青海藏羊血清运铁蛋白多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对青海省三角城种羊场和达日县的１９６份藏羊血样进行了血清运铁蛋白多态性的研究。结果发现：①在被检藏羊的血清运铁蛋白位点上共发现ＴＦ￣Ｉ，ＴＦ￣Ａ，ＴＦ￣Ｇ，ＴＦ￣Ｂ，ＴＦ￣Ｌ，ＴＦ￣Ｃ，ＴＦ￣Ｄ，ＴＦ￣Ｍ，ＴＦ￣Ｅ，ＴＦ￣Ｑ和ＴＦ￣Ｐ１１个等位基因，其中ＴＦＣ（０．３２４０），ＴＦ￣Ｂ（０．２６７９）和ＴＦ￣Ｄ（０．２１６８）为优势等位基因；②共发现ＴＦＩＥ，ＴＦＡＡ，ＴＦＡＢ，ＴＦＡＣ，ＴＦＡＤ，ＴＦＡＭ，ＴＦＧＢ，ＴＦＧＬ，ＴＦＧＣ，ＴＦＧＤ，ＴＦＢＢ，ＴＦＢＣ，ＴＦＢＤ，ＴＦＢＭ，ＴＦＬＣ，ＴＦＬＤ，ＴＦＬＥ，ＴＦＣＣ，ＴＦＣＤ，ＴＦＣＥ，ＴＦＣＱ，ＴＦＣＰ，ＴＦＤＤ，ＴＦＤＭ，ＴＦＤＥ和ＴＦＤＱ２６种基因型，其中ＴＦＢＣ（２０．４１％）、ＴＦＣＣ（１３．７８％）和ＴＦＢＤ（１１．７４％）为优势基因型。     

甘肃省鸡的14种传染病血清学调查

应用血清学方法对甘肃省６４个县（市、区）１４２个鸡场鸡的１４种传染病进行了调查，结果ＩＢＤ阳性率为３６．３４％，ＭＤ为２８．４７％，ＮＤ为３４．８２％，ＩＢ为３４．８２％，ＥＤＳ－７６为７．２０％，ＲＥＯ为１８．９６％，ＡＡＩ为２１．０６％，ＡＬ为４．４４％，ＭＧＧ为３８．７１％，ＦＣ为１８．０１％，ＰＤ为２３．２７％，ＩＣ为３１．１２％，ＡＣ为３６．３５％，表明甘肃省普遍存在着上述１４种病的感染     

BWEL-SPF鸡群对鸡传染性法氏囊病强毒的敏感性试验

用三种不同鸡传染性法氏囊病强毒株,对ＢＷＥＬ－ＳＰＦ鸡群１－１０个家系３周龄鸡进行敏感性试验,观察比较鸡群各家系对不同敏感性,测定不同毒株的毒价。广西强毒株（ＩＢＤＶ－ＧＸ株）〈ＬＤ５０为１０＾５．０／０．２ｍｌ;湖南强毒株,ＬＤ５０为１０＾５．２／０．２ｍｌ;吉林强毒株（ＩＢＤＶ－ＪＬ株）,ＬＤ５０为１０＾５．５／０．２ｍｍｌ,以１００ＬＤ５０攻毒剂量,对ＢＷＥＬ－ＳＰＦ鸡１￣１０家系的致死率为     

鸡产蛋下降综合症灭活疫苗研究──EDS_（76）—NE_（4）株病毒的培养与鉴

在对ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒进行血清学鉴定之后，于鸭胚（ＤＥ）、鸭胚成纤维细胞（ＤＥＦ）、鸡胚（ＣＥ）、鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）和鸡胚肝细胞（ＣＥＬ）上适应培养。结果表明，ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒为鸡产蛋下降综合症病毒，该病毒能在ＤＥ、ＤＥＦ、ＣＥＬ上增殖，在ＤＥ上增殖，尿囊液的血凝价（ＨＡ）可达１∶２０４８０─１∶３２７６８０倍。     

鸡减蛋综合征病毒DNA结合蛋白的基因结构及同源分析

从中国发病鸡群中分离的鸡减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）ＡＡ－２株，经常规方法提取其病毒核酸后，构建了限制性内切酶ＰｓｔⅠ及ＨｉｎｄⅢ水解片段的基因文库。对其中ＨｉｎｄⅢ－Ｆ片段（５２．９～５８．９ｍｕ）的正反２条链的序列测定发现，其反链存在１个编码容量为３８７个氨基酸（ａａ）的开放读码框架（ｏｐｅｎｒｅａｄｉｎｇｆｒａｍｅ，ＯＲＦ），经Ｇｅｎｅｂａｎｋ／ＥＭＢＬ同源搜寻后证实其编码产物为ＥＤＳＶ的ＤＮＡ结合蛋白（ＤＢＰ）。与其他腺病毒ＤＢＰ的氨基酸序列进行同源比较，其Ｎ端同源性在１９．０％～４６．２％之间，Ｃ端同源性在２７．７％～６０．４％之间。腺病毒ＤＢＰ的３个保守序列ＣＲ１，ＣＲ２，ＣＲ３在ＥＤＳＶＤＢＰ中有较大变化，但ＥＤＳＶＤＢＰ的锌指框架（Ｚｎ２＋ｆｉｎｇｅｒｍｏｔｉｆ）却保留了对其功能必需的残基。     

从疑似IBD病鸡的法氏囊组织中分离到1株ARV

从暴发类似传染性法氏囊病（ＩＢＤ）的江苏省某鸡场采集病鸡法氏囊组织制成组织悬液，接种鸡胚卵黄囊，部分鸡胚３～５ｄ死亡，部分鸡胚不死亡但有病变。用感染胚卵黄囊和绒尿膜混合物，接种鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ），盲传３代后，发现以合胞体为特征的细胞病变（ＣＰＥ）。感染细胞做超薄切片电镜观察，可见细胞浆内病毒粒子呈整齐的晶格状排列。用免疫沉淀法提取病毒抽提核酸，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳，可见规律排列的１０条带，呈３－３－１－３排列。与禽呼肠孤病毒（ＡＲＶ）参考毒株Ｓ１１３３株的核酸谱带的数目和位置相同。血清学试验与ＡＲＶ呈阳性反应，与传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）呈阴性反应。证明分离病毒为ＡＲＶ     

混合保护液和冻前处理方法对小鼠胚胎一步冷冻效果的影响

选用Ａ￣Ｅ５种混合保护液：Ａ．二甲亚砜（ＤＭＳＯ）＋乙醇（ＥＧ），Ｂ．甘油（ＧＬ）＋丙二醇（ＰＧ），Ｃ．ＧＬ＋ＥＧ，Ｄ．ＧＬ＋ＤＭＳＯ，Ｅ．ＰＧ＋ＥＦ，以２种冻前处理方法，对小鼠桑椹胚和囊胚进行一步冷冻，冷冻混合保护液中各种保护剂浓度均为２５％。法的冻前平衡液为ＶＳ２的对倍稀释液；法的冻前平衡液中，前一种保护剂浓度为１０％，后一种保护剂浓度为２０％。胚胎于室温（２０℃）下在ＶＳ１中平衡５ｍｉｎ或Ｖ     

双疗程法治疗肉鸡大肠杆菌病

作者进行了双疗程法治疗肉鸡大肠杆菌病的试验，试验鸡共５０００只，设９个治疗组，１个对照组，每组５００只ＡＡ肉鸡。试验组鸡群于１～７天，２２～２８天，分别选用敏感抗菌素氟哌酸（ＦＰＡ，５０ＰＰＭ），强力霉素（ＤＯＣ。７５ＰＰＭ，），氯霉素（ＣＭＴ，７５０ＰＰＭ）进行双疗程治疗，取得了满意的效果。ＤＯＣ－ＣＭＴ、ＣＭＴ－ＤＯＣ、ＦＰＡ－ＤＯＣ、ＤＯＣ－ＦＰＡ、ＦＰＡ－ＣＭＴ、ＣＭＴ－ＦＰＡ、ＤＯＣ－ＤＯＣ、ＦＰＡ－ＦＰＡ、ＣＭＴ－ＣＭＴ各试验组的存活率分别为９２．８％、８７．６％、９７．２％、９６．４％、９５．８％、８９．６％、９４．６％、９６．２％、８８．４％。对照组的存活率７９．４％。     

鸡产蛋下降综合症灭活疫苗研究：EDS76—NE4株病毒的培养与鉴定

在对ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒进行血清学鉴定之后，于鸭胚（ＤＥ）、鸭胚成纤维细胞（ＤＥＦ）、鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）和鸡胚肝细胞（ＥＣＬ）上适应培养。结果表明，ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒为鸡产蛋下降综合症病毒，该病毒能在ＤＥ、ＤＥＦ、ＣＥＬ上增殖，在ＤＥ上增殖，尿囊液的血凝价（ＨＡ）可达１：２０４８０－１：３２７６８０倍。     

鸡传染性喉气管炎免疫扩散试验研究

鸡传染性喉气管炎免疫扩散试验的最佳条件是：用ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）或鸡胚肾细胞（ＣＥＫ）制备抗原，用８％ＮａＣｌ的ＰＢＳ（ｐＨ７．２）配制１％的琼脂糖，孔径、孔距均为３ｍｍ。     

农业部批准进口兽药注册目录(47、48)

我国农业部于１９９９年１月２５日和５月６日发布第４７、４８号公告，批准以下外国厂商的兽药产品在我国注册和再注册，并核发《进口兽药登记许可证》，产品检验按农业部发布的进口兽药质量标准执行。兽　药　名　称生　产　厂　家许可证号有效期４７鸡多乐ＬＡＣＴＢＩＯ日本基因（源）集团公司ＣＨＥＮＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮＪＡＰＡＮ（９９）外兽药准字０１号１９９９．１—２００３．１２多拉菌素注射液ＤＯＲＡＭＥＣＴＩＮＩＮＪＥＣＴＩＯＮ１％（通灭ＤＥＣＴＯＭＡＸ）美国辉端公司巴西生产厂ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＩＯＰＦＩＺＥ…     

鸡副嗜血杆菌（HPG—A221.C668）对10个家系BWEL—SPF鸡胚的感？…

用鸡副嗜血杆菌国际标准株（ＨＰＧ－Ａ２２１．Ｃ６６８０分别接种１－１０个家系的ＢＷＥＬ－ＳＰＦ鸡６月龄鸡胚,观察攻毒后１６－３０小时鸡胚死亡的情况。结果,第５,７,８家系死亡率为１００％,１,４,６家系死亡率为９０％;２,３,９,１０家第死亡率为８０％。８５％,１０个家系ＨＰＧ平均死亡率为９０．５％。对照组（ＨＷＬ－ＳＰＦ鸡胚）平均死亡率为９０％。     

鸡传染性贫血病毒感染鸡血清对骨髓造血祖细胞增殖功能的影响

本文研究了鸡传染性贫血病毒感染鸡血清对正常鸡骨髓ＣＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ集落生长的影响．结果发现，ＣＩＡＶ感染后第２１天的鸡血清对骨髓ＣＦＵ－Ｅ生长具有明显抑制作用（Ｐ＜０．０５），于感染后第７、１４、２１天的血清对ＣＦＵ－ＧＭ呈现明显仰制作用（Ｐ＜０．０５）。说明感染鸡血清中存在对骨髓造血祖细胞增殖具有抑制作用的因子．     

BFF,rbGH对牛卵泡卵母细胞体外受精后发育的影响

利用屠宰黄牛卵巢，对２～５ｍｍ卵泡卵母细胞的体外成熟（ＩＶＭ）、体外受精（ＩＶＦ）、受精卵的体外培养（ＩＶＣ）进行了系列研究。结果表明，在成熟培养液中单独添加１０％Ｄ０ＥＣＳ（发情当天牛血清）获得了卵泡卵母细胞受精后较高的卵裂率（６４．７％）、桑椹胚发育率（３９．９％）和囊胚发育率（２４．８％），说明在成熟培养液中单独添加Ｄ０ＥＣＳ是可行的；在含１０％Ｄ０ＥＣＳ的成熟培养液中再添加１０％或２０％ＢＦＦ（牛卵泡液），均能提高受精卵的卵裂率以及桑椹胚和囊胚的发育率，以添加２０％ＢＦＦ效果较好，其囊胚发育率（３５．０％）显著高于对照组（２４．８％，Ｐ＜０．０５）；在卵泡卵母细胞成熟培养系统和受精卵共同培养系统中添加１０μｇ／Ｌ重组牛生长因子（ｒｂＧＨ），虽对体外受精卵的卵裂率无显著影响（Ｐ＞０．０５），但能显著提高卵裂胚的囊胚发育率（Ｐ＜０．０５）     

简述引起鸡产蛋下降的主要传染病

引起鸡产蛋下降的因素很多，有：疾病、营养、光照、温度、空气、水质、体重均匀度及环境应激等。而鸡传染病则是其中最大的隐患，如：减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）、鸡传染性支气管炎（ＩＢ）、产蛋鸡非典型新城疫（ＮＤ）、鸡肿头综合征（ＳＨＳ）、禽流感（ＡＩ）、禽脑脊髓炎（ＡＥ）、禽痘（ＰＯＸ）、败血霉形体（ＭＧ）、传染性鼻炎（ＩＣ）、禽霍乱（ＰＣ）等。现对它们的主要症状及所造成的减蛋等危害简述如下： 一．鸡产蛋下降综合征（ＥＤＳ－７６） 主要侵害商品蛋鸡和种鸡，造成产蛋量严重下降及蛋的品质降低。 病原：为ＥＤＳ…     

超排山羊卵巢卵母细胞体外成熟和体外受精的研究

以ＴＣＭ１９９＋１０ｍｍｏｌ／ＬＨＥＰＥＳ＋青霉素（６ｍｇ／Ｌ）＋链霉素（５ｍｇ／Ｌ）为基础培养液（ＢＭ），再分别加入不同成分，配成５种卵母细胞成熟液：（Ａ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ；（Ｂ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ＋ＨＣＧ（２．５ｍｇ／Ｌ）；（Ｃ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ＋ＨＣＧ＋Ｅ２（１ｍｇ／Ｌ）；（Ｄ）ＢＭ＋１０％ＦＣＳ＋ＨＣＧ＋Ｅ２；（Ｅ）ＢＭ＋１０％ＥＧＳ＋ＨＣＧ＋Ｅ２＋颗粒细胞（１．５×１０６～３．０×１０６个／ｍＬ）。在３８．５℃、５％ＣＯ２下培养２６ｈ，排卵后第１天卵巢卵母细胞体外成熟率分别为６７．６７％（２０／３０），６０．４２％（２９／４８），８３．６７％（４１／４９）和８０．８２％（５９／７３），排卵后第５天卵巢卵母细胞，在培液Ｄ中体外成熟率为７１．４３％（４５／６３）。排卵后第１天的９８枚卵巢卵母细胞，体外成熟体外受精卵裂率为２１．４３％，２１枚２细胞胚移植５头受体获２头羔羊。研究表明，超排山羊卵巢卵母细胞经体外成熟可获得大量廉价的成熟卵母细胞，并可通过体外受精获得试管山羊     

鸡传染性贫血病对雏鸡新城疫疫苗免疫的抑制机理──Ⅰ．细胞因子的变化

１日龄健康ＡＡ雏鸡感染ＣＩＡＶ后８天进行ＮＤ疫苗免疫，免疫后２９天用ｖＮＤＶ攻击，于免疫后７、１４、２８和攻毒后１０天取材检测．给果，感染ＣＩＡＶ雏鸡经ＮＤ免疫后７天，胸腺Ｔ细胞白细胞介素２（ＩＬ－２）诱生活性比未感染的免疫对照鸡明显降低（Ｐ＜０．０１）；脾脏Ｔ细胞ＩＬ－２诱生活性于７和２８天显著降低（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）．感染免疫鸡免疫后１４天脾脏淋巴细胞干扰素（ＩＦＮ）诱生活性明显降低（Ｐ＜０．０１）．结果表明感染ＣＩＡＶ鸡对ＮＤ疫苗免疫的分子免疫调节作用明显减弱，ＨＩ抗体效价于免疫后７～２８日明显降低（Ｐ＜０．０５）。ＮＤ强毒攻击后，ＣＩＡＶ感染ＮＤ免疫雏鸡的免疫保护率为６０％％，明显低于免疫对照鸡（１００％）．     

ELISA检测鸡传染性贫血病病毒抗体中的非特异性反应问题

为了监测ＣＳＩＲＯＳＰＦ鸡群，经常用商业ＥＬＩＳＡ试剂盒检测鸡群的抗鸡传染性贫血病毒（ＣＡＶ）抗体。近来发现个别鸡群的阳性率达１８．２％，占总数的２．７％。但后来采血发现大部分可疑鸡都为阴性，可见前面的结果存在假阳性。     

异源抗原在建立ELISA检测传染性法氏囊病毒抗体中的应用

本文报告采用ｖｅｒｏ细胞增殖的ＩＢＤＶ抗原建立了间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），用于定量检测鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）抗体。该法快速、敏感性高、特异性强、重复性好。同时，通过３０份血清样品ＥＬＩＳＡ效价（ＥＴ）的对数值（ｌｏｇＥＴ）与血清Ｐ／Ｎ值（待检血清ＯＤ值与阴性血清ＯＤ值之比）的线性回归分析，得直线方程ｙ＝３．０５８９＋０．０７３９ｘ（ｒ＝０．９１７４），从而血清样品的ＥＴ可通过血清单一稀释度的Ｐ／Ｎ值来计算。用不同来源抗原作ＥＬＩＳＡ表明，从ｖｅｒｏ细胞增殖的抗原比从鸡胚成纤维（ＣＥＦ）细胞增殖的抗原可提高检测血清ＯＤ值近２０％，表现出异源抗原具有更高的特异性     

PCR检测鸡减蛋综合征病毒

根据已报道的鸡减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）病毒ＤＮＡ序列，设计合成了１对引物，建立了ＥＤＳ－７６病毒的双温式聚合酶链反应（ＰＣＲ）诊断方法。该方法对ＥＤＳ－７６病毒长春株、河南株和广东株扩增结果均为阳性；而对致死鸡胚孤儿病毒（ＣＥＬＯＶ）、鸡病毒性关节炎病毒（ＶＡＶ）、鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）、鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）和鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）的扩增结果均为阴性。可检测ＥＤＳ－７６病毒ＤＮＡ为０．３×１０－４ｐｇ。结果表明该方法特异且敏感。此外，将常规的三温式ＰＣＲ的操作规程改为双温式，反应体积由常规５０～１００μＬ改为２０μＬ，使其更加快速、简便、经济