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶最优发酵条件为:麦芽糖添加量8%、蛋白胨添加量8%、氯化钙添加量8 g/L、发酵温度37℃、初始pH值7.0。在最优发酵条件下,枯草芽孢杆菌所产的中性蛋白酶酶活为420.36 U/mL,比优化前98.36 U/mL提高了3倍。     

腐竹副产物豆渣固态发酵生产益生菌工艺优化

研究旨在将低值的腐竹副产物豆渣转化为富含益生菌的生物发酵饲料。以腐竹生产过程的副产物——豆渣为固态发酵主培养基,通过复配其他辅助组分后,接种枯草芽孢杆菌进行固态发酵。实验通过单因素和正交实验研究了豆渣麸皮比、接种量、发酵pH值、发酵温度、发酵时间等指标对发酵效果的影响。结果表明:最佳复配比例为豆渣:麸皮为8:2,枯草芽孢杆菌发酵液接种量为15%,发酵温度为35℃,发酵初始pH值为6.8,发酵时间为3d。发酵后的豆渣营养价值和风味品质得到一定程度的提高,活性芽孢数达1.25×10~(10)cfu/g,胰蛋白酶抑制因子活性极显著下降(P0.01)。     

产纤维素酶枯草芽孢杆菌Kpg酶学性质研究及对麸皮纤维素含量的影响

对枯草芽孢杆菌B.subtilis Kpg所产纤维素酶的酶学性质进行研究,确定该纤维素酶的最佳温度和最适pH,并进行固体发酵麸皮试验,验证Kpg纤维素酶的实践效果。试验以3,5-二硝基水杨酸酶活测定法为基础,通过改变纤维素酶的反应温度和pH环境,确定最适反应温度和最适pH环境。为研究其实际降解能力,将枯草芽孢杆菌Kpg添加到麸皮中,在37℃环境中发酵6d。结果显示,枯草芽孢杆菌Kpg纤维素酶的最适反应温度为60℃,此时纤维素酶活性最大为108.45U/mL;反应液最适pH值为6.0,此时纤维素酶活性为97.72U/mL;在两者最适条件共同作用下,纤维素酶活性为113.58U/mL。发酵试验结果显示,枯草芽孢杆菌Kpg能够显著降低麸皮中的纤维素含量(P0.05),同时显著提高发酵麸皮中的真蛋白含量(P0.05)。枯草芽孢杆菌Kpg表现出的酶学性质符合发酵微生物选育的标准和特征,为生物饲料的开发和应用提供数据参考。     

白酒酒糟制备多酶益生菌饲料发酵工艺研究

选择产甘露聚糖酶枯草芽孢杆菌L-1、产植酸酶枯草芽孢杆菌L-2、产木聚糖酶YB-5、乳酸片球菌Rp作为制备多酶益生菌饲料的生产菌种。通过单因素和正交试验最终确定最佳底物干基组分为36%白酒酒糟、26%玉米粉、28%麸皮、8%豆粕,料水比10.8,装填量20 g/250 ml。结果表明:多酶益生菌饲料中益生菌活菌数为(1.97±0.09)×10~(11)cfu/g,甘露聚糖酶酶活(11.62±0.26)U/g、木聚糖酶酶活(15.30±0.36)U/g、植酸酶酶活(16.37±0.16)U/g、蛋白酶酶活(15.27±0.16)U/g以及淀粉酶酶活(19.37±0.33)U/g。     

重组枯草芽孢杆菌产角蛋白酶的发酵培养基及发酵条件优化

角蛋白是潜在的优良饲用蛋白资源，其中角蛋白酶作为可特异性降解角蛋白的酶类，在角蛋白饲料化领域展现出广泛的应用潜力和价值。本研究以自主构建的重组角蛋白酶工程菌枯草芽孢杆菌WB600-pMA5-kerJY-23为研究对象，利用单因素和二次通用旋转组合设计试验对其摇瓶发酵产角蛋白酶的发酵培养基和发酵条件进行优化。结果表明：该菌株最佳发酵产酶条件为：葡萄糖25 g/L，蔗糖25 g/L，酵母浸膏20 g/L，硫酸铵10 g/L，磷酸氢二钾1.5 g/L，氯化钠0.3 g/L，氯化钙0.025 g/L，硫酸镁0.025 g/L，硫酸亚铁0.015 g/L，氯化锰0.05 g/L，初始pH 8，装液量45 mL/250 mL三角瓶，接种量6%，培养温度37℃，摇床转速200 r/min，发酵周期36 h。在该优化条件下，重组枯草芽孢杆菌WB600发酵产角蛋白酶的酶活达到（2110±15.011）U/mL，较优化前提高了5.10倍（P <0.05），为该酶在角蛋白降解及资源化利用领域的应用提供了理论依据与研究基础。     

复合益生菌对肉鸡生产性能、屠体性能及养分表观利用率的影响

本试验旨在研究复合益生菌对肉鸡生产性能、屠体性能及养分表观利用率的影响。试验选取300只1日龄的AA肉鸡商品代雏鸡,采用单因子随机分组试验设计将其分为5个处理组,每个处理组3个重复,每个重复20只鸡。其中,Ⅰ组为对照组,饲喂基础饲粮,正常饮水;Ⅱ组为抗生素组,饲喂基础饲粮,在饮水中添加恩诺沙星和硫酸黏菌素;Ⅲ组饲喂基础饲粮,在饮水中添加5×105 cfu/m L海洋红酵母BSH、1×107 cfu/g枯草芽孢杆菌和1×106 cfu/g乳酸菌;Ⅳ组饲喂基础饲粮,在饮水中添加1×106 cfu/m L海洋红酵母BSH、2×107 cfu/g枯草芽孢杆菌和2×106 cfu/g乳酸菌;Ⅴ组饲喂基础饲粮,在饮水中添加1.5×106 cfu/m L海洋红酵母BSH、3×107 cfu/g枯草芽孢杆菌和3×106 cfu/g乳酸菌。试验期为42 d。结果表明:与Ⅰ组相比,添加不同浓度的复合益生菌,肉鸡1~21 d和22~42 d的日增重和日采食量均显著增加(P0.05),与Ⅱ组基本保持一致;与Ⅰ组和Ⅱ组相比,42 d的屠宰率、胸肌率、腿肌率有一定程度改善(P0.05),腹脂率显著降低(P0.05);与Ⅰ组相比,21 d和42 d能量、干物质、粗蛋白质和粗脂肪的养分表观利用率显著提高(P0.05),与Ⅱ组基本保持一致(P0.05)。结果提示,添加不同浓度的复合益生菌能够提高肉鸡的生产性能、屠体性能和养分表观利用率,在规模化肉鸡饲养中用复合益生菌部分替代饲用抗生素是可行的,其中以浓度为1.5×106cfu/m L海洋红酵母BSH、3×107 cfu/g枯草芽孢杆菌和3×106 cfu/g乳酸菌的复合益生菌的效果最好。     

一株枯草芽孢杆菌发酵培养基的优化

通过正交优化试验对一株枯草芽孢杆菌的发酵培养基进行优化,结果发现,当培养基中豆粕液为20 g/L,葡萄糖浓度为5 g/L,玉米粉浓度为2 g/L时,在接种量为5 %的情况下,采用此种配比的发酵培养基37 ℃培养24 h,活菌数最高,可达4.0×109 CFU/mL.     

青贮用产纤维素酶菌株3X-10的产芽孢条件优化

本试验旨在通过将单因素、Plackett-Burman(PB)筛选与响应面分析3种方法相结合来优化产纤维素酶菌株3X-10产芽孢发酵条件。以单因素试验为基础,PB试验确定了影响菌株芽孢产量的主要因素,最后通过响应面法确定当发酵时间为67 h、接种量为7.00%、装液量为61 mL/250 mL时菌株的芽孢产量达到最大,为3.22×10~9cfu/mL,较优化前的8.07×10~8cfu/mL增加了2.99倍。     

地衣芽孢杆菌对三角帆蚌消化酶活性、免疫指标和抗氧化指标的影响

本研究旨在探明地衣芽孢杆菌对三角帆蚌消化酶活性、免疫指标和抗氧化指标的影响.选取二龄三角帆蚌144只,随机分成4组,按终浓度分别为0(对照)、0.5×106、1.0×106、2.0×106 cfu/mL添加芽孢杆菌菌液,每组设3个平行,每个平行12只蚌,养殖30 d.结果表明:与对照组相比,各试验组增重率显著升高(P<0.05),其中以1.0×106cfu/mL组增重率最高,且显著高于0.5×106和2.0×106cfu/mL组(P<0.05).15 d时1.0×106 cfu/mL组淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶活性显著升高(P<0.05),30 d脂肪酶和蛋白酶活性恢复到对照组水平.各试验组溶菌酶活性均显著升高(P<0.05),0.5×106、1.0×106cfu/mL组酚氧化酶活性显著升高(P<0.05).随着芽孢杆菌水平的增加,酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性呈上升趋势,15 d时1.0×106、2.0×106 cfu/mL组酸性磷酸酶和碱性磷酸酶活性均显著升高(P<0.05),30 d时恢复到对照组水平.总抗氧化力和超氧化物歧化酶活性显著增加,但0.5×106cfu/mL,组15 d时除外,且1.0×106cfu/mL组与2.0×106cfu/mL组差异不显著(P>0.05).添加1.0×106cfu/mL芽孢杆菌15 d时过氧化氢酶活性显著提高(P<0.05),30 d时恢复到对照组水平.添加芽孢杆菌不影响血清丙二醛的含量(P>0.05).由此得出,水体中添加地衣芽孢杆菌可提高三角帆蚌消化酶、免疫指标和抗氧化指标活性,促进蚌体生长;最适添加水平和间隔时间分别为1.0×106cfu/mL和15 d.     

解淀粉芽孢杆菌发酵黄芪培养基的筛选与优化

为了筛选与优化解淀粉芽孢杆菌固态发酵黄芪培养基,试验以菌生长量为指标,采用单因子试验对菌株适宜发酵培养基成分进行筛选;采用二次正交旋转组合试验设计及响应面法对黄芪固态发酵培养基进行优化。结果表明:最适发酵培养基成分为黄芪、黄豆粉和CaCO_3,用其分别替代基础培养基中相应营养物质,然后接种解淀粉芽孢杆菌,37℃、150 r/min振荡培养24 h,细菌菌数分别为6.50×10~9,5.17×10~9,5.07×10~9cfu/mL。优化的固态发酵培养基为黄芪粉30%、黄豆粉10%、CaCO_30.2%、水59.8%,37℃发酵培养72 h,发酵物中活菌数达到7.67×10~8cfu/g。说明优化的黄芪固态发酵培养基适合解淀粉芽孢杆菌生长,筛选的培养基原材料符合固态发酵产业化生产条件。     

一株固态发酵豆粕的枯草芽孢杆菌的分离与应用

本研究筛选获得一株产纤维素酶的耐高温枯草芽孢杆菌FJAT-5561,分析其产酶和抑菌特性,应用于豆粕固体发酵。枯草芽孢杆菌FJAT-5561在45℃、pH为8时的酶活性达0.90 U/mL。抑菌试验结果显示：该菌对青霉具有抑制效果,电镜观察显示FJAT-5561菌株的发酵上清液使青霉菌丝变形和萎缩,抑制菌丝生长。豆粕发酵试验结果表明,添加枯草芽孢杆菌FJAT-5561可降低豆粕中难降解的粗纤维含量,提升豆粕中的粗蛋白质含量。发酵后的豆粕中未检出黄曲霉素、赭曲霉毒、玉米赤霉烯酮和脱氧雪腐镶刀菌烯醇等真菌毒素,也未检出黄曲霉。