不同氯化钠浓度及pH值对半刺厚唇鱼精子活力的影响

分别观察不同NaCl浓度和pH值对半刺厚唇鱼精子活力的影响。结果表明:NaCl浓度为0.70%～0.75%时,精子运动时间和寿命相对较长,但浓度超过0.75%时精子活力开始受到抑制,运动能力和寿命下降;半刺厚唇鱼精子对溶液酸碱性的适应能力很弱,仅在pH6.5～7.5的溶液中有运动能力,在pH7.0溶液中运动能力及寿命最强,超出这个范围精子没有运动能力。     

秦川牛颗粒冷冻精液解冻液配方的选择及适宜解冻速度

用不同配方的解冻液解冻秦川牛颗粒冷冻精液与2．9％柠檬酸钠对比，结果表明解冻后精子活力差异不显著，但在35℃条件下的存活时间和在5℃条件下保持受精能力的差异极显著；对用不同解冻速度解冻后精子的活力及5℃条件下保持受精能力时间的对比结果表明，75℃／s秒的解冻速度效果最好，组间差异极显著。     

安钠咖在猪精液保存液中最适宜含量的探讨

<正> 在猪精液保存液中,加适量的安钠咖在一般保存条件下,能增强猪精子的活力,延长猪精液保存时间等,已为广大从事猪人工授精工作者所证实。但实践中,有时也会出现相反的效果。为了弄清安钠咖在猪精液保存液中的最适宜含量,在实际生产过程中用不同量安钠咖的保存液,对猪精液的稀释,进行了实地的对比试验。     

不同稀释液对藏猪精液4℃保存效果的影响

为探讨不同精液稀释液对4℃保存藏猪精液的效果,保证优良藏猪种公猪精液的合理、高效利用,该试验选用5种常用的猪精液常温保存稀释液,并在藏猪精液4℃保存至第5天时检查藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率、精子质膜完整率等。结果表明,在精液保存过程中,2号液对藏猪精液的保存效果最佳,精子活力在保存至第5天时仍然保持在0.54,且藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率、精子质膜完整率均高于其余4组（P〈0.05）。该试验研究初步筛选了4℃保存藏猪精液的稀释液,为今后藏猪精液的生产应用奠定了基础。     

附睾尾液对绵羊精液冷冻保存的影响

实验旨在研究冷冻稀释液中添加附睾尾液（Cauda Epididymal Fluid,CEF）对绵羊精液冷冻保存的影响。利用假阴道法收集4只湖羊精液并混合,以附睾尾液中总蛋白为基准,在冷冻稀释液中分别添加不同浓度CEF(0、140、280、420μg/mL)。精液经过冷冻后投入液氮保存,解冻后检测精子活力、运动参数,以及质膜完整率、顶体完整率、线粒体膜电位、37℃精子存活时间等指标。结果表明：冷冻-解冻后280μg/mL CEF组的精子活力、前向运动、平均路径速度、直线运动速度、直线度、线性度、头部横向位移幅度均显著高于其他各组（P<0.01）,曲线运动速度高于其他各组（P<0.05）;精子质膜完整率、顶体完整率也高于其他各组（P<0.05）;JC-1染色结果显示,280μg/mL CEF组精子线粒体膜电位高于其他各组（P<0.05）;280μg/mLCEF组精子在37℃环境下可存活14h,较对照组精子能多存活4h。可见,在冷冻稀释液中添加适量CEF可以提高精液的冷冻效果。     

低温下基于Lakes液的皖西白鹅精液稀释液研究

为研究低温(2~5℃)条件下皖西白鹅精液稀释液,以Lakes液为参考,通过更换糖(果糖、葡萄糖、蔗糖)和缓冲物质(柠檬酸钾、Tris、EDTA)来筛选最佳组合。结果表明:①Lakes液(果糖+柠檬酸钾)中,精子有效保存时间为42 h,总保存时间为234 h。②与Lakes液相比,"果糖+Tris"组合最佳,精子有效保存时间为48 h(P<0.01),总保存时间为264 h(P<0.01);其次为"葡萄糖+Tris"组合,精子有效保存时间为43 h(P(0.05),总保存时间为240 h(P<0.01)。③其他组合的有效保存时间及总保存时间均低于Lakes液(P<0.01)。     

维生素B12解冻牛冷冻精液效果探析

用ＶＢ１２液在３５℃,４０℃,７０℃三种解冻温度下,解冻牛冷冻精液,并与Ｔｒｉｓ－果糖液和２．９％柠檬酸钠液作解冻效果比较。结果表明：三种解冻液解冻后精子的活力相近,经过保存后ＶＢ１２液显著高于２．９％柠檬酸钠液（Ｐ〈０．０５）。而与Ｔｒｉｓ－果糖液相近,不同解冻液解冻后的精液作精子上游法测定,在第２、第３段中所含精子数,Ｔｒｉｓ－果糖液和２．９％柠檬酸钠解冻液解冻的每段递减３０％￣９０％,而ＶＢ     

羊精液稀释保存液的筛选

试验旨在探讨不同稀释保存液对常温下羊精子活率及存活时间的影响。选取哺乳动物8种常用精液稀释液配方,检测精液稀释后精子活率变化,分析精子存活时间及生存指数。结果表明:不同稀释液对羊精子活率的影响均有差异,精子活率会随着保存时间的增加而降低;同种稀释液在4℃条件下对精子的保存效果更好,与25℃条件下相比,各项指标均有极显著的延长和提高(P0.01);B组液(无水葡萄糖+柠檬酸钠+新鲜卵黄)精子总存活时间、有效存活时间和生存指数在4℃条件下分别为(108.2±9.6)h,(61.5±7.4)h和(63.5±5.8)h,与其他各组相比差异显著(P0.05),可应用于生产。     

猪精保存液成分的改进及卵黄和制菌物质适当含量的測定

本研究是在1961年猪精液保存試验的基础上从改变保存液成分进一步提高精子的存活能力。共进行了三个实驗,在第一实驗中比較了6种成分不同的保存液在13—18℃下保存猪精液的效果。第二实驗和第三实驗是測定保存液中卵黄和制菌物质的适当含量。在三个实驗中,由两头公猪分別采取10,12和12次的精液,并将每次精液以样品平分法进行不同处理。稀释比例均为1:2。第一实驗的結果說明,精子在奶-檸-糖-黄保存液中的存活时間最久(373.6×17.3小时),存活指数亦最大(140.4±5.4)。在保存期間,精子活率此在其他数种保存液中維持較高的水平,保存4天活率仍在0.6以上。奶-糖-黃液Ⅱ及糖-黄液的效果虽然較上述一种为差,但优于共他三种奶-檸-黄液。第二实驗的結果确定在糖-黄液中当卵黄含量为20—30％时,所得結果最好,而在奶-檸-糖-黄液中,則以10—20P6的卵黄含量較为适当。第三实驗說明,在保存液中需要按一定的量同时添加青霉素、鏈霉素和氨苯磺胺三种制菌物质才能得到較好的結果。一般說来,每毫升保存波中上述三种制菌物质的适当含量分別为500—1000单位,500—1000微克,1—3毫克. 根据本研究的結果,在通常容易得到而易于控制的溫度——13—18℃下(在保溫瓶中裝以冶水,在凉爽季节可在室溫下),应用下列三种保存液可以有效的保存猪精子。保存三天后精子仍具有0.5以上的活率,可作为授精之用。 1.奶-檸-糖-黄液——加热处理(92°—95℃,10分钟)牛奶,2.9%二水檸檬酸鈉溶液,5％葡萄糖溶液等量混合再添加占最終容量10—20%的卵黄。 2.奶-糖-黃液Ⅱ——加热处理牛奶与5%葡萄糖溶液按1:3混合再添加占最終容量10%的卵黄。 3.糖-黄液——5%葡萄糖溶液与卵黄按7:3或8:2相混合。以上三种保存液每毫升添加青霉素500—1000单位,鏈霉素500—1000微克,氨苯磺胺1—3毫克。     

多浪羊细管冷冻精液制作技术的研究

为保存和利用优秀地方品种多浪羊的遗传资源,试验在多浪羊原产地进行了细管冻精制作试验.用采集的多浪羊种公羊精液,比较5种冻精保存液配方的细管冻精冷冻效果,测定解冻后精子活力.结果表明:4.83%乳糖保存液解冻后精液的活率平均为36% ,优于其它4种保存液,且差异极显著(P<0.01),解冻后精子的畸形率也均低于其它4种稀释液,差异极显著(P<0.01).表明4.83%的乳糖保存液配方是理想的绵羊细管冻精稀释液.     

EGTA对猪精液液态保存的影响

猪精液液态保存体系中,钙离子浓度升高将降低精子活力,缩短精子体外保存时间。常用的金属螯合剂EDTA的溶解度较低,且容易发生沉淀,因此改进螯合剂对于改进猪精液保存液配方,提高猪精液液态保存质量十分重要。本研究中我们在精液液态保存液中分别添加不同浓度(1.5,3,6,12 mmol/L)的钙离子螯合剂EGTA,检测其对猪精子的活力、质膜完整性、顶体完整率、获能情况以及受精能力的影响。结果表明,精液保存液中添加EGTA能显著提高猪精子保存质量,其中添加3 mmol/L EGTA效果最好(P<0.05)。与对照组相比,添加3 mmol/L EGTA时,体外受精率和囊胚率显著提高(P<0.05)。因此,精液保存液中添加EGTA有助于提高猪精液液态保存的质量。     

稳定pH值对猪精液液态保存效果的影响

为了研究pH值变化对猪精液液态保存效果的影响,找到适合猪精液液态保存pH值,从而改进液态保存液的配方,提高人工授精效率,试验比较了不同pH值条件下猪精液液态保存效果,通过检测精子活力、存活时间、顶体完整性和质膜完整性等参数,研究pH值变化对猪精液液态保存效果的影响,并尝试改进保存缓冲液。结果表明:采用Androhep保存时,最佳初始保存pH值为6.40。在保存的第3天稳定pH值组能够显著提高精子活力(P0.05),用2-吗啉乙磺酸(MES)代替Androhep保存液中的4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES),在保存的第3天能显著提高精子活力、存活时间(P0.05),同时维持更高的质膜完整性,但是顶体完整性差异不显著(P0.05)。说明采用能够稳定pH值的保存液更有利于精液常温保存。     

常温保存猪精液稀释液的筛选试验

为研制优良稀释液,对3种常用猪精液稀释液和1种自配猪精液稀释液进行保存效果观察试验,并对自配稀释液中所保存的精子进行了配种试验。按10级评分法评定精子的活力,根据活力变化情况,计算有效存活时间、总存活时间、生存指数,结果表明,自配稀释液保存精子的效果优于Kiew液、葡柠液和葡糖液。配种试验结果表明,用自配稀释液中保存的精液对发情母猪进行输精,其受胎率和产仔数达到了生产需求,可在生产中推广使用。     

稀释液中添加番茄红素对鸡精子保护作用的研究

为了研发新的鸡精液稀释液,试验在YHFB鸡精液稀释液(分别为B1液、B2液、B3液、B4液)中添加浓度分别为0,0.1,0.2,0.05 mg/mL抗氧化剂番茄红素,按1∶1的比例对鸡混合鲜精进行稀释,稀释后置于长时间保存的低温条件(5℃左右)下,定期检查精子活力,当小于或等于0.3时停止检查;置于高温恶劣环境(41℃水浴)下,每30 min检查1次精子活力,直到精子全部死亡。结果表明:低温条件下不同时间精子活力B1、B4液,B2、B3液均差异不显著(P0.05),添加0.1 mg/mL番茄红素的B2液在48小时前精子活力稍大于B3液,48小时后B3液精子活力稍大于B2液;高温条件下不同时间精子活力各组之间无显著差异(P0.05)。说明在低温条件下鸡精液稀释液中添加0.1 mg/mL番茄红素,能显著延长精子活力,但在41℃的高温条件下对精子的保护作用不明显。     

猪精液常温保存效果观察

为研究不同保存条件对猪精液常温保存效果的影响,观察精子的活力和有效保存时间之间的关系,采用常温下对精液添加抗生素、不同精液稀释比例、光照、振荡、混入尿液等,每隔12 h 显微镜检测一次精子活力的方法,以筛选常温下猪精液保存方式。结果显示,在精液保存过程中加入抗生素时,精液有效保存时间和精子活力明显高于未加抗菌药物的稀释液,其中加入庆大霉素的保存效果最好;精液稀释比例为1∶1～1∶2时保存效果最好;光照及剧烈振荡条件下,精液活力下降很快;混入尿液很容易使精子死亡。上述研究结果表明,常温下猪精液的理想保存方式是,在保证精子密度的前提下,精液与稀释液比例为1∶1～1∶2;同时在精液稀释液中添加广谱抗生素;保存过程中应避免光照、振荡、尿液污染等的影响。     

添加N-乙酰半胱氨酸对猪精子常温保存的影响

为了研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对猪精子液态常温保存的影响,试验向保存液中添加不同浓度的NAC(0.5 mmol/L、1 mmol/L、2 mmol/L、5 mmol/L),在15℃条件下保存猪精子,检测保存后的精子活率、活力和弯尾率。结果表明:在稀释液中添加1 mmol/L的NAC能显著提高精子的活率、活力、弯尾率(P0.05)。通过添加NAC可以显著提高精子的保存能力。     

双优解冻液

双优解冻液是牛羊冷冻精子的良好复苏剂,其解冻质量的各项指标均比其它解冻液高。我们用2.9％的柠檬酸钠、维生素B_(12)注射液和双优解冻液分别对牛羊颗粒冷冻精作了解冻效果比较,并用解冻精液对内蒙古乌盟冷冻站的奶牛进行了输精试验。结果,双优解冻液解冻的精液比用上述二种溶液解冻的精液精子活力提高26.4％(20％～     

不同样品保存液和保存条件对动物细胞体外培养的影响

本研究取矮脚油鸡7日龄胚胎作为试验材料,用MEM、全培养基和PBS 3种不同的液体对鸡胚组织进行保存,同时在不同保存温度条件下按不同保存时间梯度,采用组织块贴壁培养法进行体外细胞培养。对细胞的保存液变化,细胞形态、细胞生长等情况进行研究,分析样品保存条件对细胞体外培养和细胞系构建的影响。结果发现,4 ℃保存的组织块培养效果明显优于室温保存;无论在4 ℃或常温,基础培养基保存的组织块培养效果明显优于保存液,全培养基效果最好。常温保存48 h以内3种保存液培养效果差别甚微,48 h后培养效果均急剧下降,96 h后保存在PBS中的组织失活,未长出细胞。本研究结果为建立细胞系采集样品的保存提供了一定的参考。     

上游处理方法对山羊精子活力影响研究

通过延长精子上游时间的方法研究了该处理过程中影响精子活力的几个因素。主要结果如下：１、不同的培养液对上游后的精子活力有影响;２、不含白蛋白（ＢＳＡ）的培养液不适于精子的上游处理;３、肝素浓度增加,上游处理后精子活力有所下降;４、山羊精（子）液在室温（２２℃）和低温（４℃）条件下至少可以保存２ｈ,上游处理后精子活力未受到明显影响,但保存时间长于２ｈ,上游处理后精子活力有所下降     

维生素B12注射液作为绵羊精液保存液的试验

绵羊精液保存方法有冷冻保存和鲜精保存两种,其中以冷冻保存较为理想,其具有保存质量高,保存时间长的优点。但是其设备投资大的问题制约了它的广泛应用,特别是在我国的大部分贫困山区当前尚难全面推广。精液的液态保存目前仍有很大的实用价值。以前就有学者以适宜的稀释液配方为基础添加维生素B12做试验,在作为黄牛的鲜精稀释液时,证明在稀释液中添加维生素B12不仅可以提高精子的活力和精子完整率,还可以降低畸形比例和精清中GOT活性,延长精子存活时间,提高受胎率。